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随着数字技术、信息网络技术的发展及各种数字网络终端的普及,为了让广大读者的阅读更具互动性,便于快速寻找所需内容,阅读、下载或存储,并实现与其他资源的互联互通,本刊已开通HTML格式的全文阅读模式,其中包括各种功能的标签链接,可为读者二次利用文献内容提供便利。本刊网址:http://jmi.fudan.edu.cn,欢迎登录。     

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第二次国际暨第十一次全国膜生物学学术研讨会通知

<正>2010年11月9日-12日,浙江省宁波市由中国科学院生物物理研究所、中国生物物理学会等单位联合承办的《第二次国际暨第十一次全国膜生物学学术研讨会》定于2010年11月9日-12日在宁波市镇海九龙山庄召开。     

具有重要应用价值的真核表达系统

基于Ｔ７ＲＮＡ聚合酶与Ｔ７强启动子（Φ１０）间的特异认识而建立起来的偶联表达系统在大肠杆菌中已取得了令人满意的结果。最后，该系统在酵母、昆虫、浦乳动物细胞和植物细胞中陆续实现了高效表达。Ｔ７ＮＲＡ聚合酶－Φ１０启动子偶联表达系统的相对独立性和高效性，不仅预示着该系统可以在真核基因工程中发挥重要作用，而且其独特的作用机制为人们探索新的特异高效真核表达系统提供了一个可供借鉴的模式。     

浅谈电能计量装置二次回路接地对计量的影响

本文阐述了三相四线组合计量箱存在的问题,分析了电压互感器二次回路中性点不接地、电流互感器二次回路中性点不接地对三相四线组合计量箱的影响,举例探讨了三相三线计量方式接地对计量的影响,提出了电能计量装置二次回路接地的预防和整改措施。     

肿瘤特异性蛋白B7-H4纳米抗体的筛选和鉴定

羊驼体内存在天然缺少轻链的重链抗体,克隆重链抗体可变区(VHH),即可构建单域抗体(single-domain antibodies,sdAbs),又称纳米抗体(nanobody,Nb)。利用非免疫羊驼噬菌体文库筛选肿瘤特异性蛋白B7-H4的纳米抗体,经过4轮淘选,ELASE鉴定阳性克隆噬菌体,测序获得其DNA序列后体外转录为mRNA,将修饰纯化后的mRNA转染到肿瘤细胞,利用细胞免疫荧光检测mRNA在肿瘤细胞内是否表达,Western印迹进一步验证其表达情况;通过CCK-8法鉴定其对肿瘤细胞的增殖抑制能力;划痕实验鉴定其对肿瘤细胞迁移能力的影响;Transwell法鉴定其对肿瘤细胞的侵袭能力的影响;裸鼠荷瘤模型瘤旁注射mRNA,鉴定其在体内实验对肿瘤组织的作用。结果显示,通过淘选获得1个高亲和性的噬菌体株菌H6;DNA测序并导出的氨基酸序列符合羊驼纳米抗体结构;将其mRNA导入肿瘤细胞,能有效表达出纳米抗体H6;转染H6-mRNA的肿瘤细胞(0.84±0.08)与未转染H6-mRNA的对照组(1.83±0.04)相比,其增殖能力明显受到抑制,P<0.01,其迁移和侵袭能力(78.60±5.36)明显低于空白对照组(197.80±21.04),效果优于B7-H4 mRNA的siRNA(95.40±16.56);在裸鼠乳腺癌模型中能有效抑制肿瘤生长,效果优于紫杉醇和B7-H4 mRNA的siRNA。这说明筛选所得抗B7-H4纳米抗体H6能特异结合B7-H4蛋白并封闭其功能,导致肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭受到抑制。该结果为利用B7-H4作为治疗癌症的靶点提供了实验基础。     

介绍一个新型膜蛋白（Ⅵ型）

介绍一个新型膜蛋白（Ⅵ型）潘华珍许彩民（中国医学科学院基础医学研究所，北京１００００５）关键词膜蛋白（Ⅵ型）Ｓｉｎｇｅｒ曾将膜蛋白分成５型：Ⅰ型与Ⅱ型都是多肽链在膜内穿过一次的，两者之差是一个Ｎ末端在胞外，一个Ｃ末端在胞外；Ⅲ型是多肽链多次穿膜；Ⅳ型...     

不同海拔地区种植的水稻次库碳水化合物含量的比较

在品种、土壤、底肥和追肥等一致的情况下,对三个不同海拔地区种植的水稻的次库(茎+叶鞘)中碳水化合物含量作了比较,结果表明:齐穗和黄熟期次库中总糖或淀粉含量均随海拔增高而增加。但在黄熟期,高海拔地区次库的总糖或淀粉含量比齐穗期的增加,而低海拔地区次库的总糖或淀粉含量则比齐穗期的降低。 齐穗期时,次库的淀粉含量随施用的氮素肥量的增加而降低。在黄熟期,温凉稻作区水稻次库的淀粉含量均随氮素底肥施用量的增加而增加,低熟地区水稻次库的淀粉含量则趋于一致,不过不同地区相比各处理次库的淀粉含量均因海拔增高而增加。 不同时期的氮素追肥使齐穗期次库淀粉含量因追肥时间推迟而增加,唯元江晚穗肥处理的低于中穗肥处理的。黄熟期因追肥时间提早而次库的淀粉含量增加,但元江以早穗肥处理的次库淀粉含量最低。与齐穗期相比时,低海拔地区的各个处理,其次库的淀粉含量均减低,但高海拔的昆明温凉稻作区,施早和中穗肥的水稻,在黄熟期次库的淀粉含量反而增高。还可以看出水稻种植地海拔越高,其次库淀粉含量对追肥时间越敏感。 基于水稻次库中淀粉含量对氮素肥料的反应,就三地气候条件讨论了上述的差异。     

MCF—7细胞在亚多层中细胞膜极性的变化

Sub-multilayer of MCF-7 cell, an established human breast carcinoma cell line, was achieved by culturing the cells on millipore filters for a long time. The superficial layer cells maintained their membrane polarity features as MCF-7 cells in monolayers did. MAM-6, a human milk fat globule membrane antigen, was polarized distributed in apical domain of 97.5% superficial layer cells revealed by immunoperoxidase cytochemistry. Whereas, among the low layer cells, which had no free surface (apical domain) toward the culture medium and did not show morphological polarity features, only 12.9% expressed surface MAM-6 with weak immunoperoxidase staining and random distribution. But the immunostaining for detecting cytoplasmic MAM-6 in low layer cells was stronger than that in superficial layer cells, indicating that the vectorial delivery and insert of MAM-6 carrying glycoprotein to the plasma membrane seemed to be stopped or declined and became undirectional in the later situation. The study demonstrates that an asymmetric spatial environment, which is composed of a liquid phase space and a solid phase space, is crucial for the establishment of epithelial membrane polarity of MCF-7 cells.