关于蚯蚓的实验观察课

这一节课是在初二动物学中,学习了蠕形动物,蚯蚓的外部形态和内部构造两节课后,紧接着进行的。目的在使学生巩固蚯蚓的形态构造的知识,并在这一基础上使学生了解动物体的构造是和它的生活条件统一的,从而体现蠕形动物的构造比腔肠动物既复杂,又高等;并为以后讲节肢动物的进化作好准备。课前准备好活蚯蚓十几条,清水一杯,玻片六张,预先浸在清水内,用酒精或高粱酒慢慢麻醉,全麻醉的蚯蚓6—7条,解剖刀、剪或剃胡刀片,麻醉后用10%蟻醛固定的大蚯蚓标本6个,放大镜6个,分学生为6个组。     

幽门螺杆菌napA基因在乳酸菌中的表达及免疫原性分析

为在乳酸菌中表达幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）中性粒细胞激活蛋白(NAP),口服免疫小鼠后检测其免疫原性。在实验中利用了分子克隆技术构建携带nap基因的重组原核表达质粒pNICE:secnap,将重组质粒转化乳酸菌NZ9000株,筛选鉴定阳性菌落,诱导表达的NAP蛋白用SDSPAGE和Western blot进行鉴定。将雌性ICR（CV级）小鼠随机分为4组,分别用PBS、携带空质粒的乳酸菌、携带pNICE:secnap的乳酸菌、灭活的H.pylori 灌胃。免疫7次后检测其特异性IgG和IgA的产生。成功扩增了nap基因并构建了重组原核表达质粒pNICE:secnap,转化乳酸菌NZ9000后经nisin诱导可表达Mr约17kDa的重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白量的9.5%,表达的蛋白能与兔抗H.pylori 血清特异性反应,具有良好的免疫原性。携带pNICE:secnap质粒的乳酸菌刺激产生的IgG水平明显高于携带空质粒组,与灭活H.pylori组没有明显的差异,但其刺激产生的IgA水平明显高于其他组。以上结果说明表达NAP蛋白的乳酸菌口服免疫小鼠后,能够刺激小鼠产生特异的IgG和IgA,对幽门螺杆菌疫苗的研究开发具有理论意义。为乳酸菌作为抗原递送载体的研究和H.pylori口服疫苗的开发提供了一定的实验基础。     

怎样在制作堆肥活动中贯彻基本生产技术教育

首先从学生在课堂上所得到的知识来考虑如何在制作堆肥活动中贯彻基本生产技术教育,是非常必要的.一年二期的学生,已经学过肥料的种类及肥料对植物的生长关系.基于学生已有知识,采用谈话的方式,系统的加深和巩固肥料对增产的意义,从而领导学生完成制作堆肥的工作. 活动开始,向学生说明今天我们的活动是制作堆肥,接着提问:“我们从肥料的种类来说,堆肥应属于什么肥料?”学生回答:“有机肥料.”紧接再问:“有机肥料能直接为植物体吸收吧?”学生应用已获得的知识很容易的回答:“不能,有机物需要成为腐植质,然后再经过变化,成为无机盐才能被植物吸收.”于是教师总结学生上述答案,向大家讲:有机物要能作为植物体生长发育所需要的养料,必须是由有机物(动植物的遗体)变为腐植质,再变化为无机盐方可被吸收.     

重组肿瘤坏死因子-α衍生物的制备及聚乙二醇修饰

应用搭桥PCR技术,将肿瘤坏死因子-α基因的前4位氨基酸的编码序列删除,对hTNF-α的第8/9/10/29/31/157位氨基酸的密码子进行定点突变,将突变后的cDNA插入到pBV220载体中构建重组质粒pBV220-tnf-αD4。将重组质粒转化大肠杆菌DH5α,筛选获得了高效表达TNF-αD4突变体的工程菌,表达的重组蛋白约占菌体蛋白总量的45%左右,经硫酸铵沉淀和阳离子交换层析纯化得到纯度达90%以上的重组目的蛋白,比活性达到8×107。用单甲氧基聚乙二醇-丁醛（mPEG-ButyrALD）对TNF-αD4进行修饰,经阳离子交换层析纯化得到纯的mPEG-TNF-αD4,纯度达85%以上,比活性达到8.6 ×107,系统毒性也有了明显的降低。此项工作通过应用PEG修饰肿瘤坏死因子-α,为降低其毒性,增加其活性进行了有益的尝试,为其进一步研究与开发奠定了基础。