印度木薯花叶病毒DNA在寄主植物中可能存在的形式

从印度木薯花叶病毒（ＩＣＭＶ）侵染的植物中纯化特异的核酸,经ＲＮＡａｓｅ,ＤＮＡａｓｃ,Ｎｕｃｌｅ－ａｓｅＳｌ,ＥｘｏｎｕｃｌｅａｓｅⅢ和ＥｃｏＲＩ酶切,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｄｏｔｂｌｏｔｓ杂交证实,在感病的植株中,存在两种形式的病毒核酸：环状双链ＤＮＡ和环状单链ＤＮＡ,后者可能是病毒ＤＮＡ的（－）链,环状双链ＤＮＡ经限制性内切酶作用可得２．７ｋｂ的线性双链ＤＮＡ纯化的病毒核酸含ＤＮＡ１和ＤＮＡ２两个分子量相近的组份。     

印度木薯花叶双生病毒外壳蛋白的研究Ⅱ．计算机分析外壳蛋白的一些特性

用NWGCG软件系统分析了印度木薯花叶双生病毒外壳蛋白的一些性质：(1)外壳蛋白是碱性蛋白,其等电点为10．91;(2)在外壳蛋白氨基酸序列中分布有α—helcies,β—Sheets及turns等二级结构;(3)分析了外壳蛋白中可能的表面氨基酸区域,亲水性和抗原决定簇区域;(4)在外壳蛋白的氨基酸序列中存在两个糖基化位点HNT,同时分析了双生病毒外壳蛋白氨基酸遗传密码的利用频率。     

印度木薯花叶双生病毒外壳蛋白的研究 I．外壳蛋白及其基因的一级结构

在双生病毒DNA中存在保守序列5 TAATATTAC3’,推测也存在于印度木薯花叶双生病毒(tcMv)基因组中。以此序列的互补链为引物,合成ICMV eDNA．cDNA的主带大小为2．7kb。测定了外壳蛋白的基因序列共768个核苷酸,并分柝了外壳蛋白的一级结构。ICMV外亮蛋白由20种氨基酸的256个残基组成,其中脂肪族氨基酸含量高,碱性氢基酸含量高于酸性氨基酸,含硫氨基酸和亚基酸的含量较低。比较ICMV与7种木薯粉虱(Bemi-ria tabaci)传播的双生病毒外壳蛋白,其N-末端变异程变大,而C-末端基本恒定,中部存在3段较长的保守序列。     

中国南瓜曲叶双生病毒的生物学,血清学和分子杂交的研究

从广西南宁市的南瓜上分离到一株可经烟粉虱（Ｂｅｍｉｓｉａｔａｂａｃｉ）传播的南瓜曲病毒,它可侵染南瓜（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｍｏｓｃｈａｔａ）和西葫芦（Ｃ．ｐｅｐｏ）引致叶片卷曲和严重矮化的症状。ＥＬＩＳＡ测定表明,其病叶粗提液与非洲木薯花叶病毒（ＡＣＭＶ－Ｋ）单克隆抗体ＳＣＲ１８呈强阳性反应,与ＳＣＲ１１呈较弱的阳性反应,而与ＳＣＲ２３呈阴性反应;与印度木薯花叶病毒（ＩＣＭＶ）单克隆抗体ＳＣＲ５６和ＳＣＲ６６呈强阳性巨应,与ＳＣＲ６２呈弱阳性反应,但与ＳＣＲ５２呈阴性反应。分子杂交试验进一步证实中国南瓜曲叶病的病原是南瓜曲叶双生病毒。     

一种有效的DNA序列测定方法

比较了单链和双链DNA(ss和dsDNA)模板和两种不同的聚丙烯酰胺凝胶电泳对DNA序列测定的影响。结果表明:在相同的条件下,ssDNA模板明显优于dsDNA模板;缓冲液梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳测定DNA序列的长度在40cm长的胶上可达350nt。而一般的线性聚丙烯酰胺凝胶电泳才可测150nt。对于基因组序列分析,采用单链DNA模板和缓冲液梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种有效的测定方法。     

原核微生物原生质体融合

引言微生物原生质体融合是在高等动植物体细胞杂交的基础上发展起来的。早在1838年Muller曾见到肿瘤多核细胞的融合现象,直到1962年才由Okada首次用仙台病毒诱导建立了细胞融合的基本方法。与此同时,植物的体细胞杂交也得以开展,去除细胞壁的植物原生质体融合获得杂种细胞,并再生成植株。1970年英国的Power等首次报道了高浓度NaNO_3诱导植物原生质体融合,1972年Carlson等用Na_2CO_3诱导融合。目前在植物原生质体融合中主要用的方法有两大类:keller等建立的高Ca~(2+)、高pH方法以及高国楠等发展起来的聚乙二醇诱导