鲑鱼生长激素cDNA的分子克隆和序列分析

从太平洋切奴克鲑鱼(Pacific Chinook Salmon,Oncorthychus tschawytscha)垂体poly(A)~+ RNA构建cDNA文库。按照鲑鱼生长激素(sGH)部分氨基酸序列合成两个寡聚脱氧核苷酸探针,它们分别与编码第1—7和第166—172氨基酸序列互补。用探针筛查cDNA文库,得到了完整的sGH cDNA克隆。cDNA序列已测定,包括编码210个氨基酸的编码序列。其中含有22个氨基酸的信号肽序列和188个氨基酸的成熟GH序列。该克隆还包括了5'端和3'端非翻译区,分别为72个和438个碱基对长。与Chum鲑鱼比较表明,核酸序列和氨基酸序列的同源性分别为97%和99%。     

从短锯鲉分离和鉴定抗冻多肽mRNA

短锯鲉在冬季产生抗冻多肽,此多肽能降低血液的冻结温度。本实验用11月份捕获的短锯鲉肝脏做标本,提取抗冻多肽mRNA,经寡聚脱氧胸腺嘧啶核苷酸纤维素亲合层析和蔗糖梯度密度离心提纯。抗冻多肽mRNA的长度经含羟甲基汞的琼脂糖凝胶电泳测定为580硷基对,其在无细胞翻译系统中初级翻译产物的分子量经SDS-PAGE估计为15000。