香菇菌丝原生质体分离与再生条件的研究

在25-26℃下培养5-6天的菌丝体,以0.8mol/L甘露醇作为渗透压稳定剂,用1.5%溶璧酶液酶解1.5-2小时,所得原生质体的产量较高,最高可达4×10⁷个/ml以上。上述条件分离的原生质体,再生率也较高。原生质体再生的温度以26℃为最佳。不同的再生培养基明显地影响原生质体的再生率。在完全培养基中加入麸皮浸出液可显著提高香菇菌丝原生质体的再生率,其中,以添加5% 麸皮浸出液的效果最好。显微观察结果表明,在液体培养集中,香菇菌丝原生质体的再生是不同步的。一般要培养20小时以后才能见到出芽,而且原生质体的再生形式也是多种所样的。     

一种溶高等担子菌细胞壁酶的制备

我们试图以高等担子菌（主要是食用菌）为 材料进行原生质体融合,以期获得新型杂种菌 株。我们先后采用过制备植物原生质体的纤维 素酶（上海东风生化试剂厂生产和从日本进 口）、制备酵母菌原生质体的蜗牛酶（来源于中 国科学院生物物理研究所）、和制备细菌原生质 体的溶菌酶（上海禽蛋二厂生产）单独或混合酶 解担子菌菌丝,均难以获得担子菌原生质体。其 原因可能是它们的细胞壁的成分不同所致^[1]     

一种溶高等担子菌细胞壁酶的制备

我们试图以高等担子菌(主要是食用菌)为材料进行原生质体融合,以期获得新型杂种菌株。我们先后采用过制备植物原生质体的纤维素酶(上海东风生化试剂厂生产和从日本进口)、制备酵母菌原生质体的蜗牛酶(来源于中国科学院生物物理研究所)、和制备细菌原生质体的溶菌酶(上海禽蛋二厂生产)单独或混合酶解担子菌菌丝,均难以获得担子菌原生质体。其     

凤尾菇和桃红平菇种间原生质体电融合获杂种菌株

以有自然标记的双核风尾菇(Pleurotus sajor-caju)和桃红平菇(P．Rhodophyllus)为出发菌株,以它们携带营养缺陷型标记的单孢菌株为直接亲本,采用BAEKON 2 000基因转移仪进行侧耳属种间原生质体电融合,成功地获得若干株融合体,其中有一株编号为F57的融台体已培育出子实体。比较了融合体F57与亲本的形态、生理、生化和遗传等性状,结果证实,融合体F57是一株新的种间杂种菌株。     

草菇菌丝原生质体的分离与再生

在适当的酶解条件下,用溶壁酶(Lywallzyme)酶解新鲜的草菇菌丝获得了大量的原生质体。分离出来的草菇原生质体形态正常,质膜清楚,有活力。原生质体通过悬滴培养和浅层培养均能再生成菌丝,其中,悬滴培养的再生频率为2—5%,浅层培养的再生频率为7—10%。