表达CCR5Delta32基因对人外周血单核细胞增殖功能的影响

目的：在人外周血单核细胞（PBMC）内表达CCR5Delta32基因,研究是否对该细胞增殖功能产生影响。方法：构建pLenti-CCR5Delta32慢病毒载体,包装后产生重组慢病毒,将其转染PBMC,荧光显微镜观察转染情况,Westernblot鉴定目的蛋白的表达;分别用植物血凝素（PHA）及破伤风类毒素（TTD）刺激培养经转染的靶细胞,采用MTT比色法测定其增殖功能是否受影响。结果：构建了pLenti-CCR5Delta32慢病毒载体,经包装后产生重组慢病毒,滴度约为5×105TU/mL。将其转染PBMC,观察到约半数PBMC胞浆内有绿色荧光蛋白表达,经Westernblot进一步鉴定为目的蛋白;转染的靶细胞经PHA或TTD刺激培养后,有着与正常PBMC相似的增殖功能。结论：构建了重组慢病毒并将其转染PBMC靶细胞,为获得性免疫缺陷综合征的基因治疗研究奠定了基础。     

表达CCRSDelta32基因对人外周血单核细胞增殖功能的影响

目的:在人外周血单核细胞(PBMC)内表达CCR5Delta32基因,研究是否对该细胞增殖功能产生影响.方法:构建pLenti-CCRSDelta32慢病毒载体,包装后产生重组慢病毒,将其转染PBMC,荧光显微镜观察转染情况,Western blot鉴定目的蛋白的表达;分别用植物血凝素(PHA)及破伤风类毒素(TTD)刺激培养经转染的靶细胞,采用M1tr比色法测定其增殖功能是否受影响.结果:构建了pLenti-CCRSDelta32慢病毒载体,经包装后产生重组慢病毒,滴度约为5×106TU/mL.将其转染PBMC,观察到约半数PBMC胞浆内有绿色荧光蛋白表达,经Westem blot进一步鉴定为目的蛋白;转染的靶细胞经PHA或TTD刺激培养后,有着与正常PBMC相似的增殖功能.结论:构建了重组慢病毒并将其转染PBMC靶细胞,为获得性免疫缺陷综合征的基因治疗研究奠定了基础.     

功能代谢组学技术在微生物研究中的应用

功能代谢组学是以代谢组学技术发现关键代谢物为基础,结合体内体外实验和分子生物学等技术手段,研究差异代谢物及相关蛋白、酶和基因的功能,从而揭示生物体内在的分子调控机制。功能代谢组学技术具有精准识别关键调控代谢物及其相关基因或酶的特性,近年来在微生物相关疾病的防控和工业化生产等方面受到了广泛的关注。本文介绍了功能代谢组学技术的分析流程、相关研究方法与平台及其在微生物研究方面的应用,其中重点阐述了真核、原核以及病毒微生物的代谢特性、调控靶点及相关防控策略等。最后,提出功能代谢组学研究在未来面临的问题与挑战,为后续功能代谢组学的研究与发展提供新的思路。     

功能代谢组学技术在微生物研究中的应用

功能代谢组学是以代谢组学技术发现关键代谢物为基础,结合体内体外实验和分子生物学等技术手段,研究差异代谢物及相关蛋白、酶和基因的功能,从而揭示生物体内在的分子调控机制。功能代谢组学技术具有精准识别关键调控代谢物及其相关基因或酶的特性,近年来在微生物相关疾病的防控和工业化生产等方面受到了广泛的关注。本文介绍了功能代谢组学技术的分析流程、相关研究方法与平台及其在微生物研究方面的应用,其中重点阐述了真核、原核以及病毒微生物的代谢特性、调控靶点及相关防控策略等。最后,提出功能代谢组学研究在未来面临的问题与挑战,为后续功能代谢组学的研究与发展提供新的思路。     

