肌钙蛋白C(Tropnin C)的提纯与鉴定

<正> 肌钙蛋白C(TnC)是肌钙蛋白复合体的钙结合亚基,系骨骼肌和心肌收缩系统的触发因子。研究表明TnC与钙调素(CaM)类似,具有EF手结构和四个特殊的钙结合区。TnC与Ca~(2+)、Mg~(2+)等金属离子的结合可发生构型变化及由此导致的体内一系列酶活性等生理功能的变化。提纯TnC是进行其诸方面研究的基础。     

成纤维细胞生长因子-7在巨噬细胞感染结核分枝杆菌中的免疫机制初步研究

巨噬细胞分泌的纤维细胞生长因子-7(fibroblast growth factor-7,FGF-7)具有一定的细胞修复作用及抗炎症作用。通过PCR技术、Western-blot及ELISA实验研究分析FGF-7在巨噬细胞感染结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.avium)后的分子免疫机制。研究发现fgf-7基因在结核病患者外周血单个核细胞中表达增强,并且U973巨噬细胞在感染M.avium后,其fgf-7基因与FGF-7蛋白亦表达增强,同时U973巨噬细胞上清中的细胞因子TNF-α与IFN-γ分泌量显著增加。实验结果表明巨噬细胞受M.avium感染后,M.avium可增强巨噬细胞fgf-7基因及其蛋白质的表达,并促进细胞因子TNF-α与IFN-γ的分泌;提示FGF-7可能与TNF-α、IFN-γ等共同引起炎症反应从而参与对M.avium的抑制或杀伤作用,并修复损伤的巨噬细胞。     

亲和层析法分离人心脏特异性肌钙蛋白Ⅰ(CSTnⅠ)

在Ca~(2+)存在下,肌钙蛋白C(TnC)和肌钙蛋白Ⅰ(TnⅠ)可于高浓度的尿素溶液中形成稳定的复合体,而该复合体又能被EGTA解离。并且TnC和TnⅠ的Ca~(2+)依赖性结合反应没有种间或者肌肉类型间的特异性。将提纯的兔快肌TnC和活化的琼脂糖凝胶进行偶联,制备TnC-Sepharose 4B亲和层析柱,用来从人心肌中直接提纯心脏特异性肌钙蛋白Ⅰ(CSTnⅠ)。SDS-PAGE测得其分子量为29kD左右。对其氨基酸组成亦进行了分析。