绍鸭卵巢卵泡发育相关新EST的分离与表达

采用银染mRNA差异显示方法从绍鸭卵巢等级卵泡中分离并筛选到 3个差异表达序列标签 (ExpressedSequenceTags ,ESTs)SXDF0 2 0 1(2 71bp)、SXDF0 2 0 2 (2 0 0bp)和SXDF0 2 0 3(173bp) ,通过测序和BLAST检索 ,发现SXDF0 2 0 1与GenBank中登录的所有物种的所有序列均无同源性 ,是在绍鸭卵巢卵泡发现的新EST ,现已登录GenBank(GenBank登录号 :CB0 72 6 2 9) ,而SXDF0 2 0 2和SXDF0 2 0 3则分别与GenBank公布的鸡的EST和肌胃肌球蛋白重链高度同源。用 5′ RACE将SXDF0 2 0 1延伸至 5 4 4bp ,经过BLAST再次检索 ,仍然未发现中度同源序列采用相对定量RT PCR方法进一步研究SXDF0 2 0 1和SXDF0 2 0 2在绍鸭组织中的时空特异性表达 ,发现这两个EST在产蛋高峰期绍兴鸭的下丘脑、垂体、肌肉、肝脏、脂肪等组织都有表达 ;SXDF0 2 0 1在 30日龄卵巢的表达水平显著高于 6 0 (P <0 0 5 )和 90 (P =0 0 15 )日龄 ;而SXDF0 2 0 2在卵巢发育的不同阶段的表达水平没有变化 ;SXDF0 2 0 1在卵巢卵泡颗粒层中的表达总体高于膜层 ,SXDF0 2 0 2在颗粒层中的表达F3 >F5>Fw(P <0 0 1) ,而在F1卵泡降至最低 (P <0 0 1) ,膜层中以Fw 卵泡表达水平最高 (P <0 0 1)。     

猪下丘脑和垂体中生长激素受体、胰岛素样生长因子1型受体的发育性变化

GH和IGF-1可作用于垂体或/和下丘脑负反馈性地调节垂体GH的分泌,而这种负反馈作用必须通过下丘脑或垂体的GHR和IGF-1R来实现.为研究猪垂体GH分泌负反馈调节的发育性变化和品种特点,分别在0、3、20、30、90、120和180日龄随机选取纯种雄性二花脸猪和大白猪各4头,屠宰并取下丘脑及垂体,用相对定量RT-PCR分析下丘脑和垂体GHR和IGF-1R mRNA水平.结果表明下丘脑GHR mRNA表达呈明显的时序性变化,在0到120日龄期间呈逐渐上升趋势,180日龄时显著下降(P＜0.05),提示在快速生长期,GH负反馈调控机制逐渐加强.下丘脑GHR mRNA表达还表现明显的品种间差异,在0到180日龄期间大白猪均显著高于二花脸猪(P＜0.05);而垂体GHR mRNA表达相对稳定,品种和年龄间差异不显著,提示GH的负反馈作用位点可能主要在下丘脑.IGF-1R与GHR的表达发育模式不同.下丘脑IGF-IR mRNA的表达相对稳定,无显著的年龄、品种间差异;而在垂体,大白猪和二花脸猪IGF-1R mRNA水平在出生时均较高,随后显著下降(P＜0.05),20日龄后逐渐上升至90日龄的较高水平,随后再次下降.大白猪垂体IGF-1 mRNA表达在30日龄和90日龄时显著高于二花脸猪(P＜0.05),而180日龄时二花脸猪垂体IGF-1R mRNA水平却显著高于大白猪(P＜0.05).结果提示,IGF-1长环负反馈作用位点可能不在下丘脑,而主要在垂体.     

