小鼠SFA DNA片段的克隆

本工作将富集小鼠着丝粒DNA克隆于载体EMBL3,得到约2000个克隆,建立了着丝粒基因文库。从中随机挑取20个克隆,鉴定其克隆片段平均分子量大小约为14kb。     

中期染色体外鞘蛋白质的研究

从１２例硬皮病患者的抗染色体抗血清中发现４例是抗中期染色体鞘的,用它们和小鼠腹水癌细胞核及全细胞裂解液ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的蛋白印迹相反应,结果显示它们和细胞核裂解液的１１条抗原蛋白相结合,而且和全细胞裂解液中除以上的１１条外的另８条相结合。     

几种经济动物着丝粒间接免疫荧光的研究

检定间期细胞核中的着丝粒,除少数植物间期细胞核外,一直是一个问题。本工作用抗着丝粒抗血清,借间接免疫荧光染色法,对经济动物牛、羊、猪、兔和鸡的间期核进行了研究,发现在这些动物的间期核中都可检测出着丝粒,这为今后的着丝粒实验研究提供了基础。     

小鼠细胞核富集着丝粒部分特性的研究

我们从分离核获得的颗粒状小鼠着丝粒富集部分的特性是用间接免疫荧光法,微管组织中心(MTOC)活性的测试,SDS-PAGE 及荧光标记原位杂交法进行研讨的。这部分中的多数颗粒是DNA 和动点蛋白质的复合物,并且显示具有MTOC 活性。从这部分提出的DNA 杂交于小鼠腹水癌细胞所有的染色体的初级缢痕处。从这部分的蛋白质中检出的动点蛋白质,其主要蛋白质的分子量是55及59 KD。以上事实说明,就如我们过去已报告过的,这一部分是核富含着丝粒的部分。     

人类抗中心体自身抗体的研究

用间接免疫荧光法以小鼠腹水癌细胞为底物从硬皮病病人的自家抗血清中筛选出几个抗中心体的抗血清。因为中心体是化学构分复杂的细胞结构,而自家抗体又是多克隆的,故本文只用其中一个抗中心体抗血清作进一步研究。为了定位其抗原,同时也采用了Ｌ９２９培养细胞为底物。发现这抗血清结合于微管,有丝分裂期的纺锤体,中心体以及其它一些核结构。同时也用此抗血清在细胞裂解液的免疫印迹膜上检出了分子时与微管蛋白相同的主要条带,     

小鼠富集着丝粒DNA在小鼠减数分裂粗线期染色体上的原位杂交

本工作用Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８及着丝粒特异抗体间接免疫荧光法显示的小鼠粗线期染色体主缢痕区,与以小鼠富集着丝粒ＤＮＡ为探针在粗线期染色体上的原位杂交主缢痕区作了比较。发现ＳＦＡ ＤＮＡ探针不仅杂交于全部常染色体联会复合体上的着线粒区,并且杂交于着丝粒周围的异染色质区;而且,也杂交于Ｘ,Ｙ染色体的着丝粒区。由此结论：此富集ＳＦＡ ＤＮＡ中含有全套常染色体及Ｘ,Ｙ染色体的ＳＦＡ ＤＮＡ。     

小鼠富集着丝粒DNA在小鼠减数分裂粗线期染色体上的原位杂交

本工作用Hoechst 33258及着丝粒特异抗体间接免疫荧光法显示的小鼠粗线期染色体主缢痕区,与以小鼠富集着丝粒(SFA)DNA为探针在粗线期染色体上的原位杂交主缢痕区作了比较。发现SFA DNA探针不仅杂交于全部常染色体联会复合体上的着丝粒区,并且杂交于着丝粒周围的异染色质区;而且,也杂交于X,Y染色体的着丝粒区。由此结论:此富集SFA DNA中含有全套常染色体及X,Y染色体的SFA DNA。     

人类抗中心体自身抗体的研究

用间接免疫荧光法以小鼠腹水癌细胞为底物从硬皮病病人的自家抗血清中筛选出几个抗中心体的抗血清。因为中心体是化学构分复杂的细胞结构,而自家抗体又是多克隆的,故本文只用其中一个抗中心体抗血清作进一步研究。为了定位其抗原,同时也采用了L 929培养细胞为底物。发现这抗血清结合于微管,有丝分裂期的纺锤体,中心体以及其它一些核结构。同时也用此抗血清在细胞裂解液的免疫印迹膜上检出了分子量与微管蛋白相同的主要条带,此外还有几条较不明显的条带;后者肯定了间接免疫荧光的观察结果。     

中期染色体外鞘蛋白质的研究

从12例硬皮病患者的抗染色体抗血清中发现4例是抗中期染色体鞘的,用它们和小鼠腹水癌细胞核及全细胞裂解液SDS-PAGE的蛋白印迹相反应,结果显示它们和细胞核裂解液的11条抗原蛋白相结合,而且和全细胞裂解液中除以上的11条外的另8条相结合。