荧光定量PCR检测不同状态下白念珠菌CPH1、EFG1基因的表达

目的 检测转录因子CPH1和EFG1基因在游离态及生物膜态呼吸道白念珠菌临床分离株的表达差异,探讨其在生物膜形成过程中的作用.方法 选取10株白念珠菌临床分离株,分别提取游离态及生物膜态白念珠菌总RNA,用荧光定量PCR的方法测定两种状态下CPH1和EFG1基因的表达,用△△Ct的方法计算其相对表达量.结果 白念珠菌生物膜态转录因子EFG1的表达是游离态表达水平的1.42 ～7.14倍,差异有显著意义(P＜0.05),而转录因子CPH1的表达有8株菌生物膜态较游离态增高,1株降低,1株无明显变化,差异无显著意义(P＞0.05).结论 白念珠临床株转录因子CPH1和EFG1参与生物膜形成的调控,并需在体内实验中进一步研究.     

复方明矾散对妇科阴道炎病原菌的抑菌作用研究

目的 探讨复方明矾散对妇科阴道炎病原菌的抑菌作用。方法 从临床妇科阴道炎患者分离病原菌为受试菌,采用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）M27-A大量肉汤稀释法和琼脂稀释法分别检测复方明矾散对140株受试菌的最低抑菌浓度（MIC）。结果 总MIC范围：0．07～10mg／ml。念珠菌MIC范围：0．07～1．25mg／ml,MIC50 0．30mg／ml,MIC90：0．61mg／ml。结论 复方明矾散对所有受试菌均有不同程度的抑菌作用,对念珠菌的效果最好。     

医院血培养的病原菌分布及耐药性分析

目的 了解我院2006年至2008年血培养中病原菌的阳性率、分布及其对药物的敏感情况,为临床治疗菌血症提供用药依据.方法 采用自动血培养仪对血培养瓶进行连续培养监测,全自动微生物分析系统对血标本中分离的病原菌进行鉴定和药物敏感试验.结果 1002份血培养标本分离出病原菌103株,阳性率10.3%,其中革兰阴性菌58株,占56.3%;革兰阳性菌32株,占31.9%;真菌10株,占9.7%.革兰阴性菌中,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对氨苄西林的耐药率最高,分别为92.7%和92.3%.革兰阳性菌中,金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素耐药率达100%,肠球菌对常用抗生素呈高度耐药,未发现葡萄球菌对万古霉素耐药,但有9.1%的肠球菌对万古霉素呈中介.结论 目前我院血培养分离的病原菌分布较广,大肠埃希菌和葡萄球菌是菌血症和(或)败血症的主要病原菌;药敏结果提示检出菌耐药性严重且广谱耐药,及时准确的血培养结果能为临床合理选择抗菌药物提供重要依据.     

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌耐药机制的研究

目的探讨铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生紊的耐药机制。方法应用铜绿假单胞菌外膜蛋白SDS-PAGE图谱、凝胶分光光度扫描分析方法和三维试验分析亚胺培南耐药铜绿假单胞菌外膜蛋白和β-内酰胺酶类型。结果耐药组OprD2相对含量显著低于敏感组。耐药组产生了较高活性的AmpC酶。结论铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制可能是OprD2的缺失和AmpC酶共同作用的结果。     

铜绿假单胞菌VIM-2型金属β-内酰胺酶基因的克隆及原核表达重组质粒的构建

目的扩增铜绿假单胞菌VIM-2型金属β-内酰胺酶基因,导入载体pMD18-T和pGEX-4T-1构建重组质粒pMD18-T／VIM-2和pGEX-4T-1／VIM-2。方法采用PCR技术从铜绿假单胞菌扩增VIM-2基因,先将其亚克隆人pMO18-T载体后测定核苷酸序列。再将VIM-2基因克隆至表达载体pGEX-4T-1,并转化大肠埃希菌JM109。用限制性酶切分析、PCR、序列分析等进行重组质粒鉴定。结果扩增出801bp的VIM-2基因,构建重组质粒pMD18-T／VIM-2和pGEX-4T-1／VIM-2。结论成功扩增801bp的VIM-2基因,该基因与国外同类酶的核苷酸同源性100％。重组质粒pGEX-4T-1／VIM-2构建成功。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药性和金属酶研究

目的了解广州市某医院烧伤科病房亚胺培南耐药铜绿似单胞菌的耐药谱特点及产生金属酶情况。方法采用Kirby—Bauer法进行药物敏感性试验,采用2-巯基乙醇纸片协同试验筛选产金属酶菌株,对金属酶基因进行聚合酶链反应（PCR）和序列分析。结果48株亚胺培南耐药菌株均为多重耐药菌,对临床常用的多种抗菌药物耐药,敏感率由高到低依次为CIP、TOB、AMK、GEN和FEP。2-巯基乙醇纸片协同试验阳性6株,6株菌金属酶引物VIM-2扩增阳性,经测序证实为VIM-2型金属酶。结论该组亚胺培南耐药铜绿假单胞菌为多重耐药菌,产VIM-2型金属酶。