中国部分黄牛品种mtDNA遗传多态性研究

对我国8个黄牛品种22个个体的mtDNA D-loop区910bp全序列进行了分析。结果表明：8个黄牛品种D-loop区序列中，A T平均含量为61．65％；经比对，共检测到66个核苷酸多态位点，约占核苷酸总数的7．25％；D-loop全序列突变类型有5种，即转换、颠换、插入、缺失及转换与颠换共存，它们分别占核苷酸多态位点的81．82％、6．06％、7．57％、3．03％及1．52％。以欧洲牛mtDNA D-loop全序列为标准，8个黄牛群体D-loop的平均核苷酸变异率分3个层次：西镇牛、蒙古牛、黑白花牛及秦川牛的核苷酸变异率最低，分别为0．37％、0．44％、0．52％和0．66％；南阳牛与郏县红牛的核苷酸变异率居中，分别为1．91％和2．02％；晋南牛与岳阳牛的核苷酸变异率最高，分别为4．47％和4．73％。中国黄牛品种内D-loop区序列歧异度为0．55％～5．39％，品种间序列歧异度为1．21％～6．59％。在所测黄牛个体中，mtDNA D-loop序列由19种单倍型组成，单倍型比例为86．36%，说明中国黄牛mtDNA遗传多态性很丰富。由此构建了中国8个黄牛品种的NJ分子系统树，聚类分析表明：所测黄牛的mtDNA D-loop序列表现为3个单倍型组，从而揭示中国黄牛可能有3个母系起源，以普通牛起源和瘤牛起源为主。  

中国驴种线粒体DNA D-loop多态性研究

利用Clustal W软件对我国5个家驴品种26个个体的mtDNA D—loop区399bp序列进行同源序列比对，共检测到核苷酸多态位点23个，只有转换1种类型，约占所测核苷酸的5．76％。以欧洲驴D—loop作对照，我国5个家驴品种D—loop区序列的平均核苷酸变异率为1．80％，其中凉州驴的平均核苷酸变异率为0．35％．云南驴为1．25％，关中驴为2．30％，新疆驴为2．91％，佳米驴为2．20％。家驴品种内与品种间mtDNA D—loop区序列歧异度分别为0．25％-5．01％和4．51％-5．51％，说明家驴品种间D—loop区序列多态性比较丰富。在所测家驴个体中，mtD NAD—loop序列由11种单倍型组成，单倍型比例为42．31％，表明我国家驴mtDNA遗传多态性正逐步丧失，需要加强其种质资源保护。引用GenBank中亚洲野驴和欧洲家驴的序列，构建了我国5个家驴品种的NJ分子系统树，首次从分子水平证实中国家驴可能起源于非洲野驴，而与亚洲野驴无关。  

中国山羊mtDNA D-loop遗传多样性及其起源研究

采用DNA测序技术分析了中国9个山羊品种（板角山羊、成都麻羊、贵州黑山羊、贵州白山羊、黔北麻羊、马头山羊、陕南白山羊、黄淮山羊和雷州山羊）共计128个个体的mtDNA D-loop全序列。结果表明：山羊mtDNA D-loop全序列长度为1212-1213bp，检测到102个变异位点，约占分析位点总数的8．42％，可变位点中转换占99个，颠换2个，1个转换/颠换共存；界定了92种单倍型，有78种为各品种独享单倍型，另外14种为群体内或群体间共享单倍型。9个山羊品种单倍型多样度为0．9333-1．0000，核苷酸多样度为0．7062％-1．8265％，表明中国山羊品种遗传多样性丰富。根据92种mtDNA单倍型构建了中国山羊的NJ分子系统树，聚类表明，中国山羊mtDNA D-loop序列单倍型分为支系A和支系B两大类。支系A包括75种单倍型，代表95个样本，占总数的74．22％；支系B包括17种单倍型，代表33个样本，占总数的25．78％，说明中国山羊存在支系A和支系B两大母系起源。对中国山羊mtDNA D-loop的支系A和支系B进行核苷酸不配对分布曲线分析和Fu的Fs中性检验，分析表明，支系A的分布曲线呈单峰形，Fs值为-24．6491，P值为0．0000，显著偏离中性，表明山羊支系A曾经历群体扩张；支系B呈近似双峰分布，Fs值为-3．3947，P值为0．0980，中性检验差异不显著，表明山羊支系B没有经历群体扩张，群体大小保持相对稳定。山羊支系B可能起源于中国。  

