中华猕猴桃蛋白酶的进一步研究

本文以野生中华猕猴桃的果实为材料,通过分离提纯,获得电泳均一的蛋白酶制剂(方法同前文)。选用Sephadex G-100型凝胶,层析柱用2×54厘米,以胰凝乳蛋白酶、牛血清清蛋白、鸡卵清蛋白和细胞色素C为标准蛋白作图,测得该酶的分子量是23,500-24,000道尔顿。用凝胶等电聚焦电泳法,测定该酶的等电点PI为3.02。应用Dansyl-Cl法,确定该酶的N-末端为脯氨酸。因此,不经亲和层析(以活性巯基琼脂糖为亲和层析载体)得到了末端纯的蛋白酶。根据Ellman法,测得该酶有一个快速反应的巯基。