山羊不同组织器官的内参基因筛选

本研究通过比较9个内参基因在山羊不同组织中的表达水平进而确定最适合研究山羊组织表达的内参基因。本试验以简州大耳羊为试验材料,利用实时荧光定量PCR技术分析9个内参基因(GAPDH,PPIA,18S rRNA,PPIB,UXT,RPLP0,ACTB,EIF3K和TBP)在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠、瘤胃、背最长肌和皮下脂肪等组织中的表达差异情况,并利用geNorm、NormFinder和BestKeeper等程序分析了它们的表达稳定性。geNorm和NormFinder程序一致显示TBP表达最稳定,其次是UXT和RPLP0;BestKeeper分析显示18S rRNA表达最为稳定,其次为TBP和ACTB;3个程序一致认为GAPDH表达稳定性最差。综合3个程序分析得出TBP最适合作为山羊组织中的内参基因,其次为UXT和RPLP0,GAPDH表达稳定性最差,不适合作为山羊组织内参,这为后续研究其他目的基因在山羊组织器官中的表达模式提供数据保障。     

高压氧联合依达拉奉、奥扎格雷钠治疗急性脑梗死的疗效观察

目的：评价高压氧联合依达拉奉、奥扎格雷钠治疗急性脑梗死（ACI）的临床疗效,观察其对患者血液流变学指标与血浆血栓素A2（TXA2）、前列腺素I2（PGI2）水平的影响。方法：86例急性脑梗死患者随机分为治疗组与对照组：其中治疗组45例,应用高压氧联合依达拉奉、奥扎格雷钠进行治疗;对照组41例单用奥扎格雷钠,对比分析等两组治疗前后神经功能缺损评分（NHSS）、Barthel指数（BI）和血液流变学指标变化,同时采用放射免疫法检测患者治疗前后血浆TXA2和PGI2含量,最后比较两组患者的临床疗效。结果：①治疗组基本治愈率和总有效率分别为28．89％、91．11％,优于对照组17．07％的基本治疗愈率和80．49％的总有效率（P〈0．01）,两组均无明显不良反应。②经过治疗,患者NHSS评分明显下降,而BI评分明显升高（P〈0．01或0．05）,且治疗组改善程度高于对照组（P〈0．01或0．05）。（3）治疗后,患者各血液流变学指标均明显下降（P〈0．01或0．05）,其中治疗组血小板凝集率、纤维蛋白原水平和血液粘稠度降低幅度大于对照组（P〈0．05）。④经过治疗,两组血浆TXA2水平下降,PGI2水平上升,TXA2／PGI2比值减少（P〈0．01）,其中治疗组变化明显好于对照组（P〈0．01或0．05）。结论：高压氧联合依达拉奉、奥扎格雷钠治疗急性脑梗死能减轻脑细胞损伤,改善神经功能障碍,疗效显著,值得临床推广。     

从进境杨木中首次截获条纹根瘤象(鞘翅目:象甲科)

【目的】2016年9月临沂出入境检验检疫局从德国进境的杨木原木中检出活体象甲科昆虫。【方法】通过形态学观察与线粒体DNA细胞色素氧化酶(mt COⅠ)序列测定及系统进化分析,对该虫进行了物种鉴定。【结果】该虫的形态特征与条纹根瘤象相似;测序分析发现,其COⅠ序列特征与Gen Bank中条纹根瘤象mt COⅠ序列相似性为100%;系统进化树表明,其与条纹根瘤象聚为一组。【结论】以上结果证实该虫为条纹根瘤象。这是我国首次从进境带皮杨木中截获该有害生物,需引起检验检疫部门的重视。     

