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1.
一种带增强子的原核高效表达载体的构建及初步应用   总被引:30,自引:7,他引:23       下载免费PDF全文
构建的pTO-T7大肠杆菌高效融合表达载体,调控序列中有一个Ω序列和一个T7启动子串联;多克隆位点(MCS)包括8个常用酶切位点;可进行融合表达或者非融合表达,根据不同的需要加以选择;融合蛋白N端为T7g10的12个起始氨基酸,C端为His标签;含kan抗性基因作为选择标记。将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因克隆至pTO-T7载体,在E.coli中的表达结果表明,融合EGFP达到菌体总蛋白量的50%以上,90%以上的融合蛋白以可溶性形式存在,融合后的EGFP仍保持原有的荧光性质。与同时构建的不含Ω序列的pT-T7载体的表达产量的比较研究结果表明,Ω序列在pTO-T7载体中能显著提高表达效率。  相似文献
2.
锯缘青蟹精子超微结构的研究   总被引:23,自引:4,他引:19  
利用光镜和电镜观察了锯缘青蟹成熟精子的形态和超微结构。精子呈陀螺形,无鞭毛,在较宽的一端环生着10余辐射臂。精子由球状的顶体、核杯以及核衍生的辐射臂三部分组成。顶体包括顶体管和顶体囊,后者包绕在顶体管的中央管周围,并可分为头帽带,内层和外层区。顶体被杯状的核包裹,仅头帽露于精子表面。成熟的精子中,位于核杯和顶体管之间的核膜出现局部断续或消失,中心粒和一些胞器出现的核杯腔中。  相似文献
3.
锯缘青蟹卵黄发生期卵母细胞和卵泡细胞之间的结构变化   总被引:20,自引:0,他引:20  
通过电镜研究了锯缘青蟹二次卵巢发育过程中卵黄发生期(分为初期和后期)卵母细胞表面的结构和胞质的变化。卵黄发生初期分为:内源性卵黄发生阶段和有卵泡细胞直接参与的外源性卵黄合成阶段,前者特征为:在卵母细胞中充满了内质网泡,在泡内有不同程度的卵黄物质合成,此时在卵母细胞的表面区域,可见很多卵泡细胞向卵母细胞表面迁移,并包围卵母细胞。后者其特征是在卵母细胞的表面,有大量的胞饮小泡出现在卵膜的内面,随着两细胞表面膜的逐步融合和胞饮作用加强最后形成链锁状结构,胞质中靠近卵质周围有卵黄体的积极合成和大更换 脂肪滴积累,在此阶段的后期,卵泡细胞质已基本吸收完毕,卵泡细胞膜和卵母细胞膜融合,某些界面已无膜结构。卵黄发生后期在亲蟹孵出幼体后的第11d至第27d基本结束,此期也主要以外源性卵黄发生为主,在卵母细胞的周围,卵泡细胞迅速扩大,其间分布着大量的大小不同的囊泡和线粒体,在接近卵母细胞表面,还常可见大量的脂肪滴存在。卵泡细胞与卵母细胞间其膜结构完全消失,从而可使滤泡大片细胞质直接融入卵母细胞中,以后随着卵黄发生的进一步发展,卵母细胞与卵泡细胞的交界面逐步形成一个网状的膜结构屏障,同时在卵巢中可见正在降解的卵母细胞,在卵黄发生近结束以后,在卵母细胞的表面,逐步形成两层卵膜,这时的卵母细胞质中几乎充满了卵黄体和脂肪滴。  相似文献
4.
锯缘青蟹精巢发育的组织学观察   总被引:12,自引:0,他引:12       下载免费PDF全文
组织学观察表明,锯缘青蟹(Scylla serrata)精巢发育周期可以分为精原细胞期,精母细胞期,精子细胞期,精子期和休止期5个时期。在划分精巢发育期的基础上,结合生精小管直径的成熟节段比例这2个指标,可以较准确地反映锯缘青解精巢的发育状况。而成熟节段比例可以作为锯缘青蟹精巢发育的表征指标。  相似文献
5.
