用灵敏的血管紧张素Ⅰ放射免疫分析法测定血浆肾素酶活性

报导一个简单的血浆肾素活性(PRA)测定法,利用灵敏的放射免疫分析法(RIA)测定血管紧张素Ⅰ(ATⅠ)产生速率。抗ATI血清是用多聚左旋赖氨酸-琥珀酰-ATⅠ免疫家兔而获得,它和七种肽类激素的免疫学交叉反应是可以忽略的,其中与ATⅡ为低于0.2%。它的有效亲和常数K_(eff)高至4.4×10~(10)升/克分子。使用这个优质抗血清及~(125)Ⅰ标记ATⅠ,并结合双抗体分离技术,已建立了一个特异而灵敏的RIA。其检出极限是9.1±2.7微微克ATⅠ/管(均值±标准差),精密度是1.5±0.8%;测定保温后血浆中ATⅠ(136微微克量及3批连续测定中)批内变异系数C.V是2.5%,批间C.V.是15%。当确定PRA方法学时,研究了一些影响因素,并证实了血浆保温条件显著地影响ATⅠ的产生速率。我们的方法具有某些优点,例如:1)一旦血液被采集,立即加入作为抗凝剂和ATⅠ保护剂的Na_2·EDTA,8-羟基喹啉和二巯基丙醇;2)保温的血浆中加入1/10体积4MTris-HCl缓冲液(pH 7.4),使它维持在生理条件而又尽可能减少稀释;3)证明当保温期间ATⅠ的生成量线性范围可维持3～6小时以上;4)加至血浆中未标记ATⅠ的回收率达98.5%,表明在37℃3小时(PRA)及4℃3天(RIA)的整个保温期间,满意地抑制了蛋白水解酶的作用。为了测试PRA法的精密度,对二份混合血浆,在连续5批检定中进行复管测定,得均值是0.88毫微克AT Ⅰ/毫升/小时和2.35毫微克AT Ⅰ/毫升/小时,其批内C.V.分别是4.3%和1.7%,批间C.V.分别是20%和10%。     

人血浆中血管紧张素Ⅱ放射免疫直接测定法

应用优质抗血清、高比放射度~(125)I·ATII及双抗体分离技术,建立了直接测定0.5毫升人血浆中血管紧张系Ⅱ(ATII)的放射免疫分析法。竞争抑制曲线的最小检出量3.6±1.6微微克,精密度4.7±1.4%(28次的m±S.D.)。血浆测定的变异系数为批内7～14%,批间8.7～18%。加入血浆中的ATII可定量回收(97～117%)。随待测血浆加入量增大(0.1至1.5毫升/孵育管),测得ATII量线性增加。8种肽类激素、人血浆及使用的酶抑制剂未显示出明显的干扰。正常人普通饮食时外周静脉血浆ATII浓度:卧位1.5小时以上后26±10微微克/毫升(n=54),与24小时尿钠排出量呈负相关(p<0.01);立位2小时后46±22微微克/毫升(n=17)。低钠饮食或肌肉注射速尿引起血浆中ATII显著激发(p<0.01)。本法可灵敏、精密、特异地正确度量微量ATII,操作简单,每批可测标本数较大。本法的建立有助于各领域中涉及肾素——血管紧张素系统之临床或实验研究工作。     

人血浆亮脑啡肽样物质放射免疫测定法及其临床初步应用

本文报告了血浆亮脑啡肽样物质(LEK)的放射免疫测定法。用 TG-ECDI-LEK 背部皮内多点免疫家兔,获得高特异性的抗 LEK 血清,最小检出量5pg,多种肽类及吗啡、纳洛酮对此均无明显干扰。血浆迅速酸化及抑肽酶等能有效防止脑啡肽(EK)的降解。血浆 EK 可被 XAD-2树脂吸附和用水合甲醇洗脱。本法测定人血浆 LEK 为127.9±5.4pg/ml(m±S.E.M,n=61).作者观察到胰岛素低血糖休克后血浆 LEK 增加,嗜铬细胞瘤患者血 LEK 增加,提示肾上腺體质可能是它的来源之一。     

