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1.
肠道病毒71型的RT-PCR诊断及基因特征   总被引:63,自引:1,他引:62  
2002~2003年从上海市和重庆市手足口病患儿的疱液标本中分离到10株病毒,其中上海9株,重庆1株.利用两对分别针对EV71和Cox.A16病毒VP1区的特异性引物,用RT-PCR方法对病毒进行初步鉴别.根据PCR所用引物及PCR扩增出的产物片段大小不同,可初步判定出EV71和Cox.A16病毒的血清型别.RT-PCR结果提示,上海分离到的9株病毒中,有2株为EV71,其余7株病毒为Cox.A16;重庆分离到的1株病毒为EV71.10株病毒的RT-PCR产物经序列测定和分析证实,PCR定型结果正确,说明PCR法具有很高的特异性,可作为EV71初步鉴定的首选方法.对所分离的3株EV71病毒进行VP1区编码基因全序列的测定和遗传学分析,通过同源性比较和构建系统发生树发现,此3株EV71病毒和中国大陆已发表的7株EV71病毒(SHZH03、SHZH98、SH-F1、SH-F2、SH-H25、SH-H26和CHN-87)全部属于C基因型,与该型代表株比较,同源性为89.3%~94.6%;与A、B基因型代表株比较,同源性为81.3%~84.0%,差异较大.在C基因型中,此3株EV71病毒和中国大陆先前分离的6株病毒(SHZH03、SHZH98、SH-F1、SH-F2、SH-H25、SH-H26)的同源性较高,在94.5%~100%范围内.在系统发生树上,这9株病毒形成一个较独立的分支.与CHN-87株的同源性在92.1%~93.6%之间.与已知的C1、C2、C3亚型代表株比较,同源性在89.3%~92.9%,差异≥7%,因此认为可将这9株病毒划分为C4亚型.上海、重庆和深圳的EV71病毒有较高的同源性,提示该病毒EV71-CA亚型在中国大陆1998~2003年间有较广泛的传播.建立中国流行的EV71病毒毒株库和基因库,对诊断、预防和控制EV71在中国的爆发有重要意义,对加强EV71的实验室诊断、病毒学监测和病毒基因型和亚型的标准命名和分子流行病学研究有重要帮助.  相似文献
2.
中国6省2005年麻疹病毒分离株分子特征分析   总被引:28,自引:1,他引:27  
研究2005年我国6省麻疹暴发、流行的野毒株基因型特征和分子流行病学,为进一步的麻疹防治策略提供科学依据.用RT-PCR方法,从2005年6省分离的48株麻疹病毒株中扩增出核蛋白(nucleoprotein, N)基因C末端676个核苷酸片段.再对扩增产物进行核苷酸序列测定和分析,并以C末端456个核苷酸片段构建基因亲缘性关系树,进行核苷酸、氨基酸同源性分析.6省分离的48株麻疹病毒均为H1基因型,其中两株为H1b亚型, 其余为H1a亚型.48株野毒株的核苷酸同源性为95.1%~100%(核苷酸差异为0~22bp),氨基酸同源性为92.7%~100%;与我国疫苗株S191的核苷酸同源性为88.7%~92.5%,氨基酸同源性为88.0%~91.2%.其中Shaanxi05-1和Yunnan05-1,Anhui05-2和Ningxia05-9的N末端456个核苷酸的同源性为100%;Hebei05-19、Anhui00-2和Liaoning02-2,Hebei05-1和Chongqing04-3的核苷酸的同源性为100%.引起2005年我国6省麻疹暴发流行的野毒株为H1基因型,并以H1a为绝对优势亚型.各省之间存在相同毒株引起的传播链,不同年份之间存在相同麻疹野毒株的持续循环传播.同时提示,有必要进一步研究由核苷酸变异引起的氨基酸变异及中和抗原位点等生物学性状的改变,可能影响麻疹病毒的毒力和传播力.  相似文献
3.
S3307对烟草幼苗某些生理生化特性的影响   总被引:13,自引:0,他引:13  
烟草种子经S3307浸种后,其幼苗根系活力、根干重,叶绿素和可溶性蛋白质含量,光合速率,过氧化物酶,过氧化氢酶和硝酸还原酶的活性都有提高。  相似文献
4.
