香菇菌丝体多糖LeBD1—1的分离纯化和分析

香菇４６５菌株用添加啤酒发酵醪泥的培养基发酵培养１０ｄ后,菌丝体经洗涤、热水浸提、乙醇沉淀再经ＤＥＡＤ－纤维素柱（Ｃｌ＾－型）分离和Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００柱层析纯化,得到白色絮状多糖ＬｅＢＤ１－１。经醋酸纤维薄膜电泳和ＨＰＬＣ检测纯度,ＬｅＢＤ１－１为均一成分。ＨＰＬＣ法测得分子量为１３００００Ｄａ,红外光谱测定其糖苷键为α型。经完全酸水解后用填表交薄层层析和气相色谱分析单糖组成,ＬｅＢＤ１     

药用真菌子实体多糖SEC—HPLC图谱的相似度定量评价研究

目的：对灵芝属Ganoderma下4个种共7个菌株及灰树花Grifola ffondosa和云芝Trametes versicolor共9种子实体粗多糖进行了体积排阻HPLC色谱（SEC—HPLC）,并分析了相似度。方法：各样品水提物的HPLC图谱用平方欧氏距离法计算了相似度,用离差平方和法进行聚类分析。结果：灵芝属内各样品聚类距离为8,灰树花与云芝的聚类距离为16,它们与灵芝属的距离为25,说明同一灵芝属内的不同种及同种不同菌株所产生的多糖分子量分布近似度远高于来自树花菌属的灰树花或栓菌属的云芝。结论：此方法可量化描述不同多糖间SEC—HPLC的相似关系,有作为真菌多糖样品质量控制手段的潜在能力。     

药用真菌子实体多糖SEC-HPLC图谱的相似度定量评价研究

目的:对灵芝属Ganoderma下4个种共7个菌株及灰树花Grifola frondosa和云芝Trametes versicolor共9种子实体粗多糖进行了体积排阻HPLC色谱(SEC-HPLC),并分析了相似度.方法:各样品水提物的HPLC图谱用平方欧氏距离法计算了相似度,用离差平方和法进行聚类分析.结果:灵芝属内各样品聚类距离为8,灰树花与云芝的聚类距离为16,它们与灵芝属的距离为25,说明同一灵芝属内的不同种及同种不同菌株所产生的多糖分子量分布近似度远高于来自树花菌属的灰树花或栓菌属的云芝.结论:此方法可量化描述不同多糖间SEC-HPLC的相似关系,有作为真菌多糖样品质量控制手段的潜在能力.     

鲎G因子实验法定量测定药用、食用蘑菇多糖中的（1，3）-β-葡聚糖含量

(1,3)-β-葡聚糖是蘑菇免疫调节和抗肿瘤多糖的核心结构。通过鲎的G因子法测定了从19种药用和食用蘑菇中提取的27个多糖样品中(1,3)-β-葡聚糖的含量,我们发现(1,3)-β-葡聚糖普遍存在于这些蘑菇多糖提取物中。但是,(1,3)-β-葡聚糖的含量随蘑菇的种类和多糖提取的部位不同有着很大的差异,平均值大约占多糖的34．8％。从香菇、裂褶菌、云芝、草菇、灰树花、鸡腿菇和姬菇中提取的9种多糖中(1,3)-β-葡聚糖含量远高于其余的多糖。适当的纯化可以提高蘑菇多糖中(1,3)-β-葡聚糖的含量。我们的研究表明鲎G因子法可以用来快速有效地测定蘑菇多糖提取物中的(1,3)-β-葡聚糖含量。     

鲎G因子实验法定量测定药用、食用蘑菇多糖中的(1,3)-β-葡聚糖含量

(1,3)--葡聚糖是蘑菇免疫调节和抗肿瘤多糖的核心结构。通过鲎的G因子法测定了从19种药用和食用蘑菇中提取的27个多糖样品中(1,3)--葡聚糖的含量,我们发现(1,3)--葡聚糖普遍存在于这些蘑菇多糖提取物中。但是,(1,3)--葡聚糖的含量随蘑菇的种类和多糖提取的部位不同有着很大的差异,平均值大约占多糖的34.8%。从香菇、裂褶菌、云芝、草菇、灰树花、鸡腿菇和姬菇中提取的9种多糖中(1,3)--葡聚糖含量远高于其余的多糖。适当的纯化可以提高蘑菇多糖中(1,3)--葡聚糖的含量。我们的研究表明鲎G因子法可以用来快速有效地测定蘑菇多糖提取物中的(1,3)--葡聚糖含量。     

不同灵芝菌株菌丝体乙醇提取物体外抑瘤活性的比较和机理

以人急性早幼粒白血病细胞HL-60细胞株作为模型,用MTT法测定生长抑制率,流式细胞Annexin Ⅴ实验和DNA含量法研究抑瘤机制,比较了8个灵芝Ganoderma lucidum菌株发酵菌丝体乙醇提取物的体外抗肿瘤活性和抑瘤机制。筛选结果得到了能产生高抑瘤活性乙醇提取物的灵芝菌株L5。其对HL-60细胞的抑制率为91.4±0.9%(72小时,125μg/mL); 作用48小时后,13.3%的细胞发生早期凋亡,G0/G1期细胞比例比对照组增加15.9%,而S期细胞比例则下降了8.4%,G2/M期细胞数减少7.6%。本研究证明了灵芝菌丝体乙醇提取物能有效抑制HL-60肿瘤细胞的体外生长,抑制率与菌株相关,其抑瘤机制与细胞G0/G1期阻滞和诱导凋亡有关。     

5个不同灵芝种菌丝体多糖理化性质及免疫活性研究

对灵芝属G.lucidum,G.tsugae,G.oerstedii,G.resinaceum,G.subamboinens5个不同种用同一条件进行了液体发酵培养、多糖提取、理化性质及免疫活性的分析。结果表明,5种灵芝的菌丝体多糖得率相差较大,以G.oerstedii最高,但各多糖提取物分子量分布相似,单糖组成均以葡萄糖为主,并含半乳糖、甘露糖、盐酸氨基葡萄糖、岩藻糖。5种多糖提取物均能显著增强小鼠巨噬细胞Raw264.7吞噬作用、释放NO,但以G.subamboinens菌丝体多糖提取物的活性最强。这些多糖提取物还均能促进小鼠脾细胞的增殖,并对ConA诱导的淋巴细胞增殖有抑制作用。研究表明灵芝属内其他3个物种的菌丝体多糖提取物理化特征与G.lucidum和G.tsugae接近,并同样具有免疫调节作用。