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1.
几种濒危植物及其近缘类群总DNA的提取与鉴定   总被引:121,自引:0,他引:121  
用低pH 介质,高盐沉淀蛋白质方法成功地从银杉(Cathaya argyrophylla Chun etKuang)、矮牡丹(Paeonia suffruticosa var. spontanea)、南川升麻(Cim icifuga nanchuanensisHsiao)、裂叶沙参(Adenophora lobophylla)的同属种泡沙参(A. potaninii)等植物中提取和部分纯化了细胞总DNA,并对其产率、质量和纯度作了鉴定。此方法的关键是用了一个低pH提取介质,它能有效防止组织破碎及沉淀大量材料时的电离化作用及酚化合物的进一步氧化。所得DNA 不需经氯化铯梯度离心或柱层析,直接可用于限制性片断长度多态性(RFLP)及随机扩增的DNA多态性(RAPD)等分子水平的遗传标记。为检测濒危植物的遗传多样性提供了一套迅速、简便和可靠的技术方案  相似文献
2.
Rapid restriction mapping of DNA cloned in lambda phage vectors   总被引:62,自引:0,他引:62  
A protocol for the rapid restriction mapping of phage λ clones has been developed. Partial digestion products are selectively labelled at the right or left cohesive λ DNA termini by hybridisation with [32P]oligonucleotides complementary to the single-stranded cos ends. After gel electrophoresis and autoradiography, the restriction map can be directly determined from the “ladder” of partial digestion products.  相似文献
3.
扬子鳄消化道内分泌细胞的免疫组织化学研究   总被引:58,自引:3,他引:55  
应用7种特异性胃肠激素抗血清对扬子鳄消化道内分泌细胞进行了免疫组织化学定位。5-羟色胺细胞在消化道各段都有分布,以十二指肠密度最高,食道、直肠其次。生长抑素细胞在胃幽门部非常密集,胃体中等,胃贲门部较少,十二指肠偶见。胃泌素细胞主要分布于十二指肠前段,空肠、回肠和直肠偶见。许多血管活性肠肽细胞分布于胃贲门部,胃体和胃幽门部少数。胰高血糖素、胰多肽和P-物质在消化道各段均未检出阳性细胞。结合扬子鳄的  相似文献
4.
细菌解磷能力测定方法的研究   总被引:58,自引:1,他引:57  
选择分解有机磷能力较强的3株细菌和溶解磷矿粉较强的4株细菌,砂培4周后,用不同的方法测定水浸提液中磷的含量。发现不同的细菌解磷能力差异很大,细菌在分解磷化合物的同时,一部分磷被细菌同化,一部分以无机磷酸盐状态贮藏在细菌细胞内。直接测定浸提液中无机磷酸盐的含量,将大大低估细菌的解磷能力,必须将浸提液消煮,才能比较正确地反映细菌分解磷的能力。  相似文献
5.
苦皮藤素V对东方粘虫中肠细胞及其消化酶活性的影响   总被引:39,自引:4,他引:35       下载免费PDF全文
 苦皮藤素V是从杀虫植物苦皮藤Celastrus angulatus Max.根皮中分离的一种对昆虫具有毒杀活性的新化合物。该文通过电镜观察和生化分析研究了其对东方粘虫Mythimnaseparata(walker)幼虫中肠组织及中肠主要消化酶活性的影响。电镜观察发现,中毒试虫的中肠细胞及其细胞器发生明显病变:柱状细胞顶膜微绒毛零乱、减少;线粒体肿胀,出现空白亮区,双层膜不完整;细胞质密度降低,细胞器排列紊乱;内质网池扩张,囊泡化,粗面内质网减少;杯状细胞杯腔变大,微绒毛减少。消化酶活性测定结果表明,中毒试虫中肠的蛋白酶、淀粉酶及脂肪酶的活性和正常虫相比,无显著变化。因此认为,苦皮藤素V主要作用于中肠细胞的质膜及其内膜系统。  相似文献
6.
