DAB诱发大白鼠肝癌过程中细胞质膜上酶变化的观察

本实验以二甲基氨基偶氮苯（ＤＡＢ）诱发大白鼠肝癌的动物模型为材料,观察了在诱癌过程中和肝癌形成后大白鼠肝细胞质膜上几种酶活性的变化,用不连续蔗糖密度梯度离心法制备肝细胞质膜,分光光度法对酶活性进行定量测定。实验结果表明,在诱无病癌过程中,肝细胞质膜上５′－ＡＭＰａｓｅ活性上降,γ－ＧＴａｓｅ活性显著升高。γ－ＧＴａｓｅ活性升高幅度与病理变化正相关,并且在诱癌早期就能表现出来。     

DAB诱发大白鼠肝癌过程中细胞质膜蛋白质双向电泳的研究

本实验以二甲基氨基偶氮苯（ＤＡＢ）诱发大白鼠肝癌的动物模型为材料,用电泳方法观察了在诱癌过程中中和肝癌形成后大白鼠肝细胞质膜上蛋白质的变化。肝细胞质膜蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图谱显示：在诱癌４周,１６周的肝细胞和肝细胞癌的细胞质膜蛋白与正常肝比较没有显著差异,胆管癌细胞质膜蛋白的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图谱与正常肝细胞比较,在１５．８ＫＤ～６９．２ＫＤ的带群中新出现一条深染的蛋白带。用双向电泳法方法,     

人脾DNA拓扑异构酶Ⅰ的提纯及其性质的研究

 经三个步骤从人脾提纯了拓扑酶Ⅰ。SDS-PAGE和等电聚焦均显示单一蛋白带。分子量77kD,pI7.3。新生霉素和香豆霉素A_1不抑制酶活性。本实验表明,反应最适K~(+)或Na~(+)浓度为180mmol/L。反应活性不要求Mg~(2+),但5mmol/L存在时,活性增加90％。在pH5.0～9.0均有活性,但在7.5～8.0时活性较大。30℃放置24小时或50℃处理30分钟活性基本丧失。最适反应温度为37℃。对-氯汞苯甲酸强烈抑制酶活性。     

大白鼠DNA拓扑异构酶Ⅰ生物学性质的研究

对大白鼠组织作DNA拓扑弄构酶Ⅰ(拓扑酶Ⅰ)活力测定,见酶活力出现在胚胎早期,在胚胎发育过程及出生后不同年龄期,酶活力基本稳定;几种成年大鼠组织的酶活力彼此无显著差异;肝细胞再生及癌变,酶活力亦无显著变化。     

考马斯亮蓝—银染色法——一种更灵敏的凝胶蛋白质染色法

我们曾报道一种重复性好而灵敏的电泳凝胶蛋白质染色法。其后发现银染色法虽然灵敏,但有一定的选择性,某些蛋白不易被银染色着色。若将考马斯亮蓝染色与银染色相结合,则可弥补彼此弱点,而且可提高灵敏度,是一种较为理想的凝胶蛋白质染色法。一、材料与方法(一)试剂丙烯酰胺、双丙烯酰胺、SDS 为国产品,均重结晶后使用;考马斯亮蓝 G—250及戊二醛(Fluka 产品);硝酸银 GR 级(西安化学试剂厂产品);Ampholine(LKB 产品);尿素     

一种改良的蛋白质双向电泳银染色法

Switzer等人于1979年发展了蛋白质的银染色法.由于其灵敏度远远高于传统的考马斯亮蓝染色法,结合蛋白质的双向电泳技术,可获得分辨率极高的分析系统,已日益成为生化分析的重要工具.许多生化工作者对银染色法作了改良.但是,其中某些方法我们难以重复,或底色过深,假象多,或操作步骤过于繁琐.我们结合前人经验,建立了一个在本实验室条件下易行、价廉、重复性好的改良方法.     

真核细胞的活性基因

基因表达调控在分子生物学的研究中占中心地位。探索活性基因的结构及性质是揭露基因表达调控的必由之路。近年来的研究表明,真核细胞活性基因具有对 DNase (?)敏感及甲基化程度低的特征。     

DNA拓扑学与拓扑异构酶

生物体内DNA的拓扑态对其生理功能具有重要意义。本文简述DNA拓扑学的基本知识及拓扑异构酶的概况。