间充质干细胞来源的外泌体治疗心肌梗死的研究进展

外泌体是一种小的单层膜结构的细胞外小囊泡,可在细胞间传递蛋白质、脂质、mRNA和miRNA等物质。间充质干细胞来源的外泌体可以作为无细胞系统减少心肌梗死后梗死面积、促进心肌再生并改善心功能,其作用机制可能与激活抗炎和促存活通路、调控细胞自噬和促进血管新生等有关。通过表面修饰或改造来源细胞以提高外泌体的靶向性或改变其内含物质值得深入研究。     

VEGFR-3基因转染淋巴管内皮祖细胞后可溶性VEGFR-3蛋白的分泌

目的研究携带BABL/c小鼠VEGFR-3（1-3Ig）基因的重组腺病毒转染淋巴管内皮祖细胞（LEPCs）后,对可溶性VEGFR-3蛋白分泌及其生物学特性的作用。方法采用巢式RT-PCR技术从BABL/c小鼠胎盘组织中扩增VEGFR-3（1-3Ig）的编码基因,并通过重组PCR技术在基因的N端加上人CD33的信号肽。将该基因片段亚克隆入腺病毒表达载体（pDC316-IRES-EGFP）,重组质粒经酶切及测序验证后,与包装质粒共转染293细胞以产生重组腺病毒。将构建好的携带有小鼠VEGFR-3（1-3Ig）基因的重组腺病毒转染淋巴管内皮祖细胞,通过ELISA检测转染细胞上清液中可溶性VEGFR-3蛋白的分泌及其对VEGF-C的中和作用。结果成功构建了带有信号肽的BABL/c小鼠VEGFR-3（1-3Ig）基因的腺病毒表达质粒,并获得高滴度的携带有小鼠VEGFR-3（1-3Ig）基因的重组腺病毒,重组腺病毒转染淋巴管内皮祖细胞后,可使转染细胞分泌可溶性VEGFR-3蛋白,该蛋白具有中和VEGF-C的作用。结论成功地制备了携带BABL/c小鼠VEGFR-3（1-3Ig）基因的重组腺病毒,用该病毒转染淋巴管内皮祖细胞可使其分泌可溶性VEGFR-3,该蛋白在体外具有中和VEGF-C的作用,这为临床抑制肿瘤淋巴管新生奠定了基础。     

miRNA-21在周围神经损伤和修复中的调控作用

周围神经损伤(PNI)后miRNA-21表达发生变化,参与神经再生的调控。本文从miRNA-21对神经元、施万细胞、神经营养因子等方面的影响进行探讨,对PNI及其修复阶段miRNA-21的表达变化和可能的作用机制作一综述,将有助于我们从分子水平进一步了解PNI的病理过程,并为miRNA-21成为一种潜在的PNI的诊断标志物和治疗靶点提供基础。     

自噬在阿尔茨海默病中的作用及其机制

自噬途径是细胞长寿命蛋白和功能障碍细胞器的主要降解途径。自噬功能障碍与多种异常折叠蛋白积聚导致的神经变性疾病有关。在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)发生发展中,β淀粉样蛋白的水平、神经元的存活与凋亡及行为记忆功能的恢复等与自噬密切相关。明确自噬在AD发病不同阶段的确切作用可能有助于发现更为有效的治疗靶点。     

三种转染试剂对RSC96细胞miRNA转染效率及细胞毒性影响的比较

目的比较三种转染试剂对大鼠施万细胞(Schwann cell,SC)mi RNA的转染效率和细胞毒性,为更好地研究SC创造条件。方法以大鼠SC株(RSC96)为研究对象,采用Lipofectamine 2000、Fu GENE6 Transfection Reagent和Super Fectin II Reagent分别转染绿色荧光素FAM标记的mi RNA阴性对照产品,比较和分析三者的转染效率以找出转染效率最高的转染试剂,并以CCK-8法细胞活性检测和TUNEL凋亡染色对这三种转染试剂的细胞毒性进行观察。结果 Fu GENE6 Transfection Reagent不适合RSC96转染mi RNA,lipofectamine 2000转染效率偏低,Super Fectin II Reagent转染效率能够满足实验要求,但其细胞毒性较大,应注意换液。结论 Super Fectin II Reagent可用于RSC96转染mi RNA,转染后宜进行换液以减少毒性。     

非经典Wnt信号通路在心脏发育和干细胞向心肌分化中的作用机制

Wnt信号通路是一种哺乳动物进化保守的信号通路,在心脏发育和干细胞向心肌细胞分化中发挥重要的调控作用。经典Wnt信号通路主要调控早期心肌谱系提交,而非经典Wnt信号通路参与调控后续的心脏发育和分化。本文对非经典Wnt信号通路在心脏发育和干细胞向心肌细胞分化中的作用及其机制作一综述,以期为干细胞移植治疗缺血性心肌病提供参考策略。