抗肿瘤疫苗MAGE1-MAGE3-HSP70蛋白特性及其纯化策略的研究

目的:对MAGE1-MAGE3-HSP70(M1-M3-HSP70)融合蛋白的理化性质及其纯化策略进行初步研究,为后期的临床前试验提供数据和依据。方法:以本实验室构建的菌种(BL21(DE3)pLysS-M1-M3-HSP70)为材料,采用常规细菌培养及诱导方法进行诱导表达,用聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳、免疫印迹(Western blotting)对目的蛋白进行分析,然后确定盐析条件,使用ButylSepharose HP疏水相互作用层析以及阴离子交换(Source 30Q填料)对目的蛋白的纯化进行分析。结果:M1-M3-HSP70蛋白在大肠杆菌中表达后,目的蛋白分为两部分,一部分为包涵体形式(44.9%),一部分为可溶表达(55.1%)。对其可溶部分进行研究发现,细菌裂解后,目的蛋白存在聚合和降解现象;确定了盐析条件、洗脱缓冲液以及稳定的PH值范围,基本确定了目的蛋白的纯化工艺。结论:明确了M1-M3-HSP70融合蛋白的基本性质,确定了目的蛋白的纯化方法,为基于融合蛋白的肿瘤疫苗的进一步研究提供了参考。     

抗肿瘤疫苗MAGE1-MAGE3-HSP70蛋白特性及其纯化策略的研究

目的：对MAGE1-MAGE3-HSP70（M1-M3-HSP70）融合蛋白的理化性质及其纯化策略进行初步研究,为后期的临床前试验提供数据和依据。方法：以本实验室构建的菌种（BL21（DE3）pLysS-M1-M3-HSP70）为材料,采用常规细菌培养及诱导方法进行诱导表达,用聚丙烯酰胺凝胶（SDS—PAGE）电泳、免疫印迹（Westemblotting）对目的蛋白进行分析,然后确定盐析条件,使用ButylSepharoseHP疏水相互作用层析以及阴离子交换（Source30Q填料）对目的蛋白的纯化进行分析。结果：M1-M3-HSP70蛋白在大肠杆菌中表达后,目的蛋白分为两部分,一部分为包涵体形式（44．9％）,一部分为可溶表达（55．1％）。对其可溶部分进行研究发现．细菌裂解后,目的蛋白存在聚合和降解现象;确定了盐析条件、洗脱缓冲液以及稳定的PH值范围,基本确定了目的蛋白的纯4~．z-艺。结论：明确了M1-M3-HSP70融合蛋白的基本性质,确定了目的蛋白的纯化方法,为基于融合蛋白的肿瘤疫苗的进一步研究提供了参考。     

外源24-表油菜素内酯对弱光胁迫下番茄幼苗生长及光合作用的影响

以弱光敏感型番茄品种‘基尔斯’为试验材料,采用营养液栽培方式,研究了外源24-表油菜素内酯(24-epi-brassinolide,EBR)对弱光(80μmol.m-2.s-1)胁迫下番茄幼苗生长、气体交换参数、叶绿素荧光参数、叶绿素含量、抗氧化酶活性和MDA含量的影响。结果显示,弱光胁迫显著影响番茄幼苗的生长和相关生理指标。而弱光下叶面喷施EBR 15d后,番茄幼苗的茎粗、地上部鲜重、干重、壮苗指数分别显著升高15.8%、29.3%、79.0%、114.5%,净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)分别显著升高34.1%、46.3%、35.9%,叶绿素荧光参数Fv/Fm、ФPSⅡ、ETR分别升高21.0%、15.4%、16.7%,SOD、POD、CAT和APX活性分别升高16.7%、31.8%、32.7%、51.2%,株高、叶面积、胞间CO2浓度(Ci)、叶绿素总量、MDA含量分别下降9.8%、13.9%、0.9%、13.2%、19.5%。研究表明,适量外源EBR可以通过增强保护酶系统的活性来减轻弱光胁迫造成的膜脂过氧化伤害,有效解除弱光胁迫下番茄幼苗光合作用减弱的非气孔限制因素,维持光合活性,促进幼苗生长。     

油菜素内酯对低氧胁迫下黄瓜幼苗叶片线粒体、叶绿体超微结构及光合的影响

在水培条件下,研究24-表油菜素内酯(EBR)对低氧胁迫下黄瓜幼苗叶片叶绿体和线粒体超微结构及光合的影响.结果表明:与正常通气条件相比,低氧胁迫下表观量子效率(AQY)和羧化效率(CE)显著降低,而光补偿点(LCP)、暗呼吸速率(Rd)和CO2补偿点(CCP)显著升高;低氧胁迫并添加油菜素内酯处理下,CE与低氧胁迫处理相比显著提高29.4％,而LCP和Rd分别显著下降15.0％和14.4％.光响应Pn-PPFD曲线和CO2响应Pn-Ci曲线表明,低氧胁迫下净光合速率(Pn)增幅降低,而添加油菜素内酯有利于Pn增幅的提高.低氧胁迫下叶绿体和线粒体结构受到伤害,而油菜素内酯可以缓解低氧胁迫对黄瓜幼苗叶绿体和线粒体超微结构的不良影响,使叶片维持较好的光合性能.     

