戊糖片球菌热胁迫应答机制探究

目的以发酵柚子皮中分离到的戊糖片球菌WPPE03、WPPE04作为研究对象,用标准株CGMCC1.2695作为对照,探索其热胁迫相关机制。方法通过平板计数法,确定戊糖片球菌的热适应条件和热致死条件;采用扫描电子显微镜观察细胞热应激前后形态学变化;应用RT-qPCR分析热休克蛋白及细胞膜脂肪酸合成相关基因转录水平变化,阐明热胁迫机制。结果确定了三株戊糖片球菌热适应条件(47℃,60min)和热致死评价条件(62℃,15min);发现了热致死条件处理菌体,膜表面会出现凹陷、皱褶,部分菌体出现破裂、胞内物质外溢等现象,而热致死条件处理前先经过热适应处理,菌体破裂现象明显减少;同时,证明了热应激处理过程中,相关热休克蛋白基因表达显著上调(P0.05),脂肪酸合成相关基因表达发生了变化。结论研究戊糖片球菌的热应答相关机制,可为合理开发、利用具有发酵性能的戊糖片球菌提供借鉴。     

发酵柚子皮戊糖片球菌的分离及生物学特性分析

目的从发酵柚子皮中分离具有优良性能的戊糖片球菌。方法对5株戊糖片球菌分离株(WPPE01、WPPE02、WPPE03、WPPE04和WPPE05)以及标准株CGMCC 1.2695的生物学特性和安全性进行系统分析。结果 WPPE02和WPPE04的耐酸性优于其他菌株,WPPE01和WPPE05的耐胆盐能力优于其他菌株,WPPE01和WPPE03同时具有较强的自聚及粘附能力,WPPE02具有最强的盐耐受能力,WPPE03的耐热性能最强。与其他受试细菌相比,5株戊糖片球菌对单增李斯特菌具有最强的抑制效果,WPPE01和WPPE03对大肠埃希菌的抑制效果显著优于标准株。分离株主要通过置换的方式抑制大肠埃希菌O157:H7对Caco-2细胞的粘附且WPPE02和WPPE03的抑制效果最强。全部戊糖片球菌均对部分抗生素敏感且不具有溶血性。结论 5株从发酵柚子皮中分离的戊糖片球菌具有作为益生菌应用的潜能。     

利用改进的酚-氯仿法从猪毛囊中提取基因组DNA

为提高从猪毛囊组织中提取基因组DNA的效率, 文章在借鉴从其他组织提取基因组DNA方法的基础上, 对经典的酚-氯仿法的反应体系和步骤进行了改进。利用改进的酚－氯仿抽提法, 从猪的毛囊组织中快速、高效地提取了高质量基因组DNA。利用该方法从1~6根猪毛囊中提取的基因组DNA可满足基于PCR技术的相关分子生物学实验需要。