北艾蒿挥发油成分研究   总被引:9,自引:0,他引:9  
张燕 《广西植物》2006,26(1):110-112
采用水蒸气蒸馏法提取,运用毛细管气相色谱-质谱联用法对北艾蒿挥发性化学成分进行了分析,用气相色谱面积归一化法测定了各成分的相对百分含量。经毛细管色谱分离出26个峰,并鉴定出峰所对应的化合物。其主要化学成分为(Z,Z)-3,5-辛二烯(63.99%);2,5-辛二烯(10.08%);3,4,5-三甲基-1-己烯(3.55%);桉油醇(2.84%);长叶薄荷酮(2.36%);3-甲基-2-环己烯-1-酮(2.37%);樟脑(2.32%);十氢-1,1,7-三甲基-4-亚甲基-1H-奥(2.13%)等。  相似文献
5.
在传染性非典型肺炎患者组织和血液中发现冠状病毒   总被引:7,自引:3,他引:4  
用RT-PCR从广东两例传染性非典型肺炎(非典型肺炎)死亡病例的肺和脾标本中,以及北京、辽宁和宁夏非典型肺炎患者血清中,扩增出冠状病毒核苷酸序列。这些PCR产物为冠状病毒RNA聚合酶基因部分片段,所有测定的序列和国内外SARS病毒序列相同。这些发现提示,冠状病毒和非典型肺炎关系密切,有助于确定我国非典型肺炎的病因。所建立的套式PCR方法可以用于检测临床标本。由于血液中存在SARS病毒,进行血清操作时需要注意安全保护。  相似文献
6.
肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白ELISA检测方法的研究   总被引:7,自引:0,他引:7       下载免费PDF全文
以肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白为免疫原,获得了兔抗肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白抗血清,通过硫酸铵分级沉淀与吸附法相结合的方法对抗血清进行纯化,并在此基础上建立了肺炎克雷伯菌荚膜糖蛋白间接ELISA检测方法.该检测方法的检测灵敏度为0.031 mg/L,线性检测范围为2.5~30.0 mg/L,批内误差为1.04%~3.22%,批间误差为2.61%~8.35%.  相似文献
7.
家蝇蛹凝集素的分离工艺和性质的初步研究   总被引:6,自引:0,他引:6       下载免费PDF全文
通过缓冲液浸提、戊二醛固定化红细胞吸附、亲和层析和凝胶过滤等方法,从家蝇蛹中分离纯化出一种对半乳糖专一的凝集素.结果表明,亲和层析后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测家蝇蛹凝集素(MPL)分子质量为84 ku.SephadexG-200凝胶过滤后,MPL分子质量为86 ku.家蝇蛹凝集素专一性识别D-半乳糖,其血凝活力对热不稳定,不依赖Ca2+,在pH 6~9之间稳定.家蝇蛹凝集素对Escherichia coli, Bacillus subtilisSalmonella typhi有抑制作用.  相似文献
8.
固定液对原位杂交的影响   总被引:6,自引:0,他引:6  
原位杂交 (ISHH )属于固相分子杂交范畴 ,它是用标记的DNA或RNA为探针在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。它不仅保持了细胞固有形态而且对被测物准确定位。因此ISHH已被广泛应用于肿瘤的鉴定 ,预后分析及相关学科的研究之中。在长期的实验中发现不同的固定液对ISHH结果的影响明显 ,为此我们作了以下实验 ,拟寻找ISHH的最佳固定剂  材料和方法大肠癌标本 16例均为病理科送检标本 ,每例在相同部分取 4块 2× 1× 0 2cm组织分别于以下固定液中固定 :A组 :4 %多聚甲醛 ;B组 :10 %福尔马林 ;C组 :Carn…  相似文献
9.
松嫩草原黄墩蚁对羊草群落组成与生物量的影响   总被引:5,自引:0,他引:5  
研究了松嫩草原土壤动物优势类群黄墩蚁对羊草群落和羊草 虎尾草群落组成及生物量的影响。结果表明,黄墩蚁改变了其生境中的植被组成,两群落中的羊草密度增大,结穗率降低,但重量增加。受其影响,羊草和虎尾草的高度明显较大,地上生物量和地下生物量明显增加。  相似文献
10.
Cd2+对蚕豆根生长发育的影响   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的探明Cd^2+对蚕豆根生长发育的影响及其规律,为培育耐Cd^2+新品种提供一定的科学依据。方法以不同浓度的Cd^2+处理蚕豆根,然后在不同时间检测其色泽、弯曲程度和长度变化,同时利用改良的苯酚品红染色,在显微镜下观察根尖细胞的有丝分裂。结果当Cd^2+浓度〈10μmol/L时,它能促进根的生长和细胞有丝分裂,但对根的色泽和弯曲程度的影响不明显。在Cd^2+的浓度〉10μmol/L后,则逐渐使根色泽加深,弯曲程度增大,细胞有丝分裂指数下降,生长减慢。结论Cd^2+对蚕豆根生长发育有影响,其影响的程度与Cd^2+的浓度和处理时间有关。  相似文献
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