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1.
冬瓜的果肉中发现了丰富的蛋白水解酶.用硫酸铵将冬瓜果肉汁分级盐析,得到粗酶液.再经DEAE-Sepharose FF离子交换层析和Superdex-75柱层析等步骤得到一种电泳纯的冬瓜蛋白酶.SDS-PAGE测得其分子量为64 kDa.以酪蛋白做底物时,该酶的最适反应温度为70℃,最适作用pH为6.5,在pH 4.5~10.5,40~70℃范围内较稳定.PMSF强烈抑制该蛋白酶的活性.另外,Hg~(2+)对该酶有强烈的抑制作用,Mn~(2+)离子对其有保护作用,Zn~(2+)、Ca~(2+)和Cu~(2+)等离子对其活性没有影响.  相似文献   
2.
紫苏愈伤组织迷迭香酸的纯化及抗菌活性研究*   总被引:2,自引:0,他引:2  
紫苏叶外植体在添加NAA和 2,4-D的 MS培养基上诱导分化愈伤组织,愈伤组织中迷迭香酸的含量为 0.85%,愈伤组织干燥后经乙醇提取,乙酸乙酯萃取后,经Sephadex LH-20柱层析,最后获得了纯度为95%的迷迭香酸。抑菌实验表明此法获得的迷迭香酸对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及立枯丝合菌的生长均有明显的抑制作用,其最低抑制浓度分别为300、400、及800μg/mL。  相似文献   
3.
UV-B辐射对烟草光合色素和几种酶的影响   总被引:11,自引:0,他引:11  
对UV-B胁迫条件下烟草叶片相关生理生化指标的变化进行研究.结果表明,UV-B辐照后,烟草叶片内光合色素(叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素)的含量均呈上升趋势,3种色素比对照分别上升了21%、10%、27%;可溶性蛋白含量呈先上升后下降趋势;过氧化物酶活性明显上升,同工酶图谱分析证实,有一种新的过氧化物酶同工酶表达;利用重组噬夏孢欧文氏菌(Erwinia uredovora)GGPP合成酶免疫家兔,制备了兔抗GGPP合成酶的抗血清.Western blot检测显示,UV-B辐照可使烟草叶片GGPP合成酶(GGPS)的表达量显著提高.  相似文献   
4.
紫苏愈伤组织迷迭香酸的纯化及抗菌活性研究   总被引:26,自引:0,他引:26  
紫苏叶外植体在添加NAA和2,4-D的MS培养基上诱导分化愈伤组织,愈伤组织中迷迭香酸的含量为85%,愈伤组织干燥后经乙醇提取,乙酸乙酯萃取后,经Sephadex LH-20柱层析,最后获得了纯度为95%的迷迭香酸。抑菌实验表明此法获得的迷迭香酸对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及立枯丝合菌的生长均有明显的抑制作用,其最低抑制浓度分别为300、400及800μg/mL。  相似文献   
5.
迷迭香酸对几种植物病原真菌的抗菌活性*   总被引:11,自引:0,他引:11  
研究了迷迭香酸对不同植物病原真菌菌丝生长和孢子萌发的抑制活性。试验结果表明,迷迭香酸对供试的8种植物病原真菌菌丝生长均有抑制作用,其中对番茄灰霉病菌、芒果灰斑病菌、柑桔青霉和梨黑斑病菌抑制作用较强,EC50分别为615.04μg/mL、698.23μg/mL、714.50μg/mL和809.10μg/mL;对杉木猝倒病菌和苹果树腐烂病菌抑制作用次之,EC50分别为1039.92μg/mL和1044.72μg/mL;对松枯梢病菌和种实霉烂病菌的抑制作用较弱,EC50分别为1256.90μg/mL和1270.87μg/mL。迷迭香酸对供试的6种植物病原真菌孢子萌发也有明显的抑制作用,EC50大致在400~700μg/mL范围,其中对梨黑斑病菌孢子萌发抑制作用最强,EC50为395.37μg/mL。  相似文献   
6.
累积番茄红素的大肠杆菌工程菌及其培养条件的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
噬夏孢欧文氏菌番茄红素合成相关基因crtE, crtB, crtI同时克隆进表达载体pET-15b构建pET-15bcrtIEB,将该重组质粒转化E.coliBL21(DE3)构建工程菌,IPTG诱导工程菌累积红色色素,经HPLC和吸收光谱分析,工程菌中合成的色素为番茄红素。研究了碳源、金属离子、培养温度、诱导剂浓度、诱导时间等参数对工程菌生长及色素累积的影响,确定了合适的培养条件:培养基为改良LB培养基(蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、麦芽糖5g/L、MgCl2 0.1g/L,NaCl 10g/L);起始培养温度为37℃;培养至OD600为0.6左右时加入IPTG,终浓度为0.5mmol/L,诱导温度降至30℃;诱导时间为14h。发酵完成后工程菌的生物量(干重)为3.45g/L,番茄红素的最高含量可达5.8mg/gDW。  相似文献   
7.
利用PCR技术从Streptococucspyogenes的基因组DNA中扩增了链激酶的编码基因ska,并进行了序列分析 ,利用基因删除及定点位变技术获得了删除了C-末端 42个氨基酸残基编码区的突变链激酶基因skaΔC42 ,第 5 9位Lys残基突变为Glu的突变链激酶基因skaK5 9E以及删除C-末端 42个氨基酸且第 5 9位Lys残基突变为Glu的突变链激酶基因skaΔC42K5 9E ,将ska及其三种突变体分别克隆到表达载体pET 1 5b上 ,构建分别表达野生型链激酶 (SK)、C-末端缺失 42个氨基酸残基的突变体 (SKΔC42 )、第 5 9位Lys残基突变为Glu的突变体 (SKK5 9E)及C-末端缺失 42个氨基酸且第 5 9位Lys残基突变为Glu突变体 (SKΔC42K5 9E)的表达载体pSK ,pSKΔC42 ,pSK K5 9E ,pSKΔC42K5 9E ,分别转化E .coliBL2 1 (DE3) ,IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了高效表达 ,经亲和层析、离子交换层析及分子筛层析 ,获得了rSK、rSKΔC42、rSKK5 9E及rSKΔC42K5 9E ,活性分析表明rSK与其三种突变体具有相同的比活性。  相似文献   
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