模拟微重力导致人脐静脉内皮细胞微管骨架重构及增殖的影响

目的：观察模拟微重力（MMG）致人脐静脉内皮细胞（HUVECs）微管骨架结构的改变,并对MMG作用后细胞的增殖等功能进行评价。方法：酶消化法原代培养HUVECs,随机分为2D．clinostat干预的MMG培养组与NG对照培养组,均培养48h;倒置显微镜下观察细胞形态,细胞计数及流式细胞术分析细胞增殖、凋亡及细胞周期变化。结果：所培养的HUVECs细胞并经流式细胞术鉴定证实;MMG干预48h使大量的微管蛋白发生解聚,微管的网状结构已经模糊不见,随之代替的是崩解的微管小聚体;MMG可使HUvECs增殖明显抑制,细胞周期抑制于G2／M期（G2／M：MMG,27．6％;NG,18．1％;P〈0．05）,然而细胞并没有发生明显凋亡。结论：MMG可显著影响HUVECs的形态与细胞骨架结构并抑制其增殖功能,HUVECs的增殖抑制可能与紊乱的微管结构密切相关。     

模拟微重力对人脐静脉内皮细胞的黏着斑形成及整合素表达的研究

目的：空间失重条件下机体会出现心血管功能失调,血管内皮细胞的改变情况可能是导致此种异常的直接原因,本研究对模拟微重力（MMG）干预下人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的黏着斑（FAs）多种参数进行半定量观测,并对FAs主要受体整合素（integrins）的表达进行评价,以期探索心血管功能失调的内在机制。方法：激光共聚焦结合高通量激光半定量计算方法,对FAs的各项参数进行评价,其参数包括FAs平均数量（VN）;FAs平均面积（VA）;FAs平均交叠面积（OSP）;FAs平均到细胞边缘距离（DS）。Western blot以及RT-PCR检测integrinβ1和B4的表达。结果：FAs在MMG干预下,形成的数量（V-N）与面积（VA）明显减少,VN较NG对照组减少-50．6％（P〈0．05）,VA较NG对照组减少-60．2％（P〈0．05）,FAs定位指标DS也不同于NG对照组。28．3％（P〈0．05）;MMG可导致integriN31和B4在mRNA与蛋白水平表达下调。结论：MMG可能通过影响HUVECs的FAs的生成与定位,以及下调integrins表达水平抑制内皮细胞增殖与迁移的;而FAs与integrins正是细胞进行胞内外增殖、迁移等信号交流的窗口,这也是导致产生心血管功能失调的直接原因之一。