大豆多肽Lunasin对类风湿关节炎大鼠T细胞免疫指标的影响

目的：探讨Lunasin对实验性类风湿关节炎（RA）大鼠免疫功能的影响。方法： Wistar雄性大鼠50只,按体重随机分为（n=10）：对照组、模型组和3个Lunasin处理组（0.1,0.2,0.4 mg/kg灌胃）。利用弗氏完全佐剂（FCA）局部注入大鼠足跖皮内,建立RA模型,治疗组Lunasin灌胃每天1次,对照组和模型组灌胃等量生理盐水;于实验第21天,检测足跖厚度、滑膜液T淋巴细胞活化情况和滑液中白介素-12（IL-12）、肿瘤坏死因子β（TNF-β）和I L-4、IL-10的分泌情况。结果：Lunasin可降低T淋巴细胞活化标志物CD69⁺和CD25⁺的表达,减少滑膜液中IL-12、TNF-β的分泌,增加IL-4、IL-10的分泌。结论：Lunasin能够抑制类风湿关节炎滑膜液中T细胞的活化并能反转Th1/Th2型细胞因子的分泌,调节类风湿关节炎免疫微环境。     

不同食物饲养幼鼠对肝组织化学影响的观察

实验采用刚断乳的幼鼠２０ 只, 分为两组喂养, 每组１０ 只, 对照组和普通饲料喂养（简称Ａ 组）,另一组用奶粉喂养（简称Ｂ组）。分别喂养２０天后, 对其肝组织化学进行了分组定性对比观察。结果显示：Ａ 组肝细胞糖原ＰＡＳ反应, ＳＤＨ、ＣｈＥ活性高于Ｂ组, 分别为强阳性（）, 而Ｂ组ＬＤＨ, ＡＫＰ活性比Ａ组强, 分别为强阳性及最强阳性 （, ）。     

用pLNCX2携带人MCPH1基因shRNA重组逆转录病毒载体的构建及鉴定

目的建立逆转录病毒介导的MCPH1基因RNA干扰表达体系并观察其在宫颈癌Caski细胞中对MCPH1表达的影响。方法将人MCPH1基因RNA干扰双链DNA片段重组到逆转录病毒质粒pLNCX2中,构建携带人MCPHI基因RNA干扰的逆转录病毒载体pLNCX2-shRNA—MCPH1,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染宫颈癌细胞株Caski细胞,并用G418筛选产生稳定的细胞克隆,用RT—PCR和Western印迹检测细胞中MCPH1mRNA和蛋白表达的变化。结果重组逆转录病毒质粒经测序鉴定正确,逆转录病毒感染Caski细胞后用G418筛选出稳定的细胞克隆,RT—PCR和Western印迹检测人MCPH1mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组。结论携带人MCPHI基因RNA干扰双链DNA片段的逆转录病毒感染Caski细胞后能明显抑制MCPHImRNA和蛋白表达,为进一步研究MCPH1在宫颈癌中的作用奠定了基础。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂在肝纤维化中的表达变化

目的 观察肝纤维化形成过程中基质金属蛋白酶MMP-1及其抑制剂TIMP-1的表达变化,从细胞外基质降解代谢的角度研究四氯化碳(CCl4)中毒性肝纤维化发生的机制.方法 雄性Wistar大鼠20只,分为正常组和肝纤维化模型组.肝纤维化组采用CCl4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型,造模时间为8周.实验结束后测定肝脏指数、血清透明质酸(HA)、谷丙转氨酶(ALT)及尿羟脯氨酸(HYP)排出量,光镜下观察肝组织纤维化程度,并用免疫组化SABC法检测肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及MMP-1、TIMP-1的表达,同时用荧光实时定量PCR(RT-PCR)的方法检测肝组织中MMP-1、TIMP-1 mRNA的表达.结果 与正常对照组比较,肝纤维化模型组大鼠肝脏指数、血清HA及ALT显著增高,尿羟脯氨酸的排出量明显增加,病理组织学检查发现肝组织内纤维结缔组织增生明显,有假小叶形成;免疫组化的结果显示肝组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、MMP-1及TIMP-1的表达较正常组显著增加.结论 肝组织中MMP-1及TIMP-1的表达变化可能是导致肝纤维化的重要机制之一.     