贵州茂兰国家级自然保护区四药门花群落各层次优势种群的种间联结性分析

采用样带法对贵州茂兰国家级自然保护区内濒危植物四药门花[Loropetalum subcordatum(Benth.)Oliv.]群落乔木层、灌木层和草本层的植物种类进行了野外调查,并采用方差比率(VR)法、Pearson相关性分析和Spearman秩相关性分析对各层次优势种群的种间联结性进行了分析。结果表明:该群落共有维管植物86科183属259种(变种),乔木层、灌木层和草本层的植物种类分别有131种、116种和198种(变种),优势种分别有15种、9种和17种(变种)。VR分析结果表明:各层次的优势种群总体联结性呈负关联(VR1),其中,乔木层的优势种群总体联结性显著,统计量(W)为0.69;灌木层和草本层的优势种群总体联结性不显著,W值分别为4.90和2.64。Pearson相关性分析结果表明:乔木层和灌木层的优势种种对以负关联为主,草本层的优势种种对以正关联为主,分别占相应层次优势种种对总数的58.1%、52.8%和58.1%;四药门花与乔木层和草本层的优势种种间联结性以负关联为主,其与乔木层的樟[Cinnamomum camphora(Linn.)J.Presl]和草本层的锈毛崖豆藤[Callerya cinerea(Benth.)Schot]呈显著(P0.05)正关联,与灌木层的粗糠柴[Mallotus philippensis(Lam.)Müll.Arg.]呈极显著(P0.01)正关联,与乔木层的灯台树(Cornus controversa Hemsl.)呈显著负关联。Spearman秩相关性分析结果表明:乔木层的优势种种对以负关联为主,灌木层和草本层的优势种种对以正关联为主,分别占相应层次优势种种对总数的52.4%、63.9%和50.0%;四药门花与乔木层和草本层的优势种种间联结性以负关联为主,与灌木层的优势种种间联结性以正关联为主,其与乔木层的灯台树呈显著负关联,与灌木层的粗糠柴呈极显著正关联,并与灌木层的香叶树(Lindera communis Hemsl.)和南方紫金牛(Ardisia thyrsiflora D.Don)呈显著正关联。综上所述,贵州茂兰国家级自然保护区内四药门花群落各层次优势种群的联结性较弱,四药门花在该群落中表现出较强的独立性,仅与少数优势种存在竞争关系,建议在目前封山育林模式基础上采取适当的人工辅助措施,以利于四药门花种群发展。     

模拟增温及分解界面对茭草凋落物分解速率及叶际微生物结构和功能的影响

挺水植物的凋落物是湿地生态系统物质循环的重要组成部分, 阐明气候变暖以及生境差异对湿地挺水植物凋落物分解过程及叶际微生物的影响对揭示湿地生态系统关键物质循环过程具有重要意义。该研究以滇西北高原典型湿地优势挺水植物茭草(Zizania latifolia)为研究对象, 采用凋落物袋法研究了茭草在模拟增温(1.5-2.0 ℃)及不同生境(大气界面、水界面与土界面)下的质量残留率和叶际微生物数量、结构组成与功能代谢特征。研究发现: 模拟气候变暖及生境差异均显著影响凋落物的分解速率。经过一年的分解, 凋落物在模拟增温环境下的质量残留率为66.4%, 对照组的质量残留率为77.7%, 增温组分解常数(k)值是对照组的1.64倍, 而凋落物在水界面与土界面的质量残留率为42.2%和25.3%, 其k值分别为大气界面的3.63和5.25倍, 生境差异是影响湿地挺水植物凋落物分解速率的关键因素。模拟增温主要改变了凋落物叶际微生物的群落组成特征, 而生境变化主要影响叶际微生物的绝对数量、微生物多样性、群落结构组成以及功能代谢活性。处于土界面的凋落物叶际微生物具有最高的群落功能代谢活性及醇类碳源利用程度。不同处理之间的植物叶际微生物特征与凋落物分解速率具有较好的一致性, 为揭示湿地植物凋落物分解快慢的微生物驱动机制提供了重要的理论依据。     

贵州茂兰珍稀濒危植物四药门花种群特征

四药门花是我国特有的珍稀濒危植物,其种群特征是制定切实有效保护策略的重要依据。该研究根据四药门花在贵州茂兰的分布特征,设置了5个40 m×10 m样带对其种群进行调查,从种群径级结构[Ⅲ级开始,胸径(DBH)2.5 cm为一个径级]、静态生命表、存活曲线等方面分析其种群结构。结果表明:(1)贵州茂兰四药门花个体数比例最大的为IV级(2.5 cm≤DBH5 cm),占27.0%,幼苗库的个体数比例占24.7%,为稳定型种群。(2)I级(h1.3 m)、Ⅱ级(h1.3 m且DBH1 cm)的生命期望值最大;在V龄级(5cm≤DBH7.5 cm)前的预期生命值随着年龄增加而降低,V龄级后预期寿命先升后降。(3)死亡率曲线和消失度曲线趋势一致,大致表现为先上升后下降但降幅较小;龄级V的死亡率和消失度最高,其主要影响因素可能为环境筛尤其是水分胁迫。(4)存活曲线除Ⅱ级到Ⅲ级(1 cm≤DBH2.5 cm)有小幅上升外,基本单调递减。(5)四药门花种群的就地保护,除延续现在的封禁模式外,需要对中树加强抚育。