紫苏DGAT1基因克隆及四尾栅藻表达载体构建

利用RNAiso Plus试剂盒提取紫苏总RNA,以其为模板采用RT-PCR方法扩增出紫苏DGAT1基因的cDNA编码区序列并构建克隆载体pMD-DGAT1,再将克隆载体pMD-DGAT1和pBI121空载体进行Xba I和BamH I双酶切,连接目的片段构建表达载体pBI121-DGAT1。结果显示,克隆得到目的片段长度为1 657 bp,与GenBank中紫苏DGAT1基因序列的最大同源性为97%,所构建表达载体pBI121-DGAT1双酶切得到的两条片段长度与连接前一致。结果表明,成功转化四尾栅藻并得到表达,转化后四尾栅藻的油脂含量较转化前提高近1倍。     

亚麻直接分化再生系统的初步建立

在亚麻愈伤分化再生系统基础上对诱导培养基和生根培养基加以改良。创立了一套新的亚麻再生系统———直接分化再生系统。该系统使外植体不经过愈伤组织阶段直接获得分化芽,且在个别品种上绿苗诱导率最高达242.11%,移栽成活率达60%以上,这为纤维亚麻遗传转化提供了良好的受体系统。     

应用直接分化再生系统进行亚麻转基因技术的研究

采用直接分化再生系统为转化受体系统,通过农杆菌介导将GUS基因导入亚麻品种双亚五号和双亚七号的下胚轴段中,经过不到两个月的时间即获得再生苗.GUS检测显示,转化率分别达到9.1%(双亚五号)和4.45%(双亚七号),大大缩短遗传转化所需时间,为亚麻转基因育种提供了一条快捷的途径.     

苯酚降解工程菌Bacillus subtilis dqly-2的构建

目的:构建苯酚降解工程菌Bacillus Subtilis dqly-2.方法:选取2株苯酚降解菌,分别为铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa zllf4和枯草芽孢杆菌Bacillus Subtilis BHf3-4,体外扩增Pseudomonas aeruginosa zllf4的邻苯二酚2,3双加氧酶基因(SYJ),并将此基因转入Bacillus Subtilis BHf3-4中,构建基因工程菌,并对野生菌和工程菌降解能力进行比较.结果:作用96h后,工程菌苯酚降解率为96.18％,显著高于野生菌的84.78％.结论:成功构建高效苯酚降解基因工程菌.     

大庆湖藻的分离、鉴定和高油脂含量筛选

目的:对大庆6个典型湖泊的湖藻进行分离和鉴定,筛选出高油脂含量的大庆湖藻。方法:采用吸管分离法、稀释平板分离法和平板划线法共分离出8株硅藻和5株绿藻,并利用化学方法对所分离的湖藻进行油脂含量测定。结果:所分离13株藻种名称和油脂含量分别为GF-1四尾栅藻9.3%、GF-2鼓藻2.7%、GF-3布朗葡萄藻20.9%、GF-4布纹藻32.6%、HY-1卵囊藻5.5%、HY-2舟形藻37.1%、HY-3二形栅藻6.4%、YL-1舟形藻32.2%、YL-2刀形布纹藻38.3%、YL-3舟形藻34.5%、HQ-1脆杆藻36.6%、QY-1盒形藻33.8%、CY-1脆杆藻29.4%。结论:筛选出YL-2、HY-2和HQ-1三株高油脂含量的大庆湖藻。     

高效脱硫诱变菌株降硫性能的研究

目的:筛选具有脱硫功能的细菌,为采用生物法脱硫奠定理论基础.方法:从大庆石化废水曝气池中采集5个活性污泥样本,经过富集培养、分离、纯化获得具有典型特征的菌株,采用碘量法对这些菌株进行降硫能力测定,从中选择降硫效率较高的菌株进行诱变.结果:在30℃、转速160r/min的条件下,Z39ay1菌株的最佳生长pH值为7.0,对数生长期为12～32h,当硫离子为102.24mg/L时,该菌株对硫化物的降解率达42.60％,将其置于2000Gry的60Co射线下照射,从存活菌细胞中进行筛选获得1株诱变菌株Z39a,当硫离子浓度为60mg/L时,对硫化物的降解率达98.58％.结论:从大庆石化废水中分离纯化出1株代号为Z39ay1菌株,经鉴定为赖氨酸芽孢杆菌,诱变后获得菌株Z39a,其降硫效果比出发菌株有大幅度的提高.