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用TSB溶液取代常规的CaCl2溶液,制备大肠杆菌受体细胞。在菌体处于对数早期时离心收集细胞,用TSB缓冲液悬浮后,即可用于质粒DNA的转化。转化效率可达107~108转化子/μgDNA。 相似文献
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通过对多能硫杆菌RubiSCO的基因表达分析表明该基因能够在pBR322的P1启动子、pUC19的lac启动子以及pKK223-3的tac启动子的启动下,在大肠杆菌中表达,RubisCO基因片段在pUC19和pKK223-3载体上的表达活性较高。进一步对RubisCO基因表达产物进行了非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测到了RubisCO蛋白质带。 相似文献
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用TSB溶液取代常规的CaCl2溶液,制备大肠杆菌受体细胞。在菌体处于对数早期时离心收集细胞,用TSB缓冲液悬浮后,即可用于质粒DNA的转化。转化效率可达107~108转化子/μgDNA。 相似文献
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以pUC9质粒DNA作为载体,用PstⅠ酶切、碱性磷酸酯酶处理后,与PstⅠ部分酶切的多能硫杆菌染色体DNA3-10kbDNA片段连接,转化大肠杆菌JM83,在MacConkey培养基上筛选重组于,所得的重组子为6.5×103,达到建库要求的理论值。进一步用光合细菌Rhodobactersphaeroides类型Ⅱ磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶基因(rbcL-rbcS)为探针,从该库中筛选到了含有多能硫杆菌的1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RubisCO)基因片段的重组子 相似文献
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多能硫杆菌RbisCO基因在大肠杆菌中表达产物分析 总被引:1,自引:0,他引:1
通过对多能硫杆菌RubisCO的基因表达分析表明该基因能够在pBR322的P1启动子、puC19的lac启动子以及pKK223-3的tac启动子的启动下,在大肠杆菌中表达,RubisCO基因片段在pUC19和pKK223-3载体上的表达活性较高。进一步对RubisCO基因表达产物进行了非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测到了RubisCO蛋白质带。 相似文献
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