凝固酶阴性葡萄球菌耐药基因和粘附基因检测及耐药性分析

目的了解凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS）耐药基因和粘附基因的分布及其耐药性情况。方法收集45株凝固酶阴性葡萄球菌临床分离株,采用PCR检测其耐药基因mecA和粘附基因c弘知如B,并分析其耐药性。结果（1）凝固酶阴性葡萄球菌中mecA、cva、fn6pB的阳性率依次为86．7％（39／45）、11．1％（5／45）、71．1％（32／45）。（2）凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCoNS）的检出率为88．9％,对β-内酰胺类抗生素的耐药率都在80％以上,对利福平、左氧氟沙星、林可霉素的耐药率较低,未发现对万古霉素、利奈唑胺耐药菌株。结论CoNS中MRCoNS检出率很高,对常用抗生素耐药率高,且有一定的粘附能力,临床上应该根据药敏试验结果慎重及合理的使用抗生素。     

猪肝细胞和培养上清液中猪内源性逆转录病毒的检测

建立了猪肝细胞及其培养上清液中猪内源性逆转录病毒(PERV)的检测方法,探讨了其在猪肝细胞生物人工肝应用中的意义。以PERV gag基因为靶序列,选用特定的引物,PCR检测中国实验用小型猪肝细胞PERV前病毒DNA;RT-PCR检测猪、犬、大鼠以及HBV阳性病人血清和猪肝细胞培养6h、24h时的上清液PERV RNA,同时检测猪肝细胞猪线粒体DNA(mtDNA)。研究结果表明：检测5份中国实验用小型猪血清、肝细胞及培养猪肝细胞24h时的上清液PERV均为阳性,而5份培养猪肝细胞6h时的上清液、5份犬血清、5份大鼠血清和5份HBV阳性病人血清PERV检测结果均为阴性,猪肝细胞中均可检测到猪mtDNA。因此,中国实验用小型猪肝细胞携带PERV;PERV可释放到血清中;猪肝细胞培养24h后该病毒颗粒已释放到培养液中;PCR和RT-PCR方法检测PERV具有特异性强、简便的特点。     

两种临床标本中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌生物膜形成能力的检测与其耐药特征的研究

目的研究两种临床标本来源中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）生物膜形成能力和抗菌药物耐药率,并探讨二者的关系,为临床检测和治疗提供依据。方法收集温州医学院附属第二医院2009年1月至2010年12月的分离鉴定的MRSA共128株,其中脓液59株,痰液69株;采用刚果红平板检测多糖粘附素（PIA）,半定量粘附试验检测生物膜表型,PCR检测icaA基因结果用z。分割法进行统计分析。结果128株MRSA中生物膜阳性菌株为61株,其中脓液36株、痰液25株,脓液中检出生物膜的阳性率明显高于痰液中检出生物膜的阳性率（x2=7．382,P=0．005）。MRSA对所有B．内酰胺类抗生素全耐药,对万古霉素和利奈唑胺全敏感,痰液中MRSA对利福平、庆大霉素、环丙沙星的耐药率显著高于脓液中MRSA的耐药率（P〈0．05）,但是痰液中MRSA对克林霉素的耐药率要显著低于脓液中MRSA的耐药率（P〈0．05）。脓液中生物膜阳性菌株和生物膜阴性菌株对抗菌药物的耐药率差异无统计学意义（P〉0．05）,但是痰液中生物膜阳性菌株对克林霉素的耐药率高于生物膜阴性菌株的耐药率（P〈0．05）,对利福平的耐药率显著低于生物膜阴性菌株的耐药率（P〈0．05）。结论脓液中MRSA的生物膜检出率比痰液高,但是脓液中MRSA的耐药率比痰液中的耐药率要低,MRSA对抗菌药物的耐药谱和生物膜的形成并无直接的关系。     

不同来源标本中大肠埃希菌耐药率的比较分析

目的研究不同标本来源中大肠埃希菌的耐药谱,为临床用药提供治疗参考。方法对温州医学院附属第二医院2010年1月到12月患者送检的体液标本进行培养,用microcsan walkaway 96S微生物自动鉴定仪对菌种鉴定及药敏分析,结果用2分割法进行统计分析。结果分离出大肠埃希菌597株,其中痰液、脓液、血液、分泌物、引流液中分别分离出295、148、102、37、15株。所有分离株均对亚胺培南敏感,对氨苄西林、哌拉西林的耐药率最高。痰液分离株对氨曲南、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林、妥布霉素及所有头孢类的耐药率显著高于血液分离株的耐药率(P<0.05);痰液分离株对氨曲南、氨苄西林/舒巴坦、除头孢他啶外的所有头孢类的耐药率显著高于脓液分离株的耐药率(P<0.05);脓液分离株对氨苄西林、哌拉西林、妥布霉素的耐药率明显高于血液分离株的耐药率(P<0.05)。痰液中ESBLs阳性率显著高于血液和脓液中ESBLs阳性率。产ESBLs的大肠埃希菌共316株,所占的比例为52.9%;痰液分离的ESBLs阳性株对四环素、环丙沙星、加替沙星、左氧氟沙星、甲氧苄啶/磺胺呷恶唑、阿米卡星的耐药率显著低于脓液分离株的耐药率(P<0.05)。结论痰液分离的大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素的耐药率普遍高于脓液和血液分离株的耐药率,同时认识到该院抗生素的耐药现象很严重,临床上更加合理的使用抗菌药物。