人参发根的诱导及其适宜培养条件的研究

利用发根农杆菌A₄菌株在人参根外植体上直接诱导产生发根。在1/2MS固体培养基上建立起发根离体培养系，经连续多代的培养，发根仍保持旺盛生长状态。PCR扩增结果表明，发根农杆菌R_I质粒的rolC基因已在人参发根基因组中整合并得到表达。液体培养基中发根生长速度约为固体培养的2倍。经对发根中人参皂苷含量及比生长速率的测定，筛选出高产发根系R9923。利用HPLC法测定了R9923发根系中单体皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2和Rd的含量，人参总皂苷含量达15.2mg/g。确定1/2MS培养液（30g/L蔗糖）、摇床转速110r/min、每２周更换一次培养液、继代培养时间4周，为人参发根生长适宜条件。探讨了培养容积、发根初始接种量以及分级放大培养工艺对发根大规模生产过程中生物产量和皂苷含量的影响。  

液体培养蛹虫草虫草素和腺苷的代谢量

为提高虫草素和腺苷的代谢量,用高效液相色谱法作检测手段,以二者含量为检测指标,对液体培养的氮源种类、氮源水平、碳源水平、动态变化、培养体系的虫草素及腺苷含量和总量进行研究,结果表明:不仅蚕蛹粉,豆粕和豆粉也是很好的氮源;培养液以3%氮源、4%碳源为佳;振荡培养8d,培养液中虫草素总量是菌丝体中虫草素总量的6倍多;振荡培养7~9d,可使每瓶培养物的虫草素和腺苷总量达到10mg以上。  

文心兰原球茎液体增殖培养研究

以茎尖诱导形成的原球茎(protocorm-like bodies,PLBs)为外殖体,采用液体培养方式比较了不同浓度的激素配比、蔗糖浓度和添加不同量的新鲜椰汁对文心兰PLBs增殖的影响,并比较了相同培养基成分时液体培养PLBs增殖、分化成苗和固体培养PLBs增殖和分化成苗的差异。试验结果表明:不同浓度的外源激素及其配比对文心兰PLBs增殖生长影响较大,6-BA0.5 mg/L Ad 0.05 mg/L NAA0.05 mg/L的激素组合比较适合文心兰PLBs增殖;蔗糖浓度对文心兰PLBs增殖的影响也较大,适合文心兰PLB在液体培养条件下增殖的蔗糖浓度为7.5 g/L;添加5%新鲜椰汁不仅对文心兰PLBs增殖有促进作用,而且能改善PLBs的质量;适合文心兰PLBs增殖的培养基为MS 6-BA0.5 mg/L Ad 0.05 mg/L NAA0.05 mg/L 5%椰汁 蔗糖7.5 g/L。文心兰PLBs在5周内的增殖生长曲线呈倒"V"字形,第3周的增殖速度达最高峰,而固体培养基PLBs增殖速度较慢,生长曲线几乎成直线。液体增殖的PLBs分化成苗较固体培养增殖的PLBs差。  

南方红豆杉细胞双液相培养中强化紫杉醇生产的研究

研究了南主红豆杉(Taxuschinensisvar.maireiChengetFu)细胞双液相培养中前体饲喂和混合糖源作为生产培养基糖源对细胞生长和紫杉醇合成的影响。结果表明,前体饲喂(苯丙氨酸、苯甲酰胺和醋酸钠)或混合糖(麦芽糖和蔗糖)作为生产培养基糖源对南方红豆杉细胞单液相培养、更重要的是对其双液相培养的紫杉醇产量提高有显著促进作用,而且前体饲喂和混合糖源的协同作用对其双液相培养的紫杉醇产量提高有进一步的促进作用。与对照组(蔗糖作为糖源和无前体的单液相培养)相比,在南方红豆杉细胞双液相培养中,第10天加入前体,第11天加入混合糖源,紫杉醇产量提高4倍多  

