高胱氨酸尿对大鼠肾脏自噬水平的抑制作用

摘要 目的：探讨胱氨酸尿症中高胱氨酸浓度对大鼠肾脏自噬水平的影响。方法：通过液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）测定Slc7a9基因敲除大鼠24小时尿液胱氨酸浓度确定高尿胱氨酸;通过IHC（免疫组织化学）染色筛选无结石产生的胱氨酸尿症大鼠、观察肾脏组织结构有无明显变化;通过Western blot测定肾脏组织中的LC3-I、LC3-II、p62和mTOR的蛋白相对表达量,以检测自噬水平的变化,并探索变化原因;通过组织切片Masson染色法检测肾脏髓质纤维化程度。结果：10只无结石胱氨酸尿症大鼠尿液胱氨酸显著高于对照组;未发现有胱氨酸结石的生成与肾脏结构性变化;Masson染色提示胱氨酸尿症大鼠发现轻度肾脏纤维化过程;肾脏组织自噬标记蛋白LC3-I、LC3-II蛋白相对表达量、LC3-II/LC3-I比值以及自噬当量p62相对表达较对照组均显著降低,mTOR相对表达量显著升高。以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：在胱氨酸尿症大鼠模型上,发现无结石形成情况下的尿高胱氨酸水平可通过mTOR途径抑制大鼠肾脏组织的自噬水平,自我保护作用减弱,由此参与胱氨酸尿症的肾脏损伤过程。     

《中国药典》中标准菌种质控新方法的研究

目的 研究《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)纳入的标准菌种质控新方法,并评价不同批号标准菌种的质量稳定性。方法 对脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行比较研究,同时整合16SrRNA基因序列分析、多位点序列分型和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等质控新方法,进行标准菌种质控新方法的建立,并对标准菌种的质量进行评价。结果 形成了适用于《中国药典》中标准菌种的方法,并通过整合的质控新方法对不同批号的标准菌种进行评价,结果显示,菌种质量稳定,遗传信息无改变。同时,建立了标准菌种16SrRNA基因标准序列、PFGE标准指纹图谱和标准基因型。结论 标准菌种质控新方法的研究,为更加全面、深入地评价标准菌种的质量提供了依据;建立的标准菌种质量控制体系及标准菌种质控鉴定信息,为标准菌种持续的质量控制奠定了重要的参比信息基础。     

在笼型蛋白和脂筏介导的两种内吞途径中nephrin的磷酸化修饰动力学不同

研究肾小球裂隙膜的主要成分nephrin分子在细胞内的转运途径及不同转运途径对nephrin磷酸化的影响.分别应用笼型蛋白介导的内吞(clathrin-mediated endocytosis,CME)和脂筏介导的内吞(raft-mediated endocytosis,RME)标记物转铁蛋白和霍乱毒素B亚基对nephrin的内吞过程进行分析,并进一步应用两种内吞途径阻断物EPS15Δ和Dyn2aK44A,研究阻断nephrin的内吞途径对其磷酸化水平的影响.结果显示,nephrin通过笼型蛋白和脂筏介导的两种内吞途径以不同速率进行内吞;与Src酪氨酸激酶家族成员Fyn共表达时,细胞内nephrin酪氨酸磷酸化被增强,而在Src家族激酶抑制剂PP2的作用下,nephrin酪氨酸磷酸化被减弱,表明nephrin的磷酸化过程是Fyn依赖的;内吞20min时,笼型蛋白介导的内吞途径的特异性阻断物EPS15Δ降低了nephrin磷酸化水平、笼型蛋白和脂筏介导的内吞途径的通用抑制剂Dyn2aK44A则增加了nephrin的磷酸化水平,综上结果表明:单独阻断脂筏介导的内吞可引起nephrin的磷酸化水平增加,脂筏介导的内吞对nephrin磷酸化过程起下调作用.     

一株支气管炎鲍特杆菌国家标准菌种的再鉴定

通过生化试验、质谱鉴定、16S rRNA基因序列分析、全基因组序列测定及生物信息学分析等方法对国家标准菌种CMCC(B)40001进行再鉴定。对菌株的毒力、耐药和MLST进行分析，并对鲍特杆菌（Bordetella spp.）的群体进化进行分析。结合不同方法，CMCC(B)40001再鉴定为支气管炎鲍特杆菌（Bordetella bronchiseptica），且其作为标准菌种能够发挥国家标准描述的质控作用。同时获取该菌株的新ST型，在进化关系上，其与百日咳鲍特杆菌(Bordetella pertussis)和副百日咳鲍特杆菌(Bordetella parapertussis)遗传距离近。本研究再鉴定了国家标准菌种CMCC(B)40001为支气管炎鲍特杆菌，并分析了其遗传特征，为国家标准菌种的应用提供资源描述支持。     

