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1.
代先祝  邵娜娜  罗峰 《微生物学报》2014,54(11):1241-1247
除了细胞质膜,革兰氏阴性细菌细胞还有一层组成细胞壁的外膜(Outer Membrane)。膜蛋白是外膜的主要组成成分之一,绝大多数外膜蛋白是由反向平行的β-折叠(β-Strands)通过相邻的氢键结合形成的β-桶状结构蛋白(β-Barrel Proteins)。这些蛋白既可作为通道蛋白、转运蛋白、酶、受体、毒力因子,也可作为结构蛋白发挥稳定外膜的重要作用,它们是否正确折叠并整合到外膜对革兰氏阴性细菌的生存至关重要。大多数外膜蛋白易于重组表达和体外重折叠(in vitro refolding),并且折叠状态可通过多种方法测定,因此β-桶状结构外膜蛋白被当着模式蛋白来研究各类生物和非生物因子对膜蛋白折叠的影响,是膜蛋白研究的一大热点。本文将从β-桶状结构外膜蛋白体外折叠的研究方法和影响折叠的因素角度对近年相关研究进展进行综合述评,最后总结了外膜蛋白体外折叠模式,并结合作者的相关研究结果和观点对该领域的研究前景进行了展望。  相似文献   
2.
围绕国家对公立医院公共卫生服务的要求,以一级、二级、三级公立医院承担公共卫生服务的合理性和科学性为目的,通过对公共卫生服务进行重新归纳分类,并运用DEA/TOPSIS组合模型,计算并评价一级、二级、三级公立医院公共卫生服务的完成效率,找出其差异程度,从而探索出不同等级公立医院应该侧重不同类别公共卫生服务的政策建议。  相似文献   
3.
<正>背景:为了提供抗肺炎球菌性疾病的广谱保护,新型的含有保守的肺炎链球菌蛋白的疫苗正在被人们开发出来。该研究评价了含有肺炎链球菌蛋白肺炎链球菌溶血素类毒素(dply)和三联组氨酸蛋白的Pht D的4种配方制剂在学步儿童中的安全和免疫原性。方法:在这项Ⅱ期临床试验中,采取了多中心,观察者盲性,在捷克的学步儿童(12~23月龄的儿童)中进行。按照随机原则(1∶1∶1∶1∶1)接受  相似文献   
4.
本研究采用腺病毒感染、慢病毒感染、脂质体转染和电穿孔转化方法将含有绿色荧光蛋白(GFP)的质粒转入经过差异贴壁法初步分离纯化的小鼠精原干细胞(SSCs)中,转染48 h后通过流式细胞仪检测GFP阳性细胞比例比较4种方法在体外转染精原干细胞的效率.结果显示,脂质体转染效率最高仅为8.64%,不能满足对精原干细胞进一步实验的要求;电穿孔法效率最高达到25.27%,但转化后细胞大量死亡;腺病毒转染细胞的效率达到了32.4%;慢病毒转染效率最高,达到74.25%.因此,慢病毒转染法是体外转染小鼠精原干细胞的有效方法.  相似文献   
5.
鸡GnRH对体外培养的鸡卵泡膜细胞合成甾类激素的作用   总被引:1,自引:0,他引:1  
在建立鸡卵泡膜细胞体外无血清贴壁培养模型基础上,研究了鸡促性腺激素释放激素(cGnRHⅡ)对鸡卵胞膜细胞合成睾酮(T)和雌二醇(E2)的直接作用;以及在绵羊促黄体激素(oLH)或促卵泡激素(oFSH)存在时,cGnHⅡ对膜细胞合成T或E2的影响。实验结果如下:①在培养液中单独加入cGnRHⅡ,能促进F5、F3卵泡膜细胞合成T及E2,并具有剂量依赖关系;而对于F1卵泡膜细胞的作用效果不明显。②cGnRHⅡ与oLH(50ng)共同处理,当cGnRHⅡ低剂量(100g)时,膜细胞T合成量明显增加,而加大剂量时,T合成量则显著降低。③cGnRHⅡ(500ng)与oFSH(50ng)共同处理对膜细胞E2的合成有抑制作用,降低cGnRHⅡ的含量,可逐渐恢复oFSH对膜细胞E2合成的刺激作用。  相似文献   
6.
