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1.
产植酸酶菌株的筛选及产酶条件的研究   总被引:10,自引:0,他引:10  
通过初筛和复筛,得到一株产植酸酶较高的黑曲霉AN00101菌株,并对该菌种的产酶条件进行了研究.结果表明:配制加水量为35%的麸皮固体培养基,在37℃培养114h,用3%CaCl2进行提取,每g固体发酵物酶活高达1.3×104IU.经L9(34)正交实验表明,硫酸铵和硫酸镁对产酶有显著的促进作用,适宜添加量分别为4%和0.3%.  相似文献
2.
植酸酶及其基因工程研究进展   总被引:9,自引:2,他引:7  
植酸酶可添加于食品与饲料中,能消除因不能降解的植酸所引起的抗营养作用,提高机体对蛋白质及多种微量元素的利用率,降低粪便中磷的含量,从而减少环境中磷的积累污染,有利于保护生态环境。弄清植酸酶的性质、基因结构和功能,了解其基因工程的研究进展,不仅具有重要的理论意义,而且在开发研究植酸酶制剂用于饲料、食品和医药等方面具有重要的实践价值。本文谨对植酸酶的性质、基因结构和功能及其基因工程的研究进展做一综述,并探讨了植酸酶的应用前景。  相似文献
3.
苏云金芽孢杆菌4.0718菌株的杀虫晶体蛋白基因分析   总被引:9,自引:4,他引:5       下载免费PDF全文
根据苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)cry1、cry2和cry3型基因的保守区分别设计了3对通用引物Un1(d)/Un1?、Un2(d)/Un2?和Un3(d)/Un3?,以Bt4.0718菌株质粒DNA为模板进行PCR扩增,通过扩增产物片段的分子量大小来确定该菌株所含有的杀虫晶体蛋白基因类型。随后根据上述3类cry基因的高变区设计特异引物再次进行PCR鉴定。结果表明:Bt4.0718菌株含有cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1Cb、cry2Ac和新基因cry4.5等6种基因类型。这一结果为利用该菌株构建高效广谱杀虫工程菌提供了客观依据。  相似文献
4.
植酸酶分子结构与功能研究进展   总被引:8,自引:1,他引:7  
程海娜  莫湘涛  陈宇  夏立秋 《生物技术》2003,13(3):48-48,F003
根据植酸酶的最新研究进展,综述了植酸酶的分子结构与空间构象,作用机制和对植酸降解的途径及其在酶学和蛋白质组学中的地位,并且对植酸酶今后研究发展方向作一探讨。  相似文献
5.
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)杀虫晶体蛋白的毒性片段包含三个不同的结构域,通过对毒性片段编码基因的定点诱变和体外重组,已经对结构域的功能有了较清晰的认识,一般认为结构域Ⅰ参与孔道的形成,结构域Ⅱ决定毒素与受体的特异性结合,结构域Ⅲ主要调节毒素的活性。本文根据国外研究,从毒素蛋白质结构的不同组织层次,阐述了这些区域的结构与其功能的关系。  相似文献
6.
苏云金杆菌4.071 8菌株杀虫晶体性质的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
研究了苏云金杆菌4.071 8菌株晶体的分离及其在电镜下的形态结构,并通过SDS-PAGE对其杀虫晶体蛋白进行了分析,证明了4.071 8菌株晶体有立方体型和双金字塔型两种,分别由原毒素CryⅠ及CryⅡ组成,该菌对鳞翅目和双翅目昆虫均有毒杀作用。  相似文献
7.
复合菌株发酵猪血粉的条件研究*   总被引:5,自引:0,他引:5       下载免费PDF全文
利用筛选出的2株高产蛋白酶的米曲霉(Aspergillus oryzae)菌株AS100、AS102作猪血粉发酵的主发酵菌株,配以1株酵母菌(Saocharomyces cereisiae)菌株Y113和1株细菌(Bacilus sp.)菌株Asp007为辅助菌株,研究了这四株菌的产酶性能,同时确定了它们在发酵血粉过程中的一系列参数。通过猪血粉发酵,获得了一种高蛋白发酵饲料,其香味浓郁,蛋白质含量高达69%,且富含游离氨基酸,VitD3、烟酸等维生素及Fe等无机元素,可作为禽畜高蛋白源或饲料添加剂。  相似文献
8.
已经证实苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)伴孢晶体结合20kb DNA,但其序列特异性及作用有待进一步研究阐明.研究了选择性溶解Bt 4.0718菌株Cry1类原毒素所形成的菱形伴孢晶体,从中抽提出与其结合的20kb DNA.经Nde Ⅰ酶切消化后亚克隆构建文库,通过PCR-RFLP及测序筛选出含cry1Ac基因的转化子.然后设计引物PCR扩增出cry1Ac基因的ORF并与pET30a连接,转化E.coli BL21(DE3),高效表达了141kD蛋白.表达蛋白占总蛋白量的50%以上,且90%以上以包涵体形式存在.利用穿梭载体pHT304构建表达质粒pHTX42,电转化Bt无晶体突变株XBU001,获得重组菌株HTX42,经SDS-PAGE分析,cry1Ac基因得到强表达,蛋白质定量分析显示目的蛋白量占总蛋白量的79.28%,且其在细胞中累积达细胞干重的64.13%,比文献报道的25%左右高了1倍以上.原子力显微镜(Atomic Force Microscopy,AFM)检测显示,目的基因在大肠杆菌(E.coli)中表达的包涵体呈不规则形状且较小,而在无晶体突变株中表达的晶体呈典型菱形晶体,大小约为1.2 μm×2.0 μm.生测结果显示,包涵体与晶体对小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫均有高效杀虫活性.本研究为构建高效杀虫工程菌及进一步阐明Bt伴孢晶体中20kb DNA分子的来源、结构和功能奠定了重要的基础.  相似文献
9.
苏云金杆菌4.0718菌株杀虫晶体65kD原毒素的质谱分析   总被引:4,自引:0,他引:4  
以苏云金杆菌4.0718菌株杀虫晶体65kD原毒素为材料,探索了从SDS-PAGE胶上回收蛋白质进行质谱分析的方法。蛋白纯化的步骤包括SDS-PAGE、电洗脱、脱盐、除SDS。电洗脱采用半透膜法,用超滤法脱盐,冷丙酮沉淀法除去SDS。结果表明,纯化的65kD原毒素经ESI-MS检测,分子量约64500Da。经MALDI-MS检测,未能有明显蛋白峰出现,这可能是该蛋白由于较强的疏水作用,溶解性差,在与基质混合时处于聚和悬浮态所致。  相似文献
10.
苏云金芽孢杆菌高效价杀虫剂的研究进展   总被引:4,自引:0,他引:4       下载免费PDF全文
苏云金芽孢杆菌制剂是目前应用广泛而有效的一种微生物杀虫剂.本文从菌种分离筛选、构建遗传工程菌、突变筛选及定向进化等方面介绍了获得苏云芽孢金杆菌高效价杀虫的几种研究策略,并对各种策略的进展及应用前景进行了简要综述.  相似文献
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