4-N，N-二甲胺基偶氮苯-4′-异硫氰酸酯(DABITC)用于多肽微量氨基酸顺序的测定

前文曾介绍一种高灵敏度DABITC方法,今已成功地应用于微量多肽激素的氨基酸顺序测定,所取样品为猪胰岛素-B链、促黄体生成素释放激素及未知顺序的蝮蛇毒舒缓激肽增强因子等。样品量仅为8—30毫微克分子(nmol)。一、实验部分 1.材料和试剂猪胰岛素-B链,促黄体生成素释放激素(LRH)分别由本所胰岛素组和东风厂提供,蝮蛇毒舒缓激肽增强因子,由本实验室自制。DABITC试剂本所东风厂产品,化学试剂和溶剂的纯度,均为分析纯,并经重新处理聚酰胺薄膜为黄岩实验化工厂出品。 2.实验操作多肽激素(8—30nmol)置于1×5厘米刻度离心管,使溶于100微升50％v/v吡啶溶液,用50微升DABITC溶液(0.6毫克DABITC溶于260微升吡啶溶液)充氮气1分钟。在52℃水浴保温