应用5-羟色胺特异性抗血清,对眼镜蛇和乌梢蛇消化道含5-HT的内分泌细胞进行了免疫组织化学定位和比较。5-HT细胞的形态在两种蛇中大致相同,消化道各部位都有呈圆形和长梭形(具胞突)的阳性细胞。食道和胃以圆形细胞为主,肠道段则以长梭形细胞为主。眼镜蛇5-HT细胞以十二指肠密度为最高,食道最低;乌梢蛇以幽门部密度为最高,直肠最低。肠道段两者分布特点相同,从十二指肠至直肠分布密度渐疏。本文还对两种蛇5-HT细胞分布型的原因、形态和功能相适应的特点进行了讨论。  相似文献
7.
竹叶青蛇消化道内分泌细胞的免疫组织化学定位   总被引:38,自引:0,他引:38  
张志强  张盛周  吴孝兵 《动物学报》2001,47(6):666-671,T001
应用8种特异性胃肠激素抗血清对竹叶青蛇(Trimersurus stejnegeri)消化道内分泌细胞进行了免疫组织化学定位。5-羟色胺细胞和生长抑素细胞在整个消化道中均有分布。5-羟色胺细胞以十二指肠和回肠密度为最高,空肠、直肠和幽门其次,胃体较低,食道和贲门中偶见;生长抑素细胞在十二指肠处数量最多,胃体、幽门和空肠其次,其余消化道各段偶见;胰高血糖素细胞只见于十二指肠和空肠;血管活性肠肽在贲门和胃体处有少量阳性细胞分布,食道中偶见。以上各处内分泌细胞的分布密度差异显著。未检出胃泌素、P-物质、胰多肽和胰岛素免疫反应阳性细胞。上述内分泌细胞的分布特点可能与竹叶青的摄食习性和生活环境有关。  相似文献
8.
扬子鳄消化道嗜银细胞的分布及形态学观察   总被引:35,自引:2,他引:33       下载免费PDF全文
该文用龙桂开浸银法对扬子鳄消化道嗜银细胞的分布及形态进行了观察。结果表明:嗜银细胞分布于整个消化道中,从食道到直肠。其中,十二指肠和回、直肠交接处密度很高,胃体及直肠很低。嗜银细胞形态多样。食道嗜银细胞位于上皮基部和固有膜中,呈椭圆形或不规则形。胃嗜银细胞位于胃腺部,圆形或椭圆形,有的可见明显的胞突。肠嗜银细胞位于上皮细胞之间,呈长柱形、纺锤形、长颈瓶形或锤状。多数细胞两端有较长胞突,分别与固有膜  相似文献
9.
北京鸭消化道内分泌细胞的免疫组织化学研究   总被引:34,自引:3,他引:31  
应用七种消化道激素抗血清,对北京鸭消化道内分泌细胞进行了免疫组织化学定位,促胃素释放肽细胞大量分布于腺胃和肌胃。生长抑素细胞在腺胃和肌胃数量很多,在幽门部密集,且偶见于十地二指肠,胃素细胞在幽门部非常密集,并较多分布于整个小肠,肌胃内亦有少量。5-羟色胺细胞大量见于肠管各段,并偶见于幽门,少量胰多肽细胞见于腺胃、十二指肠和空肠,未检出胃动素和抑胃肽细胞。  相似文献
10.
顽拗植物类群的总DNA制备   总被引:33,自引:0,他引:33  
从富含多糖的顽拗植物类群提取与纯化DNA是许多研究领域例如居群生物学、生物多样性、分子标记辅助育种研究普遍遇到的难题。以西南桦 (Betulaalnoides)为例发展了一套改进的方案 ,有效地从这种顽拗植物的干叶和鲜叶中制备了DNA。此方案包括 3个关键步骤 :首先从植物细胞匀浆中用不含CTAB的缓冲液洗去大部分多糖和其他次生物质 ;在提取介质中采用 3%CTAB而不是通常用的 2 %CTAB ;将常用的高盐去糖的纯化操作提前到用异丙醇沉淀DNA之前进行。从西南桦提取的DNA已成功地用于RAPD_PCR扩增和限制性酶切。这个简单、经济和可靠的改进方案也适用于许多其他的顽拗植物类群。  相似文献
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