表达O型口蹄疫病毒保护性抗原表位重组PRRSV的构建及其鉴定

以高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗的感染性分子克隆(rHuN4-F112)作为载体,将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因的421~480nt(141~160aa)和598~639nt(200~213aa)两优势保护性抗原表位串联成的目的基因,通过突变PCR的方法插入Nsp2中的508~532位缺失区域,经体外转录后转染至BHK-21细胞中培养36 h,将上清接种至MARC-145细胞中培养,并在MARC-145细胞中连续传代,拯救重组病毒。经RT-PCR扩增,MluⅠ酶切及测序验证,结果表明插入的外源基因及人为突变的MluⅠ分子标记都正确,说明重组病毒拯救成功,且该重组病毒能够在MARC-145细胞中稳定传代,将此重组病毒命名为rPRRSV-F112-O/VP1ep。rPRRSV-F112-O/VP1ep能够在MARC-145细胞上引起明显的细胞病变,间接免疫荧光检测表明外源基因在该病毒中成功获得了表达。经过生物学特性分析,该病毒的TCID50=-log10-6.75/0.1 mL,且在MARC-145细胞中整体生长速度与其亲本病毒rHuN4-F112(△508-532)相似,但明显高于rHuN4-F112病毒。     

P57,P53,bcl-2,ki-67联合应用在葡萄胎诊断中的意义

目的:研究p57,P53,bcl-2,ki-67蛋白表达在完全性葡萄胎(CM)、部分性葡萄胎(PM)及水肿流产胎(HA)的诊断及鉴别诊断意义.方法:对21例完全性葡萄胎,28例部分性葡萄胎,18例水肿流产胎的标本进行4种抗体免疫组化分析,同时选取10例正常胎盘组织作为对照.结果:在CM中,p57表达不明显,而P53,bcl-2,Ki-67表达增强;在PM,HA及对照组中p57呈现高表达,P53,bcl-2,Ki-67则表达较弱.这四种抗体的表达在完全性葡萄胎与部分性葡萄胎、水肿流产胎及对照组之间的差异具有显著性(P＜0.01),而部分性葡萄胎与水肿流产胎、水肿流产胎与对照组之间差异不显著(P＞0.05).结论:p57和Ki-67表达对CM,PM和HA的鉴别诊断有重要作用,而P53,bcl-2表达对判断预后及预测恶变风险有意义.     

胆囊结石患者超声诊断结果漏诊及误诊分析

目的:探讨我院胆囊结石患者超声诊断漏诊、误诊的超声诊断结果,并分析出现漏诊、误诊的原因。方法:选取我院肝胆外科经彩色多普勒超声诊断确诊并实施手术治疗的胆囊结石患者260例,结合临床资料分析患者彩色多普勒超声图的特点,并在术后一周进行随访,对彩色多普勒超声诊断的漏诊率及误诊率并分析原因。结果:1、胆囊结石分型:典型胆囊结石167例(64.3%)、充满型胆囊结石50例(19.2%)、多发性胆囊结石28例(10.8%)、泥沙样胆囊结石10例(3.8%),另外5例患者属非胆囊结石(1.9%);2、彩色多普勒超声确诊的260例胆囊结石患者经手术病理证实其中255例为胆囊结石,5例为非胆囊结石(2例为误诊,3例为漏诊),超声诊断的准确率98.1%。误诊、漏诊的发生与病灶部位、患者肥胖程度、仪器操作及医师经验等因素有关。结论:虽然彩色多普勒超声对胆囊结石的诊断率较高,但仍需完善,以减少或避免临床误诊和漏诊的发生。     