二花脸和大白猪脂肪leptin和下丘脑中Ob-Rb基因表达的发育性变化

为研究猪脂肪组织中leptin和下丘脑中Ob-Rb基因表达发育性变化的性别差异和品种特点, 分别于出生当天, 3, 20, 30, 45, 90, 120和180日龄随机屠宰二花脸公、母猪, 大白猪公猪各4头, 采集血样、背部皮下脂肪组织和下丘脑. 用放射免疫法测定血清leptin浓度, 用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法, 以18S rRNA作内标, 定量分析脂肪组织中leptin和下丘脑Ob-Rb基因表达的发育性变化, 并进行品种和性别间比较. 结果显示: 脂肪组织中leptin mRNA的表达有明显的发育性变化, 随日龄增加而增高, 母猪显著高于公猪, 二花脸猪显著高于大白猪(P<0.01). 二花脸猪和大白猪血清leptin水平的发育性变化模式基本相同, 随日龄增加而增高, 且与脂肪组织中leptin mRNA表达的发育性变化高度正相关(P<0.05或P<0.01), 有性别和品种差异, 总体上母猪显著高于公猪, 二花脸猪显著高于大白猪(P<0.01). 而下丘脑中Ob-Rb mRNA的表达呈现明显不同的发育及品种特点, 在出生后逐渐下降, 然后逐渐回升, 断乳后又逐渐下降, 二花脸猪在120~180日龄又逐渐回升. 大白猪Ob-Rb的基因表达在总体上高于二花脸猪(P<0.01). 结果提示: 二花脸猪和大白猪血清leptin水平和脂肪组织中leptin的基因表达与脂肪沉积相关.     

电刺激杏仁复合体诱发心律失常及其下行神经通路的初步探讨

电刺激杏仁复合体能诱发心律失常。心律失常的类型为心动过缓伴室性或结性期外收缩。刺激杏仁复合体不同亚核均能诱发心律失常,不同类型的心律失常在核内具有相应的代表点。心律失常发作与杏仁局部区域诱发的爆发性后放电有关。推测杏仁复合体内神经元过度激活可能通过杏仁-迷走神经运动背核及杏仁-下丘脑外侧区等通路下行,使心率减慢、房室传导阻滞而导致心律失常。     

胆囊收缩素卵黄抗体在大鼠十二指肠的吸收

为了探讨CCK卵黄抗体能否被动物消化道所吸收 ,我们应用SDS PAGE电泳、ELISA和Westernblot方法 ,检测灌胃CCK卵黄抗体后SD大鼠十二指肠静脉血液中CCK卵黄抗体的免疫活性及存在形式。实验采用1 4只雄性成年SD大鼠 ,随机分成试验组和对照组 ,分别灌胃 1 5 0mg/mlCCK卵黄抗体粉混悬液和生理盐水 (2ml/只 )。安装亚急性十二指肠静脉插管 ,在灌胃后第 2、 3、 4h采集十二指肠静脉血液 ,分离血浆。SDS PAGE结果显示 ,CCK卵黄抗体分子量为 2 0 0kD。ELISA研究表明 ,试验组第 2、 3h的血浆中 ,均检测到CCK卵黄抗体效价 ,效价达 1∶1 2 8以上。同时 ,Westernblot分析发现 ,试验组第 2、 3h血浆中存在完整分子形式的卵黄抗体。研究结果提示 ,CCK卵黄抗体能被SD大鼠十二指肠段吸收或部分吸收进入血液 ,发挥其免疫学活性     

苯二氮卓化合物F89对高邮鸭增重及血清GH和IGF-1水平的影响

89属于苯二氮卓类化合物 (Ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅｓ,ＢＺｓ) ,自七十年代发现这类化合物能够促进动物的食欲 ,并且具有剂量小、效应强、有效剂量范围宽、无副作用等优点以来 ,其促摄食作用一直备受人们的关注。以往的研究证明Ｆ89不仅具有显著的促进食欲作用 ,而且不降低消化率 ,明显提高动物的生长速度 ,但是Ｆ89的作用具有种属差异 ,即使同种属中不同品种或品系的动物也会呈现不同的效应。本研究以生长速度快的高邮鸭为对象来观察Ｆ89对其增重的影响 ,并采用外周注射Ｆ89的方法 ,与生长速度慢的绍兴鸭进行比较 ,观察Ｆ89对鸭作用是…     

