真菌次级代谢产物rasfonin促进舒尼替尼(Sunitinib)诱导的肾癌细胞自噬和凋亡

【目的】明确真菌次级代谢产物rasfonin影响舒尼替尼(Sunitinib,ST)诱导的肾癌细胞自噬和凋亡作用机理。【方法】应用MTS(Methanethiosulfonate assay)和克隆形成实验检测rasfonin和舒尼替尼对肾癌细胞ACHN活性和增殖的影响,通过透射电子显微镜、荧光显微镜、蛋白免疫印迹、免疫荧光方法检测rasfonin和舒尼替尼处理的ACHN细胞自噬、凋亡情况和相关信号通路的变化。【结果】Rasfonin和舒尼替尼能够抑制肾癌细胞ACHN活性和细胞增殖;免疫印迹结果表明,两者均可以引起caspase依赖的凋亡。在rasfonin存在的情况下,不仅舒尼替尼所引起的凋亡和细胞活性丢失明显增加,而且其诱导的自噬流显著提高。无论是rasfonin还是舒尼替尼均明显地抑制哺乳雷帕霉素靶蛋白m TOR(Mammal target of rapamycin)磷酸化,而两者均能促进细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinases,ERK)活性增加。【结论】rasfonin促进了舒尼替尼诱导的细胞自噬和凋亡,提高了舒尼替尼抑制肾癌细胞增殖的活性。     

细胞自噬及真菌中自噬研究概述

细胞自噬是真核生物中广泛存在的、主要依赖于溶酶体或液泡的保守的降解途径,通过降解细胞内过多或异常的蛋白、细胞器等以维持正常的细胞功能。近10年来自噬研究方面的飞速进展显示出自噬与癌症、神经退行性疾病、衰老及心脏病等人类疾病相关。与此同时,自噬在丝状真菌的生长、形态和发育等方面发挥着重要作用,特别是在丝状真菌的细胞分化过程中,自噬起到了关键性作用,如致病性生长、程序性细胞死亡及孢子形成。本文主要论述了什么是自噬,自噬的检测方法及以真菌为对象的自噬研究进展。