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1.
天花粉蛋白诱发白血病细胞K562凋亡的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS),是一种从栝楼块根内提取的核糖体失活蛋白,具有流产、抗肿瘤和抗HIV等多种生物活性。本文利用FACS检测到天花粉蛋白可使K562白血病细胞产生明显的凋亡小峰、DNA区带电泳成典型的“梯状”条带,电镜检测可观察到明显的细胞凋亡形态。这些结果表明天花粉蛋白可以诱发K562白血病细胞产生凋亡。  相似文献
2.
天花粉蛋白的定点聚乙二醇修饰   总被引:3,自引:0,他引:3       下载免费PDF全文
 用一种定点修饰天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)的方法,将聚乙二醇(PEG)偶联到预先选定的位点.利用nTCS无半胱氨酸(Cys)残基这一特点,通过定点突变将一个Cys残基引入TCS以取代第7位的丝氨酸(Ser)残基.然后,与巯基反应的PEG-m aleim ide 即可偶联到新引入的Cys 残基上.经纯化得到均一的PEG-TCS复合物,在SDS-PAGE上显示一条区带,表观分子量为38 kD.复合物的体外致核糖体失活活性降低了6倍,但其体内引产活性与nTCS相同.定点PEG修饰方法为改造TCS提供了新途径.  相似文献
3.
用马来酸酐及环己二酮分别对天花粉蛋白上的Lys、Arg残基侧链进行修饰,并以竞争性酶免疫测定检查了化学修饰对TCS与小鼠抗TCS单抗TE-1(IgE型)反应活性的影响。两种修饰均使TCS与单抗TE-1反应活性下降。推测Lys残基可能直接参予了与单抗TE-1的结合。热变性实验提示TCS上单抗TE-1识别部位需要一定的空间构象。  相似文献
4.
一种快速简便的shi菌体DNA的抽提方法   总被引:2,自引:0,他引:2  
5.
天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)是一种单链核糖体失活蛋白,具引产、抗肿瘤、抗HIV等多种生物学功能。天花粉蛋白专一性杀伤敏感细胞的机制一直未被研究清楚。本文首次以生物分子相互作用分析(BIA)证明在天花粉蛋白敏感的细胞膜上存在着能与天花粉蛋白专一结合的组分。我们进一步利用[~(35)S]GTPγS结合实验发现天花粉蛋白能够激活敏感细胞膜上的G蛋白,而对不敏感细胞没有相应的G蛋白激活。这些结果表明了在敏感细胞膜上天花粉蛋白特异受体的存在。  相似文献
6.
 天花粉蛋白与CibacronBlueF_3GA结合特性的研究何贤辉,柯一保,孙汛,聂慧玲(中国科学院上海细胞生物学研究所,上海200031)天花粉蛋白(Trichosanthin,简称TC8)是从葫芦科植物栝楼(Tbehosantheskirilow?..  相似文献
7.
 研究了Papain及Trypsin裂解小鼠抗天花粉蛋白IgE单抗的条件及Fab的制备。Papain和Trypsin两者都可产生F(ab′)_2,分子量在150~160kD左右;经Papain裂解的主要产物中还有Fab,分子量72kD,可通过凝胶过滤获得纯的Fab。而Trypsin裂解物经DTT还原、碘乙酰胺烷化虽然也可得到Fab′(t),但不易纯化;可见,要制备Fab以采用Papain裂解为好,而制备F(ab′)_2则可采用Trypsin裂解。这二个酶的裂解速度是Trypsin大于Papain。  相似文献
8.
影响PCR产物特异性和得率的因素很多,本文从实验得到的结果出发,对用PCR钓出较长DNA片段时dNTPs和Taq DNA聚合酶对其特异性和得率的影响进行了讨论。  相似文献
9.
噬菌体DNA的制备和纯化是分子生物学研究中极为重要的一环,在基因库和eDNA库的建立,以及DNA克隆和筛选等方面都是不可缺少的。噬菌体DNA的制备可以通过噬菌体感染细菌在琼脂板上繁殖(称为平板法),也可以在液体培养液中繁殖(称为液体法)。平板法多用  相似文献
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