二花脸和大白猪的脂肪组织中GH-R、IGF-1和IGF-Ⅰ R基因表达的发育性变化

分别于出生当天、3、20、30、45、90、120、180日龄随机屠宰二花脸公、母猪各4头(30日龄仅有公猪),于20、30、90、120、180日龄随机屠宰大白猪公猪4头,采集背部皮下脂肪组织.用RT-PCR方法,以18S rRNA作内标,定量分析脂肪组织中生长激素受体(GH-R)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-Ⅰ R)基因表达的发育性变化,并进行品种和性别间比较.结果表明:脂肪组织中GH-R mRNA的表达有明显的发育性变化及品种差异,二花脸母猪GH-R mRNA水平出生时较低,45日龄达到高峰,之后维持稳定;二花脸公猪GH-R mRNA水平在出生时较高,至45日龄达到最高值,之后显著下降,但总体上没有性别差异;大白猪公猪GH-R mRNA水平极显著低于二花脸公猪(P＜0.01).脂肪组织中IGF-1 mRNA的表达有明显的发育性变化及性别和品种差异,二花脸母猪显著低于公猪(P＜0.05),大白猪公猪极显著低于二花脸公猪(P＜0.01); 脂肪组织中IGF-Ⅰ R mRNA的表达有明显的发育性变化,但在总体上没有明显的性别和品种差异.结果提示:猪脂肪组织中GH-R、IGF-1和IGF-Ⅰ R的基因表达有特定的发育模式,IGF-1基因表达的品种差异可能正是两品种猪脂肪沉积规律不同的主要原因之一.     

Effect of recombinant growth hormone on expression of growth hormone receptor, insulin-like growth factor mRNA and serum level of leptin in growing pigs

Growth hormone (GH) plays an important role in regulation of animal growth, metabolism and lactation[1]. Numerous studies have shown that exogenous somatotropin (ST) can increase average daily weight gain, improve feed efficiency, stimulate protein deposition and muscle growth and decrease lipid accretion rate[1]. The original somatomedin hypothesis suggested that the effect of GH on postnatal growth was mediated by insulin-like growth hormone factor 1 (IGF-I) which was thought to be deriv…     

Effect of recombinant growth hormone on expression of growth hormone receptor,insulin-like growth factor mRNA and serum level of leptin in growing pigs

Sixteen Large White × Landrace castrated male pigs were allotted into treatment and control group. The treatment group was injected intramuscularly with recombinant porcine growth hormone (rpGH, 4 mg d⁻¹) and the control group with vehicle for 28 days. Animals were slaughtered 4 h after final injection for liver, longissimus dorsi (LD) muscle and blood sampling. Serum concentration of insulin-like growth factor 1 (IGF-I) and leptin were determined by RIA. The total RNA was extracted from tissues to measure the abundance of growth hormone receptor (GHR), IGF-I mRNA by RT-PCR with 18S rRNA internal standard. Results showed that rpGH enhanced the average daily weight gain by 26.1% (P < 0.05), the serum IGF-I concentration by 70.94% (P < 0.01), decreased serum leptin by 34.8% (P < 0.01). The relative abundance of GHR and IGF-I mRNA in liver were increased by 24.45% (P < 0.05) and 45.30% (P < 0.01), respectively, but no difference of GHR (P > 0.05) and IGF-I mRNA (P > 0.05) in LD between GH treated and control group was found. These results suggest that rpGH can up-regulate hepatic GHR and IGF-I gene expression and improve animal growth. However the effect of rpGH on GHR and IGF-I gene expression are tissue-specific.     

猪13号染色体部分微卫星标记与肉质性状关系的研究

从已公布的猪13号染色体连锁图谱中选择与PPAR基因连锁的7个微卫星座位,在苏太猪群体中对这些位点进行群体遗传学特性分析。研究结果表明:各位点等位基因数为6～9个,杂合度为0.59～0.81,多态信息含量为0.51～0.76。方差分析结果显示:微卫星位点S0021对pH值、SW937对系水力影响均达到极显著水平(P<0.01);位点S0293对嫩度、SW482对背膘厚也有显著影响(P<0.05);其他位点S0222、S0281和SWR2054对各性状影响均未达到显著水平(P>0.05)。