阿托伐他汀预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠心室重构、炎症反应和氧化应激的影响

目的:研究阿托伐他汀预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠心室重构、炎症反应和氧化应激的影响。方法:选取90只SD级大鼠进行研究,将其随机分成假手术组、缺血再灌注组、阿托伐他汀组,每组30只。假手术组与缺血再灌注组大鼠予以生理盐水(5 m L/d)连续灌胃7d处理,阿托伐他汀组予以阿托伐他汀20 mg/(kg·d)连续灌胃7 d,上述干预结束后,缺血再灌注组与阿托伐他汀组大鼠通过阻断大鼠冠状动脉左前降支的方式建立心肌缺血再灌注损伤模型。比较三组大鼠心室重构指标水平、炎症反应以及氧化应激相关指标水平。结果:缺血再灌注组、阿托伐他汀组大鼠的左室相对重量、右室相对重量、室间隔厚度、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氧酶(LDH)水平均高于假手术组,且阿托伐他汀组大鼠上述指标均低于缺血再灌注组(均P<0.05);缺血再灌注组、阿托伐他汀组大鼠白介素-10(IL-10)、超氧化物气化酶(SOD)水平低于假手术组,且阿托伐他汀组大鼠IL-10、SOD水平高于缺血再灌注组(均P<0.05)。结论:阿托伐他汀预处理可有效预防心肌缺血再灌注损伤大鼠心室重构,同时可在一定程度上改善大鼠的炎症反应和氧化应激反应。     

抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体的构建和表达

构建和表达抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。 采用PCR和overlap PCR方法构建抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用Western blot和分子排阻层析鉴定纯化产物;采用免疫荧光法、放射免疫分析法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。DNA序列测定结果表明：抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体已构建成功,表达可溶性产物的产量达2mg/L以上,纯化产物中二聚体的比例达90%,具有与Jurkat（CD3⁺）和K562/A02细胞（Pgp⁺）结合的活性,与抗CD3 ScFv及抗Pgp ScFv的亲合常数相当。成功地构建了抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体,并获得高效表达,表达产物具有与相应二个靶抗原结合的活性。     

瑞舒伐他汀预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠自噬和凋亡的影响及机制研究

目的:探讨瑞舒伐他汀预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠自噬因子和凋亡相关基因的影响及作用机制。方法:将60只SD级大鼠纳入研究,遵循随机数字表法分成假手术组、模型组以及预处理组,每组20只。模型组以及预处理组大鼠均制备MIRI模型,假手术组按照相同的方式开胸,仅穿线不进行冠状动脉的结扎。模型制备前7d,预处理组予以瑞舒伐他汀20 mg/(kg·d)灌胃处理,假手术组以及模型组大鼠则予以生理盐水5 m L/d处理。比较三组大鼠心肌组织凋亡率、心肌梗死面积、左心室血流动力学参数、自噬因子P62、Beclin-1蛋白表达水平以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Cyt C蛋白表达水平。结果:预处理组及模型组大鼠的心肌组织凋亡率以及心肌梗死面积均高于假手术组,但预处理组低于模型组(均P<0.05)。预处理组及模型组大鼠的左心室舒张末压(LVEDP)均高于假手术组,但预处理组低于模型组(均P<0.05);预处理组及模型组大鼠的左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax)低于假手术组,但预处理组高于模型组(均P<0.05)。预处理组及模型组大鼠的P62、Beclin-1蛋白表达水平均高于假手术组,但预处理组低于模型组(均P<0.05)。预处理组及模型组大鼠Bcl-2 m RNA表达水平低于假手术组,但预处理组高于模型组(均P<0.05);预处理组及模型组大鼠Bax m RNA表达水平及Cyt C蛋白表达水平高于假手术组,但预处理组低于模型组(均P<0.05)。结论:瑞舒伐他汀预处理可显著减轻MIRI大鼠心肌组织受损程度,其主要作用机制可能与瑞舒伐他汀有效抑制心肌细胞自噬因子表达以及调控凋亡相关基因表达有关。     

氯通道在葛根素注射液致溶血反应中的作用

目的：观察阻断和激活氯通道对葛根素注射液致家兔溶血反应的影响,探讨氯通道在葛根素注射液溶血反应中的作用。方法：将不同浓度的葛根素注射液（0.75、1.5、3、6、12 mg/ml）与家兔红细胞悬液共孵育6 h,使用细胞图像记录系统观测葛根素注射液是否诱导红细胞溶血,酶标仪、流式细胞仪检测红细胞溶血率,并观测激活和阻断氯通道对葛根素注射液溶血作用的影响。结果：葛根素注射液可引起家兔红细胞体外溶血,在所观察的1.5 mg/ml~12 mg/ml范围内,溶血效应呈浓度依赖性增强（n=3,P<0.01）。氯通道阻断剂Tamoxifen （20 μmol/L）、ATP （10 mmol/L）可有效抑制葛根素注射液的溶血作用（n=3~5,P<0.01）;而使用低浓度ATP （50 μmol/L）激活氯通道,则显著增强葛根素注射液的溶血作用（n=4,P<0.01）。结论：葛根素注射液的体外溶血效应呈浓度依赖性,氯通道激活与葛根素注射液诱导的溶血反应密切相关。