疫苗研究新策略—反向疫苗学

反向疫苗学是现代疫苗学研究的一种新的策略,随着生物信息学的不断发展,疫苗学的研究进入了一个新的时期,通过对基因组序列分析,来筛选重要保守抗原序列,从而鉴定具有一定免疫原性特征的蛋白质。这种方法可以提高疫苗筛选效率。因此,反向疫苗学对于传统方法无法制备的疫苗提供了一种新的研究方法和思路,具有十分重要的意义。本文就此作一综述。     

重组hIL-10质粒构建及其在毕赤酵母SMD1168中的表达和纯化

构建重组hIL-10真核表达载体,探索在毕赤酵母中的表达,为进一步研究hIL-10生物学功能及临床应用奠定基础。PCR扩增目的基因hIL-10cDNA,经EcoRI/XbaI双酶切后,将其亚克隆至同样双酶切的载体pPICZaA中,构建表达质粒pPICZaA-hIL-10;电转化法,将其转入毕赤酵母SMD1168,甲醇诱导Mut+型转化子基因表达;对目的蛋白进行检测及纯化。扩增出了目的基因hIL-10cDNA,重组质粒pPICZaA-hIL-10经酶切鉴定和序列测定正确;表达产物经SDS-PAGE分析在42.0kD处可见较浓染条带,Westernblotting分析可见特异条带;ELISA检测72h上清液中目的蛋白浓度可达1.973mg/L;纯化后目的蛋白纯度达67.0%。实现了重组hIL-10在毕赤酵母SMD1168中的成功表达和初步纯化。     

Zn~(2+)胁迫对黑水虻幼虫血淋巴能量物质影响的研究

为了研究Zn~(2+)胁迫对黑水虻Hermetia illucens L.幼虫能量物质的影响,本文在人工饲料中添加不同浓度(75、150、300、600、1200 mg/kg)的Zn~(2+)对黑水虻幼虫进行胁迫。利用紫外分光光度法测定了连续5代Zn~(2+)胁迫对黑水虻幼虫血淋巴中三大能量物质(总糖、脂肪及蛋白质)含量的影响,并计算了血淋巴中的热量值。结果表明,黑水虻幼虫血淋巴中的总糖、脂肪、蛋白质含量及热量值有相似的变化趋势:对各处理浓度而言,低浓度Zn~(2+)(75-300 mg/kg)处理使血淋巴中三大能量物质含量及热量值随处理浓度增加而升高;高浓度Zn~(2+)(600-1200 mg/kg)胁迫则随处理浓度增加而下降。在第1、3代黑水虻幼虫中,与对照相比,75-300mg/kg的Zn~(2+)处理浓度增加了三大能量物质含量及热量值,300 mg/kg处理浓度时达到最高,且与对照相比显著增加;而600-1200 mg/kg的高剂量Zn~(2+)处理浓度降低了三大能量物质含量及热量值。第5代幼虫血淋巴中三大能量物质含量及热量值均低于对照组,并低于同一处理浓度下的第1、3代幼虫血淋巴中的数值。因此,Zn~(2+)胁迫影响了黑水虻幼虫血淋巴中三大能量物质含量及热量值,并存在发育阶段特异性和世代累积效应。