肠球菌血流感染研究进展

摘要：近年来,随着肠球菌感染发生率的增加,有关肠球菌血流感染、尿路感染和腹腔感染的研究也逐渐增多,其中肠球菌血流感染病死率显著增加,预后不佳。临床上肠球菌感染以屎肠球菌和粪肠球菌为主。年龄、性别、致病菌种类及耐药情况、治疗方案的选择等均与肠球菌血流感染的发生和预后密切相关。此外,耐万古霉素肠球菌血流感染的治疗用药——达托霉素和利奈唑胺血药浓度及剂量的选择也被广泛关注。遵守临床操作规程,合理选择抗生素的种类及剂量浓度,严格监测药物使用情况,可减少血流感染的发生率,改善预后。现对肠球菌血流感染的发生及预后危险因素、治疗药物的选择进行综述,以期为肠球菌血流感染患者的临床治疗提供指导。     

P.chrysosporium分批发酵木素过氧化物酶动力学模型

目的:为研究黄孢原毛平革菌(P.chrysosporium AS5.776)液态分批发酵产木素过氧化物酶(LiP)发酵动力学规律,实现其发酵过程的优化,达到进一步提高酶产量.方法:对P.chrysosporium AS5.776进行5L液态分批发酵,根据发酵过程中菌体生长、基质消耗及LiP形成规律,基于Logistic方程和Luedeking-Piret方程建立了P.chrysosporium AS5.776液态分批发酵的过程动力学模型,并对模型进行了参数拟合、方差分析及验证比较.结果:模型模拟计算结果与实验值能较好地吻合,R2分别为0.9891、0.995 6和0.9925,模型显著性极高.验证实验显示所构建模型平均相对误差分别为2.9％、3.6％和12.5％.结论:该模型能较好揭示木素过氧化物酶发酵代谢过程的特征,可为工业化应用提供理论依据.     

血清β-葡萄糖醛酸酶测定在早期肝癌诊断的意义

研究血清 β-葡萄糖醛酸酶 (β- G)活性测定对早期肝癌的临床意义。用 EL ISA技术 ,测定早期肝癌患者血清 β- G活性 ,并对早期肝癌患者治疗前、后血清 β- G活性变化进行检测。结果表明早期肝癌患者血清 β- G活性明显高于对照组 ,(P<0 .0 1)。早期肝癌患者经手术切除或介入治疗后 ,血清 β- G活性明显降低 ,(P<0 .0 5 )。结果显示血清 β- G检测对早期肝癌的诊断、治疗的判断均有一定的意义。     

不同品牌胎牛血清用于肺炎链球菌调理吞噬作用的比较

目的 比较不同品牌的胎牛血清用于HL-60细胞分化,以及配制成调理缓冲液后对肺炎链球菌调理吞噬杀菌力的影响。方法 采用5个不同品牌(品牌1~5)的胎牛血清用于HL-60细胞分化培养液和调理缓冲液的配制,计算分化后细胞活力,并进行肺炎链球菌调理吞噬杀菌试验,比较对照孔菌数和质控血清的调理指数。结果 与品牌1胎牛血清分化细胞的活力相比较,品牌5分化的细胞活力差异具有统计学意义(P=0.023,P<0.05),而品牌2、3、4分化细胞的活力差异均不具有统计学意义(P=0.129、0.186、0.440,P>0.05);使用品牌5分化的细胞,对3、6A、7F、9V、14、18C、19A、19F血清群/型调理指数因为调理吞噬后菌落数过少,无法计算。使用品牌5配制的调理缓冲液,对3、9V、19F血清群/型调理指数因为调理吞噬后菌落数过少,无法计算。结论 为保障肺炎链球菌调理吞噬试验的稳定性,建议对试验过程中使用的胎牛血清进行筛选。     

不同层级医疗机构消毒隔离制度执行情况调查结果分析

目的:探讨不同层级的医疗机构消毒隔离对策。方法:通过调查不同层级医疗机构消毒隔离制度执行现状,并对结果进行分析。结果:不同层级的医疗机构消毒隔离制度执行情况存在差异,消毒隔离执行工作不容乐观。结论:严格执行《医院感染管理办法》和《消毒管理办法》及《消毒技术规范》,强化医疗机构消毒隔离工作监管,保障患者就医安全。     

鲍曼不动杆菌血流感染的研究进展

近年来随着抗生素的广泛应用、免疫抑制剂的使用以及侵入性操作的增加,多重耐药、泛耐药甚至全耐药鲍曼不动杆菌日益增多,鲍曼不动杆菌引起的血流感染也呈不断上升趋势,给临床抗感染治疗带来极大的困难,导致临床预后差、病死率高,大大延长了患者的住院时间,造成医疗资源的浪费。了解鲍曼不动杆菌血流感染的危险因素、研究其耐药机制、尽早采取有效的干预措施、合理的应用抗生素、研究新型的治疗策略对预防和治疗鲍曼不动杆菌血流感染至关重要。本文就鲍曼不动杆菌血流感染的危险因素、耐药性、治疗、预后及预防进行综述,为临床预防和治疗提供一定的参考依据。