一种3-氰基吡啶水解酶产生菌的高通量筛选策略及应用

利用改进的羟肟酸铁分光光度比色法建立了一种简单、快速、高通量的腈水解酶筛选方法.应用该方法从土壤中筛选获得1株具有3-氰基吡啶水解酶活性的菌株CCZU10 -1,经16S rDNA序列分析,鉴定该菌为红球菌属Rhodococcus sp.;同时确定了最适反应温度、pH和金属离子添加剂分别为30℃、7.0和Ca2+ (0.1 mmol/L).在最适催化反应条件下,催化转化50 mmol/L烟腈36 h,烟酸的产率可达到93.5％.     

巴马香猪诱导多能干细胞系的建立

猪在农业和生物医学领域应用非常广泛,尤其是基因修饰的小型猪在器官移植和建立人类疾病模型中有重要的意义。然而,真正的猪胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES cells)尚未建立,这极大地限制了转基因猪的产生。目前,诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS cells)技术是产生多功能干细胞的有效策略。虽然猪iPS cells建系已有数篇报道,但许多有价值的小型猪的iPS cells仍有待建系。利用可诱导基因表达慢病毒系统(Tet-on系统)在小型猪贵州巴马香猪骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)内过表达外源基因Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4,获得两株巴马香猪iPS细胞系(biPS4-1,biPS4-2)。获得的巴马香猪iPS cells与人ES cells(hES cells)形态相似;呈碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)阳性;表达干细胞特异的标志物SSEA4、Tra-1-81、Nanog、Rex1和CDH1等,但不表达SSEA1;核型检测正常。进一步的研究显示,它在体外和体内均能分化为外、中、内三胚层,具有多向分化的潜力。可诱导的巴马香猪iPS细胞的建立将为建立转基因猪提供便捷的工具,而基于该细胞系建立的转基因猪也有望服务于医学基础研究和器官移植等临床研究。     

基因修饰猪作为异种器官移植供体的研究进展

器官移植是治疗脏器器官终末病变的根本方法,目前器官移植的最大障碍是供体器官的缺乏。异种器官移植为解决上述难题打开了一扇门。猪与人类在解剖学和生理学等方面非常相似,是理想的器官移植的供体。基因修饰猪在异种器官移植中有着重要的应用,该文就猪–人异种器官移植发生免疫排斥的机制及其对策、器官移植后的生理功能以及潜在的病毒感染风险等方面的研究进行了综述和讨论,为异种器官移植提供理论基础。     

γ干扰素释放试验在儿童肺结核诊断中的价值

为研究2种γ干扰素释放试验(IGRA)试剂盒在结核病高发、卡介苗(BCG)高接种地区用于诊断儿童肺结核的价值,共入组临床怀疑肺结核患儿114例,其中45例行QuantiFERON-Gold In-Tube(QFT-GIT)检测,69例行T-SPOT.TB检测,收集临床资料,比较2种方法的灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)。结果显示,QFT-GIT在儿童肺结核诊断中的灵敏度为84.6%、特异度为81.3%、PPV为91.7%、NPV为76.5%。T-SPOT.TB的灵敏度为72.3%、特异度为93.7%、PPV为97.1%、NPV为53.6%。与未治疗患儿相比,激素治疗患儿QFT-GIT和T-SPOT.TB的阳性率显著下降。研究提示,QFT-GIT和TSPOT.TB较少受潜伏性结核感染的影响,用于中国儿童肺结核的诊断具有较高的PPV。     

全血γ干扰素释放试验在儿童和成人中的结核病诊断价值

为研究全血γ干扰素释放试验试剂盒QuantiFERON-TB Gold In-Tube(QFT-GIT)在中国(属结核病高发、卡介苗高接种地区)成人和儿童中的结核病诊断价值,入组临床怀疑结核病的儿童和成人患者各60例,进行QFT-GIT检测,并收集临床资料进行诊断分类。结果显示,在儿童中QFT-GIT诊断灵敏度为83.87%、特异度为92.00%、阳性预测值(PPV)为92.86%、阴性预测值(NPV)为82.14%;在成人中诊断灵敏度为78.57%、特异度为84.62%、PPV为84.62%、NPV为78.57%。结果证实QFT-GIT具有良好的结核病诊断价值,尤其在儿童中的诊断价值高于成人。     

美罗培南不同输注方案治疗老年ICU获得性重症肺炎的临床研究

目的:探讨美罗培南不同输注方案治疗老年ICU获得性重症肺炎的临床效果。方法:选取2011年6月至2014年1月我院的92例老年ICU获得性重症肺炎患者,随机分为传统组和改良组,每组各46例,分别采用不同的输注速度给予美罗培南治疗,并且对其总有效率、细菌学疗效进行评定,观察记录患者的不良反应情况、住院时间及抗菌药物的治疗费用。结果:改良组患者的总有效率为82.61%,显著高于传统组的67.39%(P0.05);改良组患者的细菌学疗效明显优于传统组(P0.05);改良组患者的治疗时间为(5.94±1.21)d,明显低于传统组的(7.52±1.47)d(P0.05);改良组患者的治疗费用为(3412.7±992.4)元,相比于传统组的(3983.5±1022.6)元明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。两组患者分别有3例出现不良反应,其中,4例出现腹泻,2例出现恶心,但患者均能够耐受,停药后腹泻、恶心症状消失,差异无统计学意义(P0.05)。结论:美罗培南治疗ICU获得性重症肺炎在提高临床治疗效果、减轻患者的炎症反应、缩短治疗时间,在一定程度上能够降低患者的经济负担方面具有显著的优越性。