用膨化柱填料的方法从红藻中规模分离纯化R-藻红蛋白(英)

以Phenyl_sepharose作为柱填料 ,用streamline柱层析技术从红藻 (Palmariapalmata (Lannaeus)Kuntze)中规模分离捕光色素蛋白———R_藻红蛋白。由于不是传统的从层析柱上方进样 ,而是用泵将样品从streamline层析柱的下方加样 (从下至上 ) ,因而解决了用一般层析柱分离R_藻红蛋白时海藻抽提液中大量的粘性多糖堵塞层析柱的难题。用P .palmata粗提液上样后 ,分别用 0 .2mol/L、0 .1mol/L和 0 .0 5mol/L的 (NH4) 2 SO4溶液从相反的方向 (即从上到下 )洗脱层析柱 ,发现这些洗脱液中的藻红蛋白纯度已经较高。然后将洗脱液透析去盐 ,用阴离子交换柱层析 (Q_sepharose)进一步纯化。经过这两次柱层析后 ,R_藻红蛋白的纯度 (OD565/OD2 80 )超过 3.5 ,高于一般认可的R_藻红蛋白的纯度标准 3.2 ;产率为每克冷冻P .palmata可纯化 0 .12 2mg高纯度的R_藻红蛋白 ,比使用一般分离方法的产率要高 10倍。这些结果表明 ,使用本文报道的方法纯化藻红蛋白 ,将会使作为生化检测试剂的藻红蛋白市场价格大幅度下降。     

用膨化柱填料的方法从红藻中规模分离纯化R-藻红蛋白

以Phenyl-sepharose作为柱填料,用streamline柱层析技术从红藻(Palmaria palmata (Lannaeus) Kuntze)中规模分离捕光色素蛋白--R-藻红蛋白.由于不是传统的从层析柱上方进样,而是用泵将样品从streamline层析柱的下方加样(从下至上),因而解决了用一般层析柱分离R-藻红蛋白时海藻抽提液中大量的粘性多糖堵塞层析柱的难题.用P.palmata粗提液上样后,分别用0.2 mol/L、 0.1 mol/L和0.05 mol/L的(NH4)2SO4溶液从相反的方向(即从上到下)洗脱层析柱,发现这些洗脱液中的藻红蛋白纯度已经较高.然后将洗脱液透析去盐,用阴离子交换柱层析(Q-sepharose)进一步纯化.经过这两次柱层析后,R-藻红蛋白的纯度(OD565/OD280)超过3.5,高于一般认可的R-藻红蛋白的纯度标准3.2;产率为每克冷冻P.palmata可纯化0.122 mg高纯度的R-藻红蛋白,比使用一般分离方法的产率要高10倍.这些结果表明,使用本文报道的方法纯化藻红蛋白,将会使作为生化检测试剂的藻红蛋白市场价格大幅度下降.     

对虾的慢与快牵张感受器的放电型式与镁离子浓度的关系

对虾的慢适应和快适应感受器的放电型式可因环境中 Mg~( )浓度的改变而发生转变:在用蔗糖代替全部 Mg~( )的海水(无镁海水)中,当感受器肌肉受到持续性牵拉时,两种感受器都发出持续性节律放电,即快感受器也给出了慢适应型放电;反之,在 Mg~( )浓度加倍的海水(高镁海水)中,两者都只在感受器肌肉受到牵拉的瞬时给出短暂的放电,即慢感受器也给出了快适应型放电。这种放电型式的转变只有当无镁或高镁海水接触感受器细胞体时才出现。在正常海水中,10~(-3)M 的γ-氨基丁酸(GABA)即可完全抑制由牵拉引起的对虾牵张感受器的放电,但在无镁海水中,必需10~(-2)M GABA 方能达到同样的抑制效果。若在无镁亦无钙海水中,即使用1M 的 GABA 亦不能抑制感受器的牵拉放电。不仅如此,在这种海水中抑制神经对感受器细胞放电的抑制作用也消失。     

用膨化柱填料的方法从红藻中规模分离纯化R—藻红蛋白

以Phenyl-sepharose作为柱填料,用streamline柱层析技术从红藻（Palmaria palmata(Lannaeus)Kuntze）中规模分离捕光色素蛋白-R-藻红蛋白。由于不是传统的从层析柱上方进样,而是用泵将样品从streamline层析柱的下方加样（从下至上）,因而解决了用一般层析柱分离R-藻红蛋白时海藻抽提液中大量的粘性多糖堵塞层析柱的难题。用P.palmata粗提液上样后,分别用0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的（NH4）2SO4溶液从相反的方向（即从上到下）洗脱层析柱,发现这些洗脱液中的藻红蛋白纯度已经较高。然后将洗脱液透析去盐,用阴离子交换柱层析（Q-sepharose）进一步纯化。经过这两次柱层析后,R-藻红蛋白的纯度（OD565/OD280）超过3.5,高于一般认可的R-藻红蛋白的纯度标准3.2;产率为每克冷冻P.palmata可纯化0.122mg高纯度的R-藻红蛋白,比使用一般分离方法的产率要高10倍,这些结果表明,使用本报道的方法纯化藻红蛋白,将会使作为生化检测试剂的藻红蛋白市场价格大幅度下降。