基于基因组编辑技术的大片段克隆新策略

基因组大片段克隆技术是合成生物学研究领域关键的使能技术。传统的大片段克隆技术获取目的大片段的手段存在各种缺陷,比如随机建库克隆需要依靠高通量筛选;PCR难以扩增10 kb以上片段,从小片段拼装费时费力且突变率高;基于限制性酶切连接难以找到片段两端适宜的限制性内切酶酶切位点。最近全基因组合成等前沿研究创造了全新的高性能大片段克隆方法,比如CRISPR/cas9系统中cas9可识别并切割20 bp核酸序列解决了识别位点设计难题,可用来获取任意目的基因片段;组合Gibson或者酵母偶联重组技术组装技术,可高效克隆大片段基因。本文将分类介绍基因组大片段克隆技术,并提出适用不同尺度大小基因克隆的技术选择参考标准。     

新课程理念在初中生物课堂教学实施中的误区与对策

<正>随着新课程改革的不断深入,初中生物教师的教学理念、教学行为以及学生的学习方式等方面均发生了重大的变化,课堂教学也变得更加开放、灵活了,学生自主学习的机会更多了,课堂教学的有效性提高了。但是,许多教师仍没有适应新课程,在生物课堂教学中常常出现以下误区。