肌钙蛋白C(Tropnin C)的提纯与鉴定

<正> 肌钙蛋白C(TnC)是肌钙蛋白复合体的钙结合亚基,系骨骼肌和心肌收缩系统的触发因子。研究表明TnC与钙调素(CaM)类似,具有EF手结构和四个特殊的钙结合区。TnC与Ca~(2+)、Mg~(2+)等金属离子的结合可发生构型变化及由此导致的体内一系列酶活性等生理功能的变化。提纯TnC是进行其诸方面研究的基础。     

人前列腺特异抗原分离纯化

本文报道了一种从人精液中提纯前列腺特异抗原的方法,本方法仅需Affigel-Blue gel柱和凝胶HPLC二步层析,即可得到均一的PSA纯品。这是一个快速、有效的提纯方法。PSA是前列腺癌的特异肿瘤标志物。     

67ku胃蛋白酶原的分离纯化及性质研究

用DEAn-52阴离子交换层析, 高压液相凝胶过滤层析两步法, 从人胃粘膜中分离纯化到分子质量为67ku的胃蛋白酶原. 此蛋白具有较强的抗碱性,水解活性在pH10.8处理后仍无明显变化, 其水解活性的最适pH为1.8, 比活性为5.96U/mg.     

亲和层析法分离人心脏特异性肌钙蛋白Ⅰ(CSTnⅠ)

在Ca~(2+)存在下,肌钙蛋白C(TnC)和肌钙蛋白Ⅰ(TnⅠ)可于高浓度的尿素溶液中形成稳定的复合体,而该复合体又能被EGTA解离。并且TnC和TnⅠ的Ca~(2+)依赖性结合反应没有种间或者肌肉类型间的特异性。将提纯的兔快肌TnC和活化的琼脂糖凝胶进行偶联,制备TnC-Sepharose 4B亲和层析柱,用来从人心肌中直接提纯心脏特异性肌钙蛋白Ⅰ(CSTnⅠ)。SDS-PAGE测得其分子量为29kD左右。对其氨基酸组成亦进行了分析。     

呋苄青霉素放射免疫测定

呋苄青霉素(BL-P1597)具有广谱抗菌活性,是治疗绿脓杆菌很有前途的药物,其测定方法用放射免疫学方法比用微生物学方法较好。作者用BSA为载体,EDC_1为连接剂,合成了BL-P1597-BSA免疫原。每个克分子BSA约接6个克分子BL-P1597。用背部皮内多点法免疫家兔,7～9个月获得了抗BL-P1597血清,最终工作浓度:~#5兔为1:1800、~#3_s兔为1:3600,亲和常数K分别为1.70×10~8M~(-1)、1.86×10~9M~(-1)。~3H-BL-P1597免疫原性良好。用微孔滤膜分离结合的与游离的标记物。竞争抑制曲线:灵敏度35毫微克,精密度4.80±1.82%,准确度7.37±1.40%。血清测定的变异系数:批内8.3～9.8%,批间11.46～14.75%。加入血清中的BL-P1597可定量回收(93～101%)。随待测含BL-P1597血清加入量的增加(40μl～60μl/管),测得的BL-P1597量呈线性增加。4种青霉素类化合物(青霉素G、青霉烷酸、氨苄青霉素、羧苄青霉素)均无明显的干扰。本方法通过多种方法学考核,证明是灵敏、特异和可靠的。     

呋苄青霉素放射免疫测定

呋苄青霉素(BL-P1597)具有广谱抗菌活性,是治疗绿脓杆菌很有前途的药物,其测定方法用放射免疫学方法比用微生物学方法较好。作者用BSA 为载体,EDC_1为连接剂,合成了BL-P1597-BSA 免疫原。每个克分子BSA 约接6个克分子BL-P1597。用背部皮内多点法免疫家兔,7～9个月获得了抗BL-P1597血清,最终工作浓度:~*5兔为1:1800、~*3_(?)兔为1:3600,亲和常数K 分别为1.70×10~8M~(-1)、1.86×10~9M~(-1)。~8H-BL-P1597免疫原性良好。用微孔滤膜分离结合的与游离的标记物。竞争抑制曲线:灵敏度35毫微克,精密度4.80±1.82%,准确度7.37 1.40%。血清测定的变异系数:批内8.3～9.8%,批间11.46～14.75%。加入血清中的BL-P1597可定量回收(93～101%)。随待测含BL-P1597血清加入量的增加(40μl～60μl/管),测得的BL-P1597量呈线性增加。4种青霉素类化合物(青霉素G、青霉烷酸、氨苄青霉素、羧苄青霉素)均无明显的干扰。本方法通过多种方法学考核,证明是灵敏、特异和可靠的。     

人前列腺特异抗原分离纯化

本文报道了一种从人精液中提纯前列腺特异抗原的方法,本方法仅需Ａｆｆｉｇｅｌ－Ｂｌｕｅ ｇｅｌ柱和凝胶ＨＰＬＣ二步层析,即可行到均一的ＰＳＡ纯品。这是一个快速,有效的提纯方法。ＰＳＡ是前列腺癌的特异肿瘤标志物。