贵州黄牛mtDNA D-loop 遗传多样性研究

对贵州4个地方黄牛品种共计82个个体的线粒体DNA D-loop区全序列910 bp进行分析，检测到31种单倍型，其核苷酸多态位点65个，约占所测核苷酸总长的7.14%，其中有62个转换，2个颠换，1个转换/颠换共存。贵州4个黄牛品种mtDNA D-loop区核苷酸多样度（π值）为2.16%～2.61%，单倍型多样度（H）为0.695～0.909，表明贵州黄牛mtDNA遗传多样性比较丰富。根据单倍型构建了贵州4个黄牛品种的NJ分子系统树。聚类表明,贵州黄牛有普通牛和瘤牛2大母系起源，其影响较为均一。并探讨了用核苷酸多样度π值的大小来衡量黄牛群体遗传分化程度的可行性。                 

西部地区主要猪种和野猪H-FABP基因分子标记

利用PCR-RFLP(Hinf I、Hae Ⅲ和Msp I 3种限制性内切酶)分子标记技术，检测了杜洛克猪、长白猪、大白猪、内江猪、荣昌猪、汉江黑猪、汉中白猪、八眉猪和野猪共计265头猪H-FABP基因5′-上游区和第二内含子区的遗传变异，并利用最小二乘模型分析了H-FABP基因对猪肌内脂肪含量的遗传效应。结果表明：（1）在Hinf I-RFLP位点上，上述品种和野猪均存在多态性，其中大白猪、八眉猪、汉江黑猪、汉中白猪和野猪表现为低度多态，杜洛克、长白猪、内江猪和荣昌猪为中度多态；除汉江黑猪（P<0.05）和野猪（P<0.01）外，其他猪种基因频率和基因型频率都处于Hardy-Weinderg平衡状态（P>0.05）；而在Hae Ⅲ-RFLP和Msp I-RFLP位点上，仅内江猪、荣昌猪、汉江黑猪和八眉猪为单态；（2）9种基因型对肌内脂肪（IMF）含量的影响，HH>Hh>hh，DD相似文献

原代猪前体脂肪细胞培养方法的优化

以胎猪皮下脂肪组织为材料，比较不同培养方法、消化酶、筛网孔径和离心力对培养猪前体脂肪细胞的影响。结果表明，组织块法与消化法均可培养出猪前体脂肪细胞，但组织块法培养的原代细胞中分化为成熟的细胞较少，消化法获得的细胞均匀一致，形态学染色鉴定大部分均可分化为脂肪细胞；在用消化法培养的过程中，采用Ⅳ型胶原酶消化脂肪组织，200目筛网孔径、800g离心力离心5min可获得大量的、纯度均一的细胞。可以认为，实验成功建立了猪前体脂肪细胞培养的优化体系，在体外重现了猪前体脂肪细胞增殖肥大的全过程。  