无创机械通气治疗老年COPD合并呼吸衰竭的疗效分析

目的:观察无创机械通气治疗老年慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmon-ary disease,COPD)合并呼吸衰竭的临床效果及护理方法。方法:回顾分析我院2011年1月-2012年12月收治的COPD合并呼吸衰竭的老年患者122例,分为观察组与对照组,观察组采用BiPAP Vision呼吸机进行无创机械通气治疗,依据氧合调整EPAP,使脉搏血氧饱和度维持在90%以上,当病情好转,及时降低FiO2,降低呼吸条件。并在通气阶段配合心理护理,管道护理,气道湿化,预防感染等护理措施,使患者保持良好的心态,提高治疗依从性,对患者进及家属讲解该方法的优越性,协助患者取舒适体位。严密监护患者病情发展,加强与患者沟通,消除患者紧张、烦躁心理。定期观察患者意识、呼吸、HR、BP等变化。定时复查血气分析,保持充足的液体入量,及避免误解。对照组给予给予持续低流量吸氧治疗,1-3 L/min,并酌情给予呼吸兴奋剂静脉滴注。观察两组患者生命体征变化,并于治疗前后行动脉血气分析。结果:观察组患者治疗后PaO2、PaCO2较治疗前明显改善,治疗前后比较差异有统计学意义(P0.01);且上述指标较对照组改善更为明显,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:无创机械通气是治疗老年COPD合并呼吸衰竭的一种安全有效的方法。     

4-PA对BEL-7402细胞的生长调控和诱导凋亡作用的研究

应用ＭＴＴ、流式细胞术研究了新型肿瘤诱导分化剂４－ＰＡ对人肝癌细胞系ＢＥＬ－７４０２细胞的生长调控、诱导调亡作用。结果表明：４－ＰＡ对ＢＥＬ－７４０２细胞增殖抑制的ＩＣ５０为４－９ｍｍｏｌ／Ｌ,随着作用时间的增加,ＩＣ５０增加。作用效果迅速,在０．５小时就有效地抑制了细胞增殖,抑制率随４－ＰＡ浓度的增加和作用时间的处长而增加,在达到最大抑制率后出现饱和。流式细胞仪对细胞周期和细胞调亡的分析发现：４     

质谱法测定梗阻性黄疸病人减黄术前后红细胞膜脂的变化

通过质谱法测定梗黄病人减黄术前后的红细胞膜脂变化,发现减黄术后两周,病人红细胞膜脂的中长链脂肪酸、不饱和脂肪酸增多,双键含量增加,膜脂成分趋向正常。推测膜稳定性和流动性好转,改善了细胞功能,从而有利于病人的恢复。此方法很灵敏、简便、快捷、准确     

梗阻性高胆红素血症红细胞膜成分与结构的相关性研究

为进一步证明梗阻性高胆红素血症对细胞膜的损伤作用,探讨胆红素的毒性机理,我们采用毛细管电泳,圆二色谱,质谱,荧光偏振等方法,研究了红细胞膜蛋白的组成及膜的构象关系,结合膜脂的变化情况,反映了梗阻性高胆红素血症时红细胞膜的成分受到明显的影响,膜脂发生脂质过氧化、膜蛋白被氧化性降解,破坏了细胞骨架,使细胞膜的正常结构被破坏,膜流动性增大、膜稳定性下降,从而细胞不能维持其正常的生物功能。     

4-PA对BEL-7402细胞的生长调控和诱导凋亡作用的研究

应用ＭＴＴ、流式细胞术研究了新型肿瘤诱导分化剂４－ ＰＡ 对人肝癌细胞系ＢＥＬ－ ７４０２ 细胞的生长调控、诱导凋亡作用。结果表明： ４ － ＰＡ 对ＢＥＬ－ ７４０２ 细胞增殖抑制的ＩＣ５０ 为４ －９ｍ ｍｏｌ／Ｌ,随着作用时间的增加,ＩＣ５０ 增加。作用效果迅速,在０ ．５ 小时就有效地抑制了细胞增殖,抑制率随４－ ＰＡ 浓度的增加和作用时间的延长而增加,在达到最大抑制率后出现饱和。流式细胞仪对细胞周期和细胞凋亡的分析发现：４ － ＰＡ 对细胞增殖期（Ｓ期、Ｇ２ 期） 有较强的抑制和逆转作用,使细胞群截止在Ｇ１ 期。随着作用时间的延长和４ － ＰＡ 浓度的增加,细胞凋亡的比例增加,凋亡细胞多来自于细胞增殖期（Ｓ 期、Ｇ２ 期） 。诱导凋亡和使细胞截止于细胞静息期是４ － ＰＡ 抑制细胞增殖的主要途径。