国产生物反应器及其在病毒培养中的应用

本文简要介绍了华东化工学院研制的CellCuI-20细胞培养生物反应器,报道了此反应器用于细胞和病毒培养的情况。经严格的无菌试验和一年多的培养表明：CellCul－20反应器具有优良的抗污染性能,其主要参数的控制完全满足细胞培养的要求,并能根据培养过程的实际情况,随时对参数进行修正。用所开发的培养工艺进行Vero细胞和乙脑病毒培养,细胞在较短时间内达到高密度,乙脑病毒滴度和抗原效价均取得了较为满意的结果。在国际上第一次成功地应用Vero细胞大规模培养乙脑病毒原制苗。     

国产生物反应器大规模高密度培养Vero细胞

本文考察了在2．5LcelliGen细胞培养器和国产20LcellCul-20细胞培养生物反应器中采用微载体技术培养细胞的情况。分析了用cellcul-20细胞培养生物反应器进行大规模培养时细胞的生长、代谢规律,研究了从2．5L扩大到20L规模的细胞转移条件。采用微载体球间直接转移技术。提高了接种效率,减少了接种步骤和污染机会。当国产GT一25微载体用量为5g／L,采用连续灌注工艺培养vero细胞,在国产20L cellCul—20细胞培养生物反应器中,连续培养5天,细胞数增加7倍,细胞密度超过1．0×10⁷ cells／m】。本文开发的细胞培养工艺,对于中试及工业规模的动物细胞大量培养具有一定的指导意义。     

茚三酮比酮法分析含铵天门冬氨酸

本文介绍了一种茚三酮显色分析含铵天门冬氨酸溶液的方法。为排除铵对茚三酮显色的严重干扰,首先在低PH下使天门冬氨酸溶液通过强酸性阳离子树脂交换柱,再行稀释显色。这种分析方法的分析误差在5%以内。     

动物细胞培养反应器氧传递速率的研究

本文系统研究了具有笼式通气搅拌装置的CellCul－20A动物细胞培养反应器的氧传递规律,考察了温度、转速、通气速率、丝网及消泡腔对氧传递速率的影响。实验结果表明,通气速率对kLa有显著影响,消泡腔对kLa有不利作用。根据实验数据,建立了表面通气、深层通气的氧传递关联式。     

搅拌生物反应器中杂交瘤细胞生长与破损的初步研究

采用连续悬浮培养技术,在３种培养基组成下实验考察了生物反应器中机械搅拌强度和气泡对细胞生长和破损或伤害的作用,发现杂交瘤细胞在无血清培养基中培养时,１２０ｒ／ｍｉｎ的机械搅拌强度对细胞产生了生理伤害作用,而造成细胞破损的主要是气泡。血清和ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ６８对细胞均有保护作用,它们的存在能保护细胞免受流体剪切的生理伤害作用,适应更高的机械搅拌强度,ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ６８能有效地防止气泡对细胞的破损作用。另外,对它的保护作用机理也作了讨论。     

小牛皮提取的胶原－微载体用于贴壁细胞大规模培养

由于胶原蛋白具有与含牛血清培养基中纤粘素(Fibronectin)一类物质相结合的特点,因而胶原是一类来源广泛的可用作制备细胞培养介质的优良基质。经过各种形式的细胞培养试验,以变性胶原为材料合成得到的GT一2微载体可成功地用于Vero,CHO、Bowes以及鱼类细胞的贴壁培养。培养规模包括不同容积的静置培养,滚瓶培养以及1．5L和20L进口和国产生物反应器的大规模细胞培养。     

氨、乳酸对杂交瘤细胞生长代谢的影响

本文通过在不同浓度乳酸、氨的条件下培养2F7杂交瘤细胞,考察了氨,乳酸对2F7杂交瘤细胞生长代谢过程的影响,包括对葡萄糖消耗、乳酸生成、细胞活性的影响。实验表明,当加入氨或乳酸分别达2．5mmol／L、2．5mg／ml时,对细胞产生抑制作用,5 mmol／L氨或5．0mg／m1乳酸将对细胞产生严重抑制作用。