以细胞形态观察、细胞存活率、乳酸脱氢酶释放和前列环素测定等方面研究载脂蛋白AⅡ保护内皮细胞的作用.结果显示,载脂蛋白AⅡ可部分拮抗低密度脂蛋白对内皮细胞的损伤作用, 维持内皮细胞形态基本正常,乳酸脱氢酶释放减少,前列环素合成增加.  相似文献   
7.
信号肽对外源蛋白分泌效率的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
信号肽在引导外源蛋白分泌过程中具有重要作用,本文从信号肽疏水性结构、构建分泌型载体以及分泌增强子、定位信号等几个方面介绍了信号肽对外源蛋白分泌效率的影响,在大量生产以酵母为表达宿主的治疗性蛋白方面具有广泛的应用前景。  相似文献   
8.
目的:探讨血清胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ(PGⅠ/Ⅱ)、铁蛋白、肿瘤坏死因子-alpha联合检查诊断胃癌的临床意义。方法:选择2013 年5 月至2014 年10 月收治的胃病住院患者及健康体检者,根据胃镜及病理组织学结果,将其分良性胃病组、胃癌组以及健康组,比 较三组血清胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ、铁蛋白及肿瘤坏死因子-alpha水平,分析血清胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ(PGⅠ/Ⅱ)、铁蛋白、肿瘤坏死因子-alpha单 独和联合诊断胃癌的敏感性、特异性和准确性。结果:与健康组比较,良性胃病组以及胃癌组的血清PGⅠ/Ⅱ水平较低(P<0.05), 与良性胃病组比较,胃癌组血清PGⅠ/Ⅱ水平较低(P<0.05);与健康组比较,良性胃病组以及胃癌组的血清铁蛋白以及TNF-alpha水 平较高(P<0.05),与良性胃病组比较,胃癌组血清铁蛋白以及TNF-alpha水平较高(P<0.05)。PGⅠ/Ⅱ、铁蛋白以及TNF-alpha联合检测 诊断胃癌的敏感度以及准确度分别为88.4%以及83.1%,高于单一检测。结论:血清PGⅠ/Ⅱ、血清铁蛋白、肿瘤坏死因子-alpha联合 检测诊断胃癌的效能优于单一检测。  相似文献   
9.
目的对随机采样和田字格定点采样两种取样方式筛菌效率进行比较分析。方法利用随机采样和定点采样两种不同方式,采集了长白山地区的土样,取来自不同植物根际的土样,制成菌悬液后煮沸,涂布无氮平板以分离固氮芽胞杆菌。对分离的菌株进行菌落16S rDNA PCR,从中筛选鉴别巨大芽胞杆菌。结果定点采集土样分离出无晶体芽胞菌和有晶体芽胞菌分别是261株和76株,随机采集土样分离出无晶体芽胞菌和有晶体芽胞菌分别是279株和94株。经16S rDNA法鉴定分离巨大芽胞杆菌共19株。结论随机采样的取土方式与定点采样的取土方式差异度小,两种采集土样的方式在筛菌效率上并未表现出明显差异。  相似文献   
10.
构建基于TeI3c/4c嗜热二型内含子的温度诱导Targetron基因失活系统 (Thermotargetron),并应用于中温微生物基因编辑。在大肠杆菌HMS174 (DE3) 基因组中,选择Subunit of flagellum基因 (fliC) 和C4 dicarboxylate orotate:H+ symporter基因 (dctA) 为靶基因。根据TeI3c/4c DNA识别规则,在fliC和dctA基因中选择fliC489a、fliC828s、fliC1038s和dctA2a位点为基因打靶位点。使用重叠延伸PCR方法,基于pHK-TT1A质粒构建打靶载体。打靶载体转化HMS174菌株,对数期转化子培养液48 ℃热激1 h后涂布于氯霉素抗性LB平板上。使用菌落PCR和DNA测序检测突变株并计算基因失活效率。获得突变株后,通过琼脂穿刺和碳源代谢实验,鉴定ΔfliC、ΔdctA突变株表型变化。菌落PCR测序结果表明,TeI3c/4c插入到fliC和dctA基因设计位点,且打靶效率高达100%。突变株表型验证实验表明,ΔfliC突变株运动能力显著下降,ΔdctA突变株苹果酸代谢能力缺失。综上所述,文中建立了一套适用于嗜中温微生物的温度诱导型、高效基因失活系统,该系统可通过控制宿主菌在48 ℃保温时间实现高效、靶向、精准基因失活。  相似文献   
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