高压氧联合依达拉奉、奥扎格雷钠治疗急性脑梗死的疗效观察

目的:评价高压氧联合依达拉奉、奥扎格雷钠治疗急性脑梗死（ACI）的临床疗效,观察其对患者血液流变学指标与血浆血栓素A₂（TXA₂）、前列腺素I₂（PGI₂）水平的影响。方法:86例急性脑梗死患者随机分为治疗组与对照组:其中治疗组45例,应用高压氧联合依达拉奉、奥扎格雷钠进行治疗;对照组41例单用奥扎格雷钠,对比分析等两组治疗前后神经功能缺损评分（NHSS）、Barthel指数（BI）和血液流变学指标变化,同时采用放射免疫法检测患者治疗前后血浆TXA₂和PGI₂含量,最后比较两组患者的临床疗效。结果:①治疗组基本治愈率和总有效率分别为28.89%、91.11%,优于对照组17.07%的基本治疗愈率和80.49%的总有效率（P<0.01）,两组均无明显不良反应。②经过治疗,患者NHSS评分明显下降,而BI评分明显升高（P<0.01或0.05）,且治疗组改善程度高于对照组（P<0.01或0.05）。③治疗后,患者各血液流变学指标均明显下降（P<0.01或0.05）,其中治疗组血小板凝集率、纤维蛋白原水平和血液粘稠度降低幅度大于对照组（P<0.05）。④经过治疗,两组血浆TXA₂水平下降,PGI₂水平上升,TXA₂/PGI₂比值减少（P<0.01）,其中治疗组变化明显好于对照组（P<0.01或0.05）。结论:高压氧联合依达拉奉、奥扎格雷钠治疗急性脑梗死能减轻脑细胞损伤,改善神经功能障碍,疗效显著,值得临床推广。     

四氢嘧啶微生物合成与应用研究进展

极端环境微生物定义了生命的边界。为了适应各种极端环境,极端环境微生物通过合成许多独特的活性化合物来保护自己。四氢嘧啶就是其中一种代表性的保护性物质。它最早是从极端嗜盐菌中发现的,作为调节细胞渗透压的一类相容性溶质,可以帮助微生物适应高盐等恶劣环境。研究发现四氢嘧啶不仅是一种重要的渗透压调节剂,还是一种高效的生物保护剂,可以帮助蛋白、核酸、生物膜乃至整个细胞对抗高温、干燥、冷冻和辐射等多种逆境。因此,四氢嘧啶在生物保护、生物医药和生物科技等众多领域展现出广阔的商业化应用前景。随着合成生物学和代谢工程技术的快速发展,传统的嗜盐菌四氢嘧啶生产方法已逐步被产率更高、环境更友好的生物工程菌及技术所取代。本文围绕四氢嘧啶的微生物合成及其应用研究进行综述,为后续四氢嘧啶的开发和应用提供重要参考。     

分泌包载ANXA2-MS2 RNA外泌体的稳转细胞株的构建

摘要 目的：基于MCP-MS2示踪系统构建能稳定分泌含有标签的膜联蛋白A2（ANXA2）RNA的外泌体的供体细胞株。方法：利用慢病毒载体构建稳定表达MCP-EGFP的HEK293细胞株,采用流式细胞技术筛选具有较好荧光特性的单克隆细胞株。然后再次通过慢病毒稳定表达系统构建出能分泌结合有MCP-EGFP标记的ANXA2 RNA外泌体的供体细胞株。通过透射电镜、NTA、NanoFCM、共聚焦显微镜等仪器对供体细胞所产生的外泌体进行表征。结果：通过慢病毒载体成功构建了MCP-EGFP稳定表达细胞株,然后利用该细胞株通过慢病毒载体成功导入含有MS2标签的ANXA2基因。实验结果表明,构建的供体细胞与正常细胞所分泌的外泌体形态相似,实实施时荧光定量PCR的结果显示分泌的外泌体中含有MS2特殊序列,而同时Western blot的结果显示分泌的外泌体中含有EGFP蛋白。结论：通过慢病毒法成功建立了能分泌含有MS2标记的ANXA2 RNA的外泌体供体细胞株,为高效、稳定的装载特定RNA外泌体的供体细胞株的构建提供了新的方法和理论基础。