临时起搏器经皮冠状动脉介入术治疗高风险冠状动脉病变的效果观察

目的分析并总结采用临时起搏器在实施经皮冠状动脉介入术治疗高风险冠状动脉病变中的应用效果。方法回顾性分析在临时起搏器支持下实施PCI的18例高危病人的临床资料,分析临时起搏器置入以及冠脉介入的操作情况。结果本组病人置入临时起搏电极起搏成功率达到100％。结论联合应用临时起搏器与经皮冠脉介入术治疗急性心肌梗死（AMI）与慢性血管闭塞性病变患者,能够降低经皮冠脉介入术治疗中由于严重心律失常导致的血液动力学改变,使病人尽快恢复正常心率以及各主要脏器的供血,减少患者的病死率,具有较高的安全性,值得在临床上广泛推广应用。     

十字花科蔬菜萝卜硫素合成代谢相关基因及外源调控

萝卜硫苷是十字花科蔬菜中一种重要的次级代谢产物,其水解产物萝卜硫素对人体有明显的抗氧化和防癌抗癌功效。在十字花科蔬菜中萝卜硫素的前体物质萝卜硫苷的合成阶段分为:氨基酸侧链的延长、核心结构的形成、侧链的次级修饰;萝卜硫苷经由黑芥子酶水解成萝卜硫素。该文综述了萝卜硫苷合成及调控相关基因(BCAT、MAM、CYP79/CYP83、AOP和MYB基因家族)的研究进展,及外源物质如:Na Cl、肥料(硫、氮、硒)、植物激素(茉莉酸甲酯、油菜素内酯、生长素)、氨基酸等对萝卜硫素合成代谢途径的影响,为萝卜硫素合成代谢途径从基因表达方面进行深入研究奠定理论基础。     

肠球菌致小儿肠道菌群失调性腹泻临床分析

目的分析肠球菌致小儿肠道菌群失调性腹泻的临床特点,为预防和治疗医院肠道菌群失调提供依据。方法对2003年1月至2005年12月住院的肠球菌致腹泻的病例进行回顾分析。结果52例肠球菌致小儿肠道菌群失调性腹泻患儿多发于婴幼儿(占86.5%);感染的肠球菌以屎肠球菌居多(占67.3%);所有患者均使用过抗菌药物,主要是第3代头孢菌素和复合抗生素,累计使用种类多,且多为联合用药。结论肠球菌致小儿肠道菌群失调性腹泻主要危险因素是使用广谱抗菌药物,临床医生应重视早期病原学检查,临床微生物实验室应注重对粪便标本中条件致病菌的分离和鉴定,及时分析腹泻原因,为临床诊断和治疗提供依据。     

24-表油菜素内酯对樱桃番茄光合特性和果实品质的影响

以樱桃番茄品种‘千禧’为试验材料,采用醋糟基质桶式栽培的方法,研究喷施不同浓度(0.05、0.10、0.20、0.40mg·L-1)的表油菜素内酯(EBR)对樱桃番茄植株叶绿素含量、光合气体交换参数、叶绿素荧光参数、产量及果实品质的影响。结果显示:(1)与对照相比,喷施0.05、0.10、0.20mg·L-1 EBR显著提高了番茄叶片叶绿素含量、净光合速率(Pn)和蒸腾速率(Tr);0.10mg·L-1 EBR处理的番茄叶片实际光化学效率(ΦPSⅡ)、有效光化学效率(Fv′/Fm′)、非光化学淬灭系数(qP)和电子传递速率(ETR)显著升高,碳酸酐酶和Rubisco酶活性也显著增强。(2)0.10mg·L-1 EBR处理番茄单果重和总产量分别比对照显著提高17.5%、33.6%,并且果实番茄红素和β-胡萝卜素含量、可溶性固形物、可溶性糖、维生素C含量也显著增加。研究表明,油菜素内酯可以调节光合酶的活性,提高番茄叶片的光合作用能力,促进番茄植株的生长发育,从而提高番茄的产量和品质,并以0.10mg·L-1 EBR处理的效果最好。     

芸薹属蔬菜再生体系研究进展

再生体系的建立对芸薹属蔬菜重要功能基因验证和重要遗传材料保存扩繁等具有重要意义。该文综述了影响芸薹属蔬菜(白菜类、甘蓝类和芥菜类)再生体系的主要因素:基因型、植物激素(NAA、BAP等)和外源添加物(硝酸银、抗坏血酸等),比较了不同影响因素对芸薹属蔬菜再生体系建立的影响差异。基因型方面表现为白菜类(AA基因组)较甘蓝类(CC基因组)和芥菜类(BB基因组)难再生。植物激素方面表现为适于芸薹属蔬菜预培养的激素一般为2,4-D和NAA+6-BA,分化培养一般为NAA+6-BA,且即使为同一类蔬菜,不同品种所需的激素浓度也不一致。外源添加物方面,硝酸银为白菜类蔬菜再生体系所必需,其也能促进甘蓝类和芥菜类的不定芽分化,但并不为两者所必需;低浓度的抗坏血酸可促进白菜类不定芽的分化和甘蓝类愈伤组织的形成。芸薹属蔬菜再生体系诱导的分子机理研究需进一步加强,同时不同芸薹属蔬菜再生条件差异产生的机理也需要深入研究。