鼠李糖乳杆菌GG上清液通过EGFR调控SERT的机制CSCD

目的探寻鼠李糖乳杆菌GG(LGG)上清液在肠上皮细胞中是否通过表皮生长因子受体(EGFR)调控5-羟色胺转运体(SERT)的表达,以明确LGG治疗IBS的机制。方法分别用LGG上清超滤液、EGF、LGG上清超滤液+AG1478、EGF+AG1478等干预Caco-2细胞和HT-29细胞12 h和24 h,采用定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blotting检测EGFR及SERT表达水平。结果LGG上清超滤液和EGF干预Caco-2细胞和HT-29细胞12 h和24 h,EGFR和SERT表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。当在Caco-2细胞和HT-29细胞中加入AG1478抑制EGFR后,LGG上清超滤液和EGF在干预24 h后SERT的上调表达均受到抑制,且差异有统计学意义(均P<0.05)。结论LGG上清液可通过激活肠上皮细胞中的EGFR上调SERT表达。     

光散射法测凝血酶、水蛭素及蚓激酶活性

用纤维蛋白原作底物,加入一定量的凝血酶,监测在４８０ｎｍ处光散射强度变化,其变化过程是具有弛豫过程的Ｓ型曲线。取其最大斜率在一定时间（１ｍｉｎ）内的截距计算该酶的活力。在一定浓度的纤维蛋白原溶液中,光散射强度的变化速度与加入的凝血酶量成正比。在一定的纤维蛋白原和凝血酶的浓度下,加入水蛭素或蚓激酶,会减低光散射强度的增加速度,且加入量与光散射强度的变化速度成反比。因此,可用测光散射强度的变化速度来测定凝血酶,水蛭素和蚓激酶的活力。