副溶血弧菌EMA-PCR检测技术的建立

PCR技术被广泛应用于副溶血弧菌的检测中, 但传统的PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌, 往往使检测结果出现较高的假阳性。因此, 将叠氮溴乙锭(Ethidium monoazide bromide, EMA)与PCR技术结合, 建立一种快速、准确的副溶血弧菌检测方法。以dnaJ基因为检测副溶血弧菌的靶基因, 分别用副溶血弧菌的纯培养细胞及其基因组DNA作模板进行PCR检测, 灵敏度分别为2.5×104 CFU/mL和6×102 fg/μL。在检测样品前处理过程中加入EMA, 当EMA的浓度小于5 mg/L时, EMA对活菌靶基因的扩增没有明显的抑制; 而终浓度为2 mg/L的EMA, 能有效抑制1×108 CFU/mL副溶血弧菌死菌的扩增。活菌和死菌混合体系的PCR结果表明, EMA-PCR能有效降低副溶血弧菌检测过程中的假阳性。     

韩江汕头市区河段水质的微生物学监测

韩江(Hanjiang River)发源于赣、闽、粤三省交界山地,下游分多条支流放射状地流入韩江三角洲平原,于汕头、澄海的多个入海口汇入南海。其中流经汕头市辖区长约14km的一条支流称为梅溪。韩江干流全长470km,流域面积30112km2,是广东省第二大河流,是潮汕地区的主要水源1。近年来,随着韩江流域特别是下游经济的发展和人口的增加,排入韩江的工业废水、生活污水不断增加,韩江水污染的问题日益突出并进一步影响到汕头海域的水质。为保护韩江,科学、合理地利用有限的水资源,1998年4月至1999年8月,作者对韩江下游汕头市区河段(梅溪)的水质进行了微生物学监测, 以查明该河段水体中的微生物区系及其变化情况, 为综合整治韩江的水污染及合理利用韩江的水资源提供科学的依据。