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1.
非典型肺炎病例标本中新型冠状病毒的分离与鉴定   总被引:108,自引:0,他引:108       下载免费PDF全文
目的对非典型肺炎的病原体进行分离鉴定,为该病的诊断、预防和治疗提供依据。方法采用细胞培养和乳鼠接种法,从非典型肺炎病例标本中分离致病病原体,通过电镜形态学、血清学和动物致病性观察及RTPCR扩增与部分基因序列分析,对分离的病原体进行鉴定。结果成功地从死亡病例尸解的肺组织标本和患者鼻咽拭子标本中采用细胞培养法分离出病原体。通过电镜在病变细胞及其培养上清中观察到大量冠状病毒样颗粒。免疫荧光染色检测非典型肺炎患者血清,表明分离的病毒与此次流行的非典型肺炎密切相关。分离的病毒可对乳鼠致病,并在发病乳鼠的肺组织标本中通过电镜同样观察到冠状病毒样颗粒。从非典型肺炎病例尸解肺组织、传代发病小鼠肺组织及分离物感染的细胞培养物中,通过RTPCR可分别扩增出冠状病毒的cDNA片段,测序结果显示其核苷酸序列与已知冠状病毒的同源性在60%左右。结论从非典型肺炎病例标本中已成功分离出一种新的冠状病毒,它与此次流行的非典型肺炎密切相关,很可能是此次流行的非典型肺炎的主要病原体 。  相似文献
2.
 Inter-simple sequence repeat (ISSR) markers generated by 22 primers were tested for their ability to distinguish among samples from 94 trees of 68 citrus cultivars. Within each of the six cultivar groups studied, most of these cultivars are so closely related that they are difficult to distinguish by other molecular-marker techniques. ISSR markers involve PCR amplification of DNA using a single primer composed of a microsatellite sequence anchored at the 3′ or 5′ end by 2–4 arbitrary, often degenerate, nucleotides. The amplification products were separated on non-denaturing polyacrylamide gels and detected by silver staining. ISSR banding profiles were very repeatable on duplicate samples. Different citrus species had very different fingerprint patterns. Within Citrus sinensis (L.) Osbeck and C. paradisi Macf., in which all cultivars have originated by the selection of mutants, ISSR markers distinguished 14 of 33 sweet orange and 1 of 7 grapefruit cultivars. Five of six lemon cultivars were discriminated by ISSR markers. Many differences were found among mandarin cultivars; however, all five satsuma cultivars analyzed had identical ISSR fingerprints. Four of five citrange cultivars were distinguishable, but ‘Troyer’ and ‘Carrizo’ had identical ISSR fingerprints. ‘Kuharske Carrizo’ citrange, which has better citrus nematode resistance than other ‘Carrizo’ citrange accessions, had unique ISSR fingerprints. Three ISSR markers that differentiated certain sweet orange cultivars were hybridized to Southern blots of sweet orange DNA digested with different restriction endonucleases. The sweet orange cultivars tested could be distinguished by these ISSR-derived RFLP markers. Moreover, one ISSR marker unique to ‘Ruby’ blood orange was observed in its progeny trees. Received: 9 September 1996 / Accepted: 4 April 1997  相似文献
3.
入侵中国大陆的红火蚁的鉴定及发生为害调查   总被引:74,自引:5,他引:69  
根据形态特征鉴定结果首次证实红火蚁.Solenopsis invicta Buren入侵中国大陆,并调查了广东省吴川市红火蚁发生为害情况。调查结果表明,发生区内部分地点红火蚁发生密度较高,主要发生于较稳定的生态环境中,如荒坡、草地、长满杂草的田埂等。红火蚁已对当地农业生产、人们的身体健康、日常生活等造成了不利影响。此外,Cyt b基因序列分析结果表明,采自美国佛罗里达和广东吴川的红火蚁与采自广东4个地方的热带火蚁S.gemninata(Fabr.)两物种间有61个变异位点,种内变异为0。限制性酶切多态实验(RFLP)的结果显示,BamHI酶在红火蚁的特异扩增片段中有一个识别位点,而在热带火蚁中无酶切位点;MspI酶在热带火蚁的扩增片段中也有一个识别位点,而在红火蚁中无识别位点。有酶切位点的扩增产物在酶切后分别获得近200bp与250bp的片段各一带。因此,用PCR-RFLP的方法可以简单快速地鉴别红火蚁和热带火蚁。  相似文献
4.
微卫星及其应用   总被引:58,自引:7,他引:51       下载免费PDF全文
微卫星是广泛分布于真核生物基因组中的短串联重复序列(1-5bp),具有突变速率快、多态性高等特性,已被广泛应用于生物遗传作图、群体遗传研究、个体间亲缘关系鉴定等方面。简要论述了微卫星的突变、位点的分离、数据的收集、在生物学中的应用及其存在的缺陷。  相似文献
5.
