阴道微生态宏基因组学研究进展

女性阴道内寄居着多种微生物群落,这些微生物种群间的平衡状态与妇女阴道疾病的发生密切相关。鉴定女性阴道菌群结构多样性的特征,有助于了解其在阴道疾病发生和转归中所发挥的作用。目前基于16SrRNA的聚合酶链式反应(PCR)及宏基因组相关技术在微生物群落研究中被广泛运用,这不仅可以帮助人们最大程度地获得阴道菌群的宏基因组信息,还可有效弥补单纯微生物培养法所产生的实验数据不充足等弊端。本文对阴道微生物菌群多样性的研究中应用的宏基因组学技术如基因测序、变性/温度梯度凝胶电泳(DGGE/TGGE)、分子克隆、末端限制性酶切长度多态性(T-RFLP)等进行综述。     

乳杆菌制剂治疗外阴阴道念珠菌病的研究进展

外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)又称念珠菌性阴道炎,是由念珠菌异常增殖引起的女性常见的第二大外阴阴道炎症疾病,常伴有阴道菌群失调和微环境的改变,尤其在妊娠期间,VVC的发病率升高,与不良妊娠结局的发生显著相关,对女性身心健康造成了严重的损害。传统针对VVC的治疗一直以抗真菌药物为主,但并未修复受损的阴道微生态系统,目前乳杆菌制剂被认为可通过维持正常的阴道微生物群来重建阴道微生态系统,有利于治疗女性阴道炎症疾病,因而在临床诊疗工作中,乳杆菌制剂的应用越来越多。以下就国内外乳杆菌制剂联合其他药物治疗VVC的研究进行综述,探讨乳杆菌制剂在VVC的治疗中发挥的作用。     

高通量测序技术对胚胎停育患者阴道真菌的研究

目的通过高通量测序技术探究妊娠早期胚胎停育患者阴道真菌分布,比较其与正常早期妊娠者阴道真菌之间的差异,揭示胚胎停育与阴道真菌变化的相关性。方法选取2018年5月至2018年11月在兰州大学第二医院产科就诊的20例患者为研究对象,其中胚胎停育10例(实验组),正常早期妊娠10例(对照组)。分别取两组对象阴道分泌物样本行ITS rDNA高通量测序,测序数据进行OTU聚类分析,Alpha多样性和Beta多样性分析,组间群落差异性分析。结果实验组女性阴道真菌群落中未发现特征菌的存在,但菌群丰度显著高于对照组(P0.05)。Kazachstania、Rhizopus和Rhodotorula为两组间差异最显著的3个菌属(P0.05),且它们在实验组中相对丰度均高于对照组。结论阴道真菌丰度的显著变化可能与胚胎停育相关,尤其是Rhizopus丰度显著升高应当引起注意。     

呋苄青霉素放射免疫测定

呋苄青霉素(BL-P1597)具有广谱抗菌活性,是治疗绿脓杆菌很有前途的药物,其测定方法用放射免疫学方法比用微生物学方法较好。作者用BSA为载体,EDC_1为连接剂,合成了BL-P1597-BSA免疫原。每个克分子BSA约接6个克分子BL-P1597。用背部皮内多点法免疫家兔,7～9个月获得了抗BL-P1597血清,最终工作浓度:~#5兔为1:1800、~#3_s兔为1:3600,亲和常数K分别为1.70×10~8M~(-1)、1.86×10~9M~(-1)。~3H-BL-P1597免疫原性良好。用微孔滤膜分离结合的与游离的标记物。竞争抑制曲线:灵敏度35毫微克,精密度4.80±1.82%,准确度7.37±1.40%。血清测定的变异系数:批内8.3～9.8%,批间11.46～14.75%。加入血清中的BL-P1597可定量回收(93～101%)。随待测含BL-P1597血清加入量的增加(40μl～60μl/管),测得的BL-P1597量呈线性增加。4种青霉素类化合物(青霉素G、青霉烷酸、氨苄青霉素、羧苄青霉素)均无明显的干扰。本方法通过多种方法学考核,证明是灵敏、特异和可靠的。     

呋苄青霉素放射免疫测定

呋苄青霉素(BL-P1597)具有广谱抗菌活性,是治疗绿脓杆菌很有前途的药物,其测定方法用放射免疫学方法比用微生物学方法较好。作者用BSA 为载体,EDC_1为连接剂,合成了BL-P1597-BSA 免疫原。每个克分子BSA 约接6个克分子BL-P1597。用背部皮内多点法免疫家兔,7～9个月获得了抗BL-P1597血清,最终工作浓度:~*5兔为1:1800、~*3_(?)兔为1:3600,亲和常数K 分别为1.70×10~8M~(-1)、1.86×10~9M~(-1)。~8H-BL-P1597免疫原性良好。用微孔滤膜分离结合的与游离的标记物。竞争抑制曲线:灵敏度35毫微克,精密度4.80±1.82%,准确度7.37 1.40%。血清测定的变异系数:批内8.3～9.8%,批间11.46～14.75%。加入血清中的BL-P1597可定量回收(93～101%)。随待测含BL-P1597血清加入量的增加(40μl～60μl/管),测得的BL-P1597量呈线性增加。4种青霉素类化合物(青霉素G、青霉烷酸、氨苄青霉素、羧苄青霉素)均无明显的干扰。本方法通过多种方法学考核,证明是灵敏、特异和可靠的。