黄绿蜜环菌菌丝营养生理特性的初步研究

在碳源含量为1．0轴，氮源含量为O．lqb的条件下，采用液体静且培养方法，研究了黄绿蜜环菌对碳源、氮源的利用。试验表明，黄绿蜜环菌对碳素营养利用广泛，在多精中对淀粉利用较好，双糖中的蔗糖、单糖中的葡萄糖是理想联源。菌丝营养生tiM有机氮的利用比无机氛强，在有机氮源中，对复合氮源（如酵母粉、蛋白陈）的利用比单一氛亲（尿素）好；在无机氮源中，对接态氮（如NH。CI，（N。入SO。）的利用强，硝态氮利用差或基本上不利用。添加硫酸铜、硫酸镜、维生素可促进菌丝生长，在缺乏碳素营养和氨京营养的培养基上菌丝不生长。  

白腐菌液体深层培养条件的研究

实验研究了碳源、氮源和无机盐及培养条件对白腐菌液体深层培养的影响。应用正交试验确定了最佳培养基组成为玉米粉 2 .0 % ,玉米浆 2 .0 % ,(NH4 ) 2 SO4 0 .0 1% ,KH2 PO4 0 .0 5 % ,MgSO4 ·7H2 O 0 .0 5 % ,VB1 0 .0 5 % ;最适培养条件为种子培养时间 72h,培养液初始pH5 .5 ,装液量 10 0ml 2 5 0ml三角瓶 ,接种量 10 % ,培养温度 30℃ ,摇床转速 180r min,培养时间 72h ,其最大生物量为 12 .6g L。同时进行了 5L自动发酵罐培养条件的初步研究。  

金针菇FV908菌株液体培养工艺的研究

通过单因子试验统计分析 ,优化筛选了适于金针菇 (Flammulinavelutipes)FV90 8的适宜培养基和摇瓶培养条件 ,结果表明 ,其适宜的液体培养基组成为玉米粉 5 .0 % ,麸皮 2 .0 % ,KH2 PO4 0 .1% ,MgSO4 ·7H2 O 0 .0 5 % ,10 μgVB1/ 10 0mL ,5 0 μgVB2 / 10 0mL ;适宜的摇瓶培养条件为 :培养基的起始pH 6 .0～ 7.0 ,5 0 0mL摇瓶装量为15 0mL ,接种量为 10 % ,培养温度 2 5℃ ,摇床转速为 12 0r/min ,菌丝干收率 39g/L。  

猪苓液体培养基筛选研究

以猪苓Polyporusumbellate(Pers.)Fries为材料 ,在 2 4 - 2 6℃ ,16 0r/min振荡培养条件下 ,进行了液体培养基的筛选研究。结果表明 ,猪苓生长的最适液体培养基为 :玉米粉 30g,酵母膏 30g ,KH2 PO41.0g ,MgSO4·7H2 O 1.0g,CaCO3 1.0g ,VB10 .lg,pH5 .8。  

三裂叶野葛毛状根的诱导及其固体培养和液体培养

发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）ATCC15834感染三裂叶野葛(Pueraria phaseoloides)叶片外植体20 d后产生毛状根,毛状根可直接从叶片外植体叶脉处或从叶脉处产生的愈伤组织上产生。感染35d后,约85%的叶片外植体产生毛状根。毛状根能在无外源生长调节剂的 MS固体和液体培养基上自主生长。PCR扩增结果表明，发根农杆菌Ri质粒的rolB和rolC基因已在三裂叶野葛毛状根基因组中整合并得到表达。与固体培养的毛状根相比,在液体培养基中培养的毛状根不仅生长迅速,也不会形成愈伤组织。在无外源生长调节剂的液体MS培养基中培养15d的三裂叶野葛毛状根的鲜重、干重、可溶性总糖含量及细胞内活性氧(ROS)含量分别为固体培养毛状根的1.59倍、1.18倍、5.25倍和1.16倍。  

花叶芋的液体静置培养快速繁殖

花叶芋是室内观叶植物,原产热带美洲亚马逊河流域。国内外在花叶芋的试管繁殖上已见若干报道,本文着重研究了花叶芋的成苗速度及液体培养的效果。