用470fs时间分辨率荧光光谱法研究光系统Ⅱ反应中心原初反应的动力学特性

以菠菜（ＳｐｉｎａｃｉａｏｌｅｒａｃｅａＭｉｌ．）叶绿体中的ＰＳⅡ颗粒和ＰＳⅡ核心复合物为材料,用４７０ｆｓ时间分辨率的荧光光谱技术研究ＰＳⅡ反应中心原初反应的动力学特性,选择不同的时间测量范围和不同的检测波长,经过解卷积和多指数拟合可以分辨出２～４个衰减组分,对所得的动力学参数进行分析和讨论,认为其中３ｐｓ的组分与电荷分离有关,而０．８、１２、２５和１００ｐｓ的衰减组分很可能属于能量传递过程,提出了可能的动力学模型。     

锰簇对光系统Ⅱ蛋白二级结构的影响及其与光抑制的关系

用羟胺将光系统Ⅱ中的锰去除后,可导致光系统Ⅱ的蛋白二级结构组成发生变化,表现在α－螺旋成分的减少及转角和折叠成分的增加。将锰重组进光系统Ⅱ后,蛋白的二级结构不能恢复,并导致转角和折叠成分向无规卷曲转化。去锰后的光系统Ⅱ所发生的由供体侧电子传递受阻引起的光抑制,会在短时间内引起蛋白的构象变化。但锰重组后其在光抑制下的构象变化与正常样品相似,说明此时供体侧的电子传递得到部分恢复,光抑制部分地转移到受体侧。     

光系统II核心天线CP43和CP47的分离纯化及光谱性质研究

采用ＤＥＡＥ－ＦｒａｃｔｏｇｅｌＴＳＫ６５０Ｓ阴离子交换树脂柱层析法从菠菜（ＳｐｉｎａｃｉａＯｌｅｒａｃｅａ）中分离纯化了ＰＳＩＩ核心天线复合物ＣＰ４３和ＣＰ４７,计算出每分子ＣＰ４３含１９－２０个Ｃｈｌａ和４－５个β－Ｃａｒ;每分子ＣＰ４７含２０－２１个Ｃｈｌａ和３－４个β－Ｃａｒ。普通及三维（３Ｄ）低温（７７Ｋ）荧光发射光谱的测定证明,纯化的ＣＰ４３和ＣＰ４７都具有较好的完整性。常温（２９８Ｋ）吸收光谱的测定,证明纯化的ＣＰ４３和ＣＰ４７的红光区最大吸收峰分别位于６７１ｎｍ和６７４ｎｍ,但是它们在该区的四阶导数光谱均给出６７０ｎｍ和６８２ｎｍ两个峰,这表明,它们均至少含有两种不同结合状态的Ｃｈｌａ分子。对ＣＰ４３和ＣＰ４７中可能的能量传递机制进行了讨论     

NaCl（2 mol／L）处理PSⅡ颗粒的Ca^2＋重结合

回加Ｃａ＾２＋对ＮａＣｌ（２ ｍｏｌ／Ｌ）处理菠菜ＰＳⅡ颗粒放氧活恬的作用表现出有两种Ｋｍ值分别为０．０２１和０．５４５ｍｍｏｌ／Ｌ高亲和与低亲和的Ｃａ＾２＋重结合过程。高浓度ＮａＣｌ和低ｐＨ（３．０）处理支Ｃａ的ＰＳⅡ颗粒的光抑制放氧活性半衰期明显减小,重结合Ｃａ＾２＋后,虽然大部分丧失的放氧活性可恢复,但ＰＳⅡ颗粒放氧活性对光抑制的敏感性却并不随之恢复,ｔ１／２无明显改变。显然,重组Ｃａ＾２＋     

光系统II核心天线CP43和CP47的分离纯化及光谱性质研究

采用ＤＥＡＥ－ＦｒａｃｔｏｇｅｌＴＳＫ６５０２阴离子交换树脂柱层析法从菠 菜中分离纯化了ＰＳＯⅡ核心天线复合物ＣＰ４３和ＣＰ４７,计算出每分子ＣＰ４３含１９－２０个Ｃｈｌａ和４－５个β－Ｃａｒ;     

NaCl(2 mol/L)处理PSⅡ颗粒的Ca~(2+)重结合

回加Ca~(2+)对 NaCl(2 mol/L)处理菠菜PSⅡ颗粒放氧活性的作用表现出有两种K_m值分别为 0.021和 0.545 mmol/L的高亲和与低亲和的Ca~(2+)重结合过程。高浓度NaCl和低 pH(3.0)处理去Ca的 PSⅡ颗粒的光抑制放氧活性半衰期(t_(1/2))明显减小。重结合Ca~(2+后,虽然大部办丧失的放氧活性可恢复,但PSⅡ颗粒放氧活性对光抑制的敏感性却并不随之恢复,t_(1/2)无明显改变。显然,重组Ca~(2+)的结合状态和作用与PSⅡ颗粒原有的结合Ca不完全相同。