七彩红竹二氢黄酮醇4-还原酶基因IhDFR1的克隆及表达分析

二氢黄酮醇4-还原酶（DFR）是植物花色素苷合成途径中的关键酶,在植物花色的形成过程中起重要作用。依据七彩红竹转录组数据设计特异引物,采用ImPcR技术从七彩红竹中克隆获得了一个新的DFR基因cDNA全长,命名为IhDFR1（登录号为KF728205）。序列分析结果表明,IhDFR1基因cDNA全长945bp,编码314个氨基酸。生物信息学预测显示,该基因编码的蛋白具有典型的DFR蛋白功能结构域,存在2个特异结合位点,属于非Asn／Asp型DFR酶,与禾本科植物中的DFR具有较高的相似性。对不同发育时期七彩红竹的IhDFR1基因进行时空表达的结果显示,只有在竹秆颜色呈现红紫色时,IhDFR1基因才有表达。以上结果初步显示IhDFR1蛋白可能作为一个重要的酶参与竹秆花色素苷的代谢调控,同时为进一步研究七彩红竹花色素苷产生的分子机理和综合开发利用奠定了基础。     

正选择基因无启动子的供体质粒pN(CDS)(N2)-R的构建及应用

为提高对发生基因编辑细胞的筛选效率,本研究构建了具备正负筛选功能的供体质粒pN(CDS)(N2)-R,其正选择基因是无启动子NeoR,负选择基因是能自主表达的RED。利用该质粒和CRISPR-Cas9系统对小鼠B16细胞FasL进行编辑。G418筛选2周,获得混合克隆。镜下观察显示,混合克隆质量较高。junction PCR结果表明,有基因编辑发生。DNA测序结果表明,NeoR准确插入靶位点。细胞杀伤实验表明,FasL功能被有效敲除。该供体质粒的多克隆位点,充分利用同尾酶酶切位点,因而具有广泛的适用性。综上所述,在对各种位点进行编辑时,使用该供体质粒有助于混和克隆的筛选。     

中国隔距兰属(兰科)一新记录(英文)

隔距兰属(Cleisostoma Bl.)是兰科植物中较大的一个属,约有100种,广泛分布于热带、亚热带地区。中国约有16种,其中4种为特有。该文报道了该属一中国新记录——二齿叶隔距兰[Cleisostoma aspersum(Rchb.f.)Garay],并提供描述和照片,目前该种仅见于云南。与近缘种类相比,本种具有以下鉴别特征:叶齿状二裂;唇瓣中裂片肥厚,前缘钝;蕊喙圆锥状,先端歪斜;药帽喙状等。在花部形态上,该种与Cleisostoma discolor Lindl.相似,然而后者的唇瓣中裂片明显较薄,匙状方形,并且具有啮齿状边缘,易于区别。     

根癌农杆菌介导的地衣型真菌Cladonia metacorallifera的转化

以潮霉素抗性和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)作为筛选标记,利用地衣型真菌Cladonia metacorallifera的菌丝,成功实现了根癌农杆菌介导的遗传转化,PCR检测证明转化子中存在潮霉素抗性基因,共聚焦显微镜检测到转化子菌丝能够产生绿色荧光,证明EGFP能够在trp C启动子控制下在地衣型真菌中表达。     

碳酸氢盐投加对寡枝刚毛藻光合色素及碳酸酐酶活性的影响研究

研究了投加碳酸氢盐对寡枝刚毛藻(Cladophora oligoclona Kütz)生长和生理生化特性的影响。结果表明, 初始 碱度为 11.7 mmol·L–1 时藻体生长较好, 12 天后, 藻体湿重比对照组增加了 47.57%。寡枝刚毛藻对碳酸氢盐碳源有较强的利用能力。与对照组相比, 实验组藻体内叶绿素 b/叶绿素 a(Chl.b/Chl.a)的值降低, 类胡萝卜素/叶绿素(Caro/TChl)的值升高。实验末期, 高碱度组中藻体内碳酸酐酶活性相比对照组降低了 74.6%。