高亲和力抗血管紧张素Ⅱ抗血清的制备——五种免疫原的制备及其免疫效果的比较

为了提高放射免疫分析法(RIA)的灵敏度,达到度量人外周血浆中血管紧张素Ⅱ(ATII)的要求,必需采用亲和力特别高的特异性抗ATII 抗血清。我们使用不同的载体和结合方法,制备了五种ATIIa 免疫原,以提高其抗原性。它们是:1)聚乙烯吡咯酮吸附血管紧张素II 酰胺(ATIIa);2)碳二亚胺缩合兔血清白蛋白与ATIIa;3)戊二醛(GDA)结合牛血清白蛋白(BSA)与ATIIa;4)GDA 结合多聚赖氨酸(PL)与ATIIa;5)碳二亚胺缩合琥珀酰化多聚赖氨酸(PL-Succ)与ATIIa。在分组免疫家兔(皮内多点或多途径注射)后,用生物鉴定、被动血球凝集试验和放射免疫稀释曲线法检测及跟踪抗血清的抗ATII 效价。并用RIA 法以Scatchard 图求亲和常数K_(?)统计显示在组间存在显著差别,以BSA-GDA-ATIIa 及PL-Succ-ATIIa 效果为佳。在3～5个月内成功地获得了K_a>10~(10)升/克分子,适用于ATII 的放射免疫测定的一些抗血清。其中之一已经满意地用于建立一个特异、灵敏的RIA,可以直接测定人体外周血中低浓度的ATII。另一些也有相似的能力。对工作中涉及一些问题,如免疫原制备、影响抗血清质量的因素以及抗ATII 检测方法等,作了初步的比较和讨论。本试验结果,从抗原消耗量、抗体产生速度、成功率及抗血清的效价和亲和力等方面,看来较某些报告有优越之处。     

高钙摄对易卒中自发性高血压大鼠的血压和细胞内pH,Na^＋—H^＋交换活…

本文观察到易卒中自发性高血压接受高钙（３％）饮食６周后抑制了血压上升,胞浆游离钙浓度降低和血浆钙高,细胞内ＰＨ也产生改变,接近正常对照的ＷＤＹ大鼠。本文对细胞内ＰＨ,Ｎａ＾＋－Ｈ＾＋交换,胞浆游离钙浓度与血压的关系进行了讨论。     

原发性高血压和卒中患者的正常血压子女白细胞钠钾含量的观察

本文报道对原发性高血压患者子女38例、卒中患者子女14例及健康家族子女23例白细胞钠钾含量测定的结果。三组均为正常血压者,高血压患者子女组的白细胞钠含量较低、钾含量较高,且在不同性别、不同高血压家族史间比较,亦存在差别。卒中患者子女组的白细胞钠钾含量无显著变化,虽他们的舒张压显著高于对照组。本文就上述结果产生的可能机制及其与高血压、卒中发病的关系进行了讨论。     

人血浆中血管紧张素Ⅱ放射免疫直接测定法

应用优质抗血清、高比放射度~(125)Ⅰ·ATII及双抗体分离技术,建立了直接测定0.5毫升人血浆中血管紧张素Ⅱ(ATII)的放射免疫分析法。竞争抑制曲线的最小检出量3.6±1.6微微克,精密度4.74±1.4%(28次的m±S.D.)。血浆测定的变异系数为批内7～14%,批间8.7～18%。加入血浆中的ATII可定量回收(97～117%)。随待测血浆加入量增大(0.1至1.5毫升/孵育管),测得ATII量线性增加。8种肽类激素、人血浆及使用的酶抑制剂未显示出明显的干扰。正常人普通饮食时外周静脉血浆ATII浓度:卧位1.5小时以上后26±10微微克/毫升(n=54),与24小时尿钠排出量呈负相关(p<0.01);立位2小时后464±22微微克/毫升(n=17)。低钠饮食或肌肉注射速尿引起血浆中ATII显著激发(p<0.01)。本法可灵敏、精密、特异地正确度量微量ATII,操作简单,每批可测标本数较大。本法的建立有助于各领域中涉及肾素——血管紧张素系统之临床或实验研究工作。     

高钙摄取对易卒中自发性高血压大鼠的血压和细胞内pH，Na~＋－H~＋交换活性的

本文观察到易卒中自发性高血压大鼠接受高钙（３％）饮食６周后抑制了血压上升，胞浆游离钙浓度降低和血浆钙升高，细胞内ｐＨ也产生改变，接近正常对照的ＷＫＹ大鼠。本文对细胞内ｐＨ，Ｎａ＋－Ｈ＋交换，胞浆游离钙浓度与血压的关系进行了讨论。