木麻黄小枝提取物的分离鉴定及其对幼苗的化感作用   总被引:48,自引:6,他引:42  
木麻黄是我国华南沿海重要的防护林树种,易衰退.从化感作用角度探讨其衰退原因.结果表明,木麻黄小枝提取物显著地抑制其幼苗的生长,具有化感作用.利用色谱和波谱技术从提取物中分离鉴定了5种化感物质:A.山奈黄素-3-α-鼠李糖苷;B.懈皮黄素-3-α-阿拉伯糖苷;C.樨草素-3',4'-二甲氧基-7-β-鼠李糖苷;D.山奈黄素-3-β-双鼠李糖苷;E.懈皮黄素-3-β-葡萄糖苷,均为黄酮类化合物.用A、B和C对木麻黄幼苗进行生物测定表明,3种化感物均显著地抑制木麻黄幼苗生长,尤其是抑制根生长.  相似文献
6.
Identification of broccoli and cauliflower cultivars with RAPD markers   总被引:43,自引:0,他引:43  
Summary RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) markers generated by 4 arbitrary 10-mer primers, discriminated 14 broccoli and 12 cauliflower cultivars (Brassica oleracea L.) by banding profiles. The size of the amplified DNA fragments ranged from 300 to 2600 base pairs. Twenty-eight percent of the markers were fixed in both broccoli and cauliflower, whereas 12.5% were specific to either crop. The rest were polymorphic in either or both crops. The markers generated by two and three primers were sufficient to distinguish each of the broccoli and cauliflower cultivars, respectively. The average difference in markers was 14.5 between broccoli and cauliflower markers, 5.8 between two broccoli cultivars and 7.9 between two cauliflower cultivars. Larger differences for each crop were found between cultivars from different seed companies than within the same company. RAPD markers provide a quick and reliable alternative to identify broccoli and cauliflower cultivars.  相似文献
7.
胜红蓟地上部化感作用物的分离与鉴定   总被引:42,自引:1,他引:41       下载免费PDF全文
韦琦  曾强 《植物生态学报》1997,21(4):360-366
 胜红蓟(Ageratum conyzoides)是华南地区的重要杂草,具有显著的化感作用。本文利用色谱和波谱技术对胜红蓟地上部化感活性成分进行分离和化学结构鉴定,得到两个化感作用物质:胜红蓟素(6,7—二甲氧基—2,2—二甲基色烯)和5,22—二烯—3β—豆甾醇。对这两个作用物的化感作用研究表明:胜红蓟素对受体幼苗生长有抑制作用,500×10-6处理对稗草生长达到完全抑制,对萝卜的抑制率也高达90%。浓度降到25×10-6对稗草和萝卜幼苗生长仍具有显著的抑制作用。  相似文献
8.
严防危险性害虫红火蚁入侵   总被引:42,自引:4,他引:38  
张润志  任立  刘宁 《昆虫知识》2005,42(1):6-10,F004
原产南美洲的红火蚁Solenopsis invicta Buren,先后入侵美国和澳洲,最近又入侵中国台湾,对人类健康和环境安全构成重大威胁。该文介绍了红火蚁的形态特征、与近源种的形态区别、生物学特性、入侵特性、危害以及预防、控制等方面的知识,最后提出我国大陆需要高度警惕,严防红火蚁入侵。  相似文献
9.
RAPD标记在紫菜遗传多样性检测和种质鉴定中的应用   总被引:41,自引:0,他引:41  
用RAPD技术对4类紫菜(Porphyra yezoensis,P.haitanensis,P.katadni var.hemiphylla和P.oligospermatangia)的15个无性系丝状体进行了遗传多样履分析,从50个OPERON引物中经过初筛,其中6个引物可以扩增出稳定的可重复的图谱。这6个引物共扩增出了60条带,多态性比例达97.1%。根据RAPD结果将这15个无性了紫菜的DNA  相似文献
10.
Applications of random amplified polymorphic DNA (RAPD) in molecular ecology   总被引:37,自引:0,他引:37  
Molecular genetic markers have been developed into powerful tools to analyse genetic relationships and genetic diversity. As an extension to the variety of existing techniques using polymorphic DNA markers, the Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) technique may be used in molecular ecology to determine taxonomic identity, assess kinship relationships, analyse mixed genome samples, and create specific probes. Main advantages of the RAPD technology include (i) suitability for work on anonymous genomes, (ii) applicability to problems where only limited quantities of DNA are available, (iii) efficiency and low expense.  相似文献
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