筒鞘蛇菰提取物蛇菰多糖对D-半乳糖诱导大鼠肝损伤的保护作用及其机制

目的: 探讨筒鞘蛇菰提取物蛇菰多糖(BIH)对D-半乳糖(D-gal)致大鼠肝损伤的保护作用及机制。方法: 雄性SD大鼠60只,随机分为正常组(Con)、模型组(D-gal)、 蛇菰多糖低剂量组(D-gal+50 mg/kg BIH,BIH-L)、 蛇菰多糖中剂量组(D-gal+100 mg/kg BIH,BIH-M)、蛇菰多糖高剂量组(D-gal+200 mg/kg BIH,BIH-H),每组12只。除正常组外,其余各组大鼠每天颈背部皮下注射 100 mg/kg 的 D-gal,正常组大鼠每天颈背部皮下注射相同剂量生理盐水;蛇菰多糖各剂量组每天用相应浓度灌胃,正常组和模型组给予等剂量的生理盐水灌胃,共42 d。自动生化分析仪检测血清ALT、AST、DBIL;HE染色检测肝组织的形态学变化;免疫组织化学检测肝细胞凋亡情况,WB检测Caspase-3、Bax、Bcl-2的蛋白表达;用硫代巴比妥酸法测定 MDA 含量,用黄嘌呤氧化酶法测定 SOD 活性。结果: 与正常组比,模型组大鼠血清 ALT 和 AST、DBIL水平显著升高(P＜0.01);蛇菰多糖处理组ALT、 AST、DBIL水平显著低于模型组(P＜0.01);模型组肝细胞凋亡比正常明显增多(P＜0.01),BIH组肝细胞凋亡比模型组明显减少(P＜0.05);模型组Caspase-3、Bax蛋白表达水平和MDA含量比正常组明显升高(P＜0.01),BIH组比模型组明显降低;而BIH组的Bcl-2表达,SOD 活性比模型组明显升高(P＜0.05或 P＜0.01),BIH不同剂量组之间比较,以中剂量效果最好 。结论: 蛇菰多糖对肝损伤有保护作用,且其作用机制可能与其降低肝细胞凋亡,抑制肝组织氧化应激发生有关。     

二氢杨梅素对人胃癌MKN45细胞迁移和侵袭的影响及其机制*

目的:探讨二氢杨梅素(DHM )对人胃癌MKN45细胞迁移和侵袭的作用及其分子机制。方法:培养人低分化胃癌MKN45细胞,用不同浓度的DHM(0,10,20,30,40,50 μmol/L)分别处理细胞24及48 h,每组实验重复3次,采用CCK8实验检测癌细胞增殖活力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell小室检测细胞侵袭能力;免疫印迹分析细胞迁移和侵袭相关蛋白表达情况。结果:不同浓度DHM干预可降低MKN45细胞活力。20,30及40 μmol/L的DHM处理48 h可明显抑制细胞的迁移能力(P＜0.01)和侵袭能力(P＜0.05及0.01)。20及30 μmol/L的DHM处理48 h可增加E-cadherin蛋白表达(P＜0.01)、降低Vimentin表达(P＜0.01),从而逆转EMT过程;10,20及30 μmol/L的DHM处理48 h可明显降低pJNK的活性表达水平(P＜0.05及0.01),及MMP-2蛋白表达(P＜ 0.01);JNK通路特异性抑制剂SP600125预处理可明显促进DHM对癌细胞侵袭能力的抑制作用(P＜0.01)及降低MMP-2表达(P＜0.01)。结论:DHM具有抑制人胃癌MKN45细胞的迁移及侵袭的作用,其机制可能与通过JNK通路下调MMP-2蛋白表达水平、逆转上皮间质转化有关。     

头顶一颗珠提取液对实验性糖尿病大鼠心肌损伤的干预作用

目的：探讨头顶一颗珠提取液（TTM）对糖尿病大鼠心肌损伤的干预作用及机制,为进一步研究头顶一颗珠的药理作用提供理论基础。方法：雄性SPF级SD大鼠48只,随机分为4组（n=12）正常对照组、模型组、干预组、及阳性对照组,采用高脂饮食加一次性尾静脉注射STZ 35 mg/kg复制糖尿病模型。干预组在实验开始时给予TTM浓度1 mg/ml头顶一颗珠提取液3 ml灌胃,每天1次;造模成功后阳性对照组用二甲双胍5mg/kg.d灌胃治疗,各组继续喂养6周,处死大鼠,取血测B型脑钠肽（BNP）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）水平,心脏称重计算心脏重量指数（心重/体重）,TUNEL法计算心肌细胞凋亡指数,取心室肌组织行常规形态学及Masson染色观察,检测心肌组织SOD, GPx,MDA水平。结果：TTM干预可明显降低糖尿病大鼠心脏重量,降低血清中BNP、cTnI水平,提高心肌组织中SOD, GPx活性,降低MDA含量,抑制心肌细胞凋亡,而且在增强GPx活性、抑制胶原纤维产生方面,TTM作用比西药二甲双胍效果更好。结论：头顶一颗珠提取物可能通过减轻糖尿病大鼠体内氧化应激反应,进而抑制心肌细胞凋亡,减少胶原纤维产生,来达到保护心肌细胞损伤的作用。