5-氮胞苷对转化后间充质干细胞增殖、衰老及p16~(INK4a)表达的影响

目的观察5-氮胞苷对体外自发转化的间充质干细胞增殖、衰老及p16INK4a基因表达的影响。方法采用细胞计数、SA-β-gal染色、Western Blot和重硫酸盐修饰后测序(BSP)检测体外自发转化的大鼠间充质干细胞在不同浓度5-氮胞苷处理后增殖、衰老、p16INK4a表达及p16INK4a基因启动子区CpG岛甲基化水平的变化。结果细胞计数显示5-氮胞苷可剂量依赖性地抑制转化后间充质干细胞的增殖,但增殖受抑的细胞SA-β-gal染色仍呈阴性。BSP及Western Blot分析显示:转化后间充质干细胞p16INK4a基因启动子区CpG岛呈现高水平甲基化(87.30±2.39%)。5-氮胞苷可在一定程度上降低该基因的甲基化,使p16INK4a表达得以部分恢复;但即使是高浓度高达100μmol/L,5-氮胞苷也只能使p16INK4a基因甲基化降低到46.20±1.65%。结论 5-氮胞苷可显著抑制转化后间充质干细胞的增殖,但并不能促使这些细胞重新恢复衰老状态;其原因是5-氮胞苷单独作用不足以完全解除p16INK4a基因启动子区DNA的高甲基化。     

中国医院排行榜现状分析与对策探讨

在综合分析复旦大学医院管理研究所《中国最佳医院排行榜》、香港艾力彼医院管理研究中心《中国医院?竞争力排行榜》和医信天下《2014年度中国医院影响力综合排名前50强》排行榜的基础上,总结探讨我国开展医院排行工作在数据源、评价主体、排行标准、社会影响等方面面临的问题和困境,并提出了进一步开展中国医院排行工作的对策建议。

     

稀有稻种长毛谷的民族植物学及营养成分研究

长毛谷(Changmaogu/Oryza sativa)是云南省兰坪白族普米族自治县白族支系拉玛人传统栽植的一个特有的有色稻种，是我国农家品种的典型代表，处于稀有濒危状态，但对该品种的研究较少。为促进长毛谷保护及可持续利用，该研究利用民族植物学及营养学的方法，对兰坪当地有关长毛谷品质特征、传统知识与文化、开发利用现状及存在的问题进行了调查和分析，并测定稀有农家品种长毛谷的营养成分，与普通常见稻种的营养成分进行对比，探究长毛谷的营养价值。结果表明：(1)长毛谷产地的白族支系拉玛人积累了丰富的关于长毛谷的传统知识和文化，包括传统耕作知识、相关历史典故、传统食用知识和种子的交换及保存文化。(2)长毛谷具有高含量的可利用碳水化合物、水分、灰分、总膳食纤维和花青素且含有一定量的原花青素，表明长毛谷具有较高的营养保健价值。综上认为，长毛谷的原生境保护模式可为其他农家品种的保护提供科学参考，有利于长毛谷等农家品种的可持续利用。     

植物次生代谢基因簇研究进展

类似于原核生物的操纵子,在真核生物（如酵母、真菌、昆虫等）基因组中也出现了彼此功能相关的非同源基因成簇存在的现象。这些基因形成基因簇,可参与多种次生代谢途径。近年来,植物中也发现了越来越多的参与次生代谢产物合成的基因簇,它们已成为植物生物学研究的热点。本文总结并分析了植物中已鉴定的次生代谢基因簇。这些基因簇存在于玉米（Zea mays L.）、水稻（Oryza sativa L.）、拟南芥（Arabidopsis thaliana（L.） Heynh.）、番茄（Solanum lycopersicum L.）等植物的基因组中,分别参与合成苯并噁唑嗪酮类、萜类和生物碱类等次生代谢产物。本文通过解析这些基因簇的组成及结构特点,对其特征进行总结,探讨了基因簇形成的分子机理及其调控机制,对植物次生代谢基因簇在合成生物学及代谢工程学中的研究方向和应用前景进行了展望。     

金标法与免疫发光法检测CEA在健康体检中的应用

目的：探讨金标法和免疫发光法检测CEA在健康体检中的应用价值。方法：对728例健康体检的个人同时应用金标法和免疫发光法测定CEA,对结果进行分析。结果：金标法测定的阳性率为0．69％,免疫发光法测定的阳性率为0．41％,两者具有高度一致性。结论：对健康体检人群应先用金标法进行定性,对阳性结果再用免疫发光法进行定量。     

自噬促进骨髓间充质干细胞复制性衰老过程中衰老相关基因表达

目的探究和分析自噬在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)复制性衰老过程中的作用和可能的调控机制。方法采用全骨髓细胞贴壁法获得大鼠BMSCs,体外连续传代培养至第6代(passage 6,P6),分别用自噬抑制剂巴佛洛霉素A1(bafilomycin A1,Ba F1)和自噬激活剂雷帕霉素(rapamycin,Rap)处理P6 BMSCs。q PCR和Western blot分析细胞自噬活性和衰老相关基因表达的改变,DCFH-DA染色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量。结果与增殖活跃的P2 BMSCs相比,P6 BMSCs增殖停滞,Brdu掺入率极低,SA-β-gal染色阳性率高达90%,且P6 BMSCs的p21Waf1和p16ink4a m RNA表达水平明显升高。在P6 BMSCs,ATG12 m RNA表达水平和LC3II/LC3I的比值升高,细胞内ROS含量也增加。对P6 BMSCs采用Ba F1处理阻断自噬流后,p21Waf1和p16ink4a m RNA表达水平降低,ROS含量增加;用Rap处理后,ATG12 m RNA表达水平和LC3II/LC3I蛋白比值均明显升高,且p21Waf1和p16ink4a m RNA表达水平升高,ROS含量降低。结论通过体外连续培养,P6 BMSCs进入衰老状态;自噬可能通过促进衰老相关基因表达调节BMSCs的复制性衰老。