黄河裸裂尻鱼群体遗传结构和Cyt b 序列变异

测定了来自黄河上游和柴达木盆地托索湖的裸裂尻鱼共16个个体的Cyt b基因全序列（1141bp），探讨了种群结构和遗传多样性。用MEGA2．1软件分析了碱基组成和序列变异；以青海湖裸鲤、花斑裸鲤和极边扁咽齿鱼为外类群，用PAUP＊4．0b10程序构建了单倍型NJ树；用Arlequin Ver．2000程序计算了群体间遗传变异值（Fst）和Nm值以及群体分化概率值。结果显示，来自柴达木水系托索湖的裸裂尻鱼没有形成单系群，Fst=0．204（P〈0．05），Nm=1．95。初步判断，黄河和柴达木水系托索湖的裸裂尻鱼未显著分化，支持将柴达木裸裂尻鱼（Schizopygopsis kessleri）归并人黄河裸裂尻鱼（Schizopygopsis pylzovi）的形态学结果。两种群核苷酸多样度（π）分别为0．0012和0．0026，表现为较低水平。根据校正的分子钟推测，黄河和托索湖裸裂尻鱼群体分歧时间为距今7万年左右的更新世末期，结合地理分布的资料和古地质事件，对黄河裸裂尻鱼群体分布水系间的历史联系进行了分析。  

猪心脏脂肪酸结合蛋白基因PCR-RFLP分子标记研究

利用PCR-RFLP分子标记技术,检测了杜洛克、长白、大白、内江、荣昌、汉江黑、汉白、八眉和野猪共计265头猪心脏脂肪酸结合蛋白基因5'上游区和第二内含子区的遗传变异。结果表明,在HinfI-RFLP位点上,上述猪种和野猪均存在多态性,等位基因H的频率分别为0.7500,0.7188,0.9167,0.3333,0.1250,0.6909,0.1167,0.8500和0.9375;除汉江黑猪(P<0.05)和野猪(P<0.01)外,其余的猪种基因频率和基因型频率都处于Hardy-Weinderg平衡状态(P>0.05);大白、八眉、汉江黑、汉白和野猪表现为低度多态(PIC<0.25),杜洛克、长白、内江和荣昌猪为中度多态性(0.25相似文献

TNF-α影响胰岛素对原代培养大鼠脂肪细胞增殖及生脂基因的转录表达

采用RTPCR、MTT比色法和油红O染色提取法,分别测定外源TNFα、胰岛素对原代培养大鼠前体脂肪细胞增殖及脂肪生成和碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)、固醇调控元件结合蛋白(SREBP)1c、脂肪酸合酶(FAS)及乙酰辅酶A羧化酶(ACC)1基因转录表达的影响。结果表明,TNFα可有效抑制胰岛素对原代培养大鼠前体脂肪细胞增殖的促进作用,并通过抑制胰岛素对转录因子SREBP1c和脂肪酸合酶FAS及ACC1基因转录表达的促进作用,减少脂肪酸的生物合成,抑制成熟脂肪细胞的脂肪生成,证明TNFα是动物脂肪形成的有效抑制因子。此外,TNFα下调ChREBPmRNA表达,但胰岛素在低糖条件下对其表达没有明显影响  

维生素C对TNF-α诱导的原代培养大鼠脂肪细胞凋亡的影响

以5、10、50、100μmol／L维生素C（vit C）及其与10ng／ml TNF-α联合处理体外培养的大鼠脂肪细胞24h，采用流式细胞仪检测脂肪细胞凋亡率，光学显微镜和透射电镜观察脂肪细胞形态学变化。结果表明，高浓度vitC（100 μmol／L）单独作用及与TNF-α联用，均能显著提高脂肪细胞凋亡率（P〈0．01），且联用组凋亡率显著高于单用TNF-α处理组（P〈0．01）；低浓度vitc（5、10、50μmol／L）单独作用未检测到凋亡，且与TNF-α联用组凋亡率显著低于单用TNF-α处理组（P〈0．01）；光学显微镜和透射电镜观察可见100μmol／L vit C处理组出现凋亡的形态学特征，细胞收缩变圆，染色质致密浓染聚集在核膜边缘，核碎裂成多个凋亡小体，随即被邻近细胞吞噬。结果提示高浓度vit C（100μmol／L）可以引起脂肪细胞凋亡，并有效地增强TNF-α对脂肪细胞的凋亡作用．