锯缘青蟹精子顶体反应的研究   总被引:9,自引:0,他引:9  
王艺磊  张子平  谢芳靖  李少菁 《动物学报》2001,47(3):310-316,T001,T002
采用正交实验法研究了诱导锯缘青蟹精子产生顶体反应的最佳条件。结果表明:从纳精囊中获得的精子,用离子载体A23187(64μg/ml)诱导,在CaCl2浓度为0.25%,pH为9.0的人工海水中40分钟,可以得到最大的顶体反应率(82.5%)。在此基础上采用光镜和电镜观察顶体反应过程中显微和超微结构的变化。顶体反应过程可大致分为两个时相,第一时相为顶体囊外翻;第二时相为顶体管前伸。本文还对顶体反应的作用进行了初步探讨。  相似文献
6.
桡足类消化酶活力的影响因子   总被引:7,自引:1,他引:6  
桡足类消化酶活力的影响因子汤鸿,李少菁(厦门大学海洋系,361005)FactorsInflueucingtheDigestiveEnzymeActivityofCopepods.¥TangHong;LiShaoching(O-ceanologyDe...  相似文献
7.
十足目受精生物学研究概述   总被引:6,自引:0,他引:6       下载免费PDF全文
由于十足目精子的特殊结构———无鞭毛、不运动、核呈凝絮状、顶体结构复杂,且受精过程迅速,特别是精卵识别、顶体反应,常常在瞬间发生,加上卵子富含卵黄而不易制片,使其受精生物学研究与其它精子具鞭毛的动物相比报道较少。本文就十足目受精生物学的研究做一简要的...  相似文献
8.
孵育温度对锯缘青蟹幼体质量的影响   总被引:6,自引:0,他引:6       下载免费PDF全文
朱小明  李少菁  金建锋 《生态学报》2002,22(10):1629-1634
研究了锯缘青蟹抱卵蟹培育和胚胎发育及孵化温度对刚孵化第 1期状幼体 ( Z1)干重 ( DW)和比能值 ( EC,J/mg)以及对幼体发育和存活的影响 .研究结果表明 :胚胎发育随孵育温度的升高而加快 ,但孵育温度与刚孵化幼体的干重和能量 ( E,J/ind)没有明确的相关性 ;而抱卵蟹培育和胚胎发育期间孵育温度的日温差对刚孵化青蟹幼体的干重和能量有明显的影响 ,并对幼体的存活和进一步发育产生影响。当孵育温度日温差≥ 2℃时 ,胚胎发育不整齐 ,孵化不同步 ,死卵或孵出原状幼体的比例高 ;孵化出的第 1期状幼体一般都无法蜕皮进入第 2期。孵育温度日温差与刚孵化幼体的干重或能量的相关性不确定 ,但当孵育温度日温差≥ 2℃时 ,刚孵化的状幼体的个体干重和能量的乘积 ( DW× E) <0 .74 6的几率显著增加 ,幼体可养活的几率极小 ,( DW× E)可作为判断刚孵化的第 1期状幼体能否正常生长发育的指标  相似文献
9.
生物间的生化相互作用研究——生态生化学的新进展   总被引:5,自引:0,他引:5  
随着科学的迅速发展,各门科学之间的相互渗透日益加强,从而诞生了不少新兴的交叉或边缘学科。生物科学也不例外。除了生物学本身各门学科的交叉以外(如生态生理学、生理遗传学等),生物学还与数、理、化等学科交叉(如生物数学、生物物理学、生物化学等),在这方面,生物学与化学的交叉(如化学生态学、化学生理学、化学分类学、化学胚胎学等)尤为突出。这是可以理解的,因为化学物质变化在生命活动(如代谢、生长、生殖等)  相似文献
10.
海洋浮游桡足类滞育的研究进展   总被引:5,自引:0,他引:5  
海洋桡足类在海洋生态系统中占有重要的地位,其重要的生理现象一滞育是影响其种群数量变动的重要因子。本文对海洋桡足类滞育的形式、滞育的意义、滞育卵的孵化与发育以及诱导桡足类滞育的环境因子等方面的研究进行了综述,同时还提出了今后研究的方向,以期对桡足类滞育机制的研究